北京DNA去磷酸化试剂盒厂家

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产供应北京DNA去磷酸化试剂盒厂家，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：北京DNA去磷酸化试剂盒厂家
规格：20次
产地：国产|进口
编号：BTN130828
品牌：百奥莱博
分子克隆时，载体的自连极大降低了连接效率，而对载体DNA 两个5´端的-PO4基团进行去磷酸化处理可以抑制自连反应。此外在进行DNA或RNA5´端标记前，也需要将其本来的-PO4基团去除再加上标记基团。本公司开发的DNA去磷酸化产品就是针对这一目的而开发。

产品特点：
1.基于细菌碱性磷酸酶，反应在较高温度进行，效率更高。
2. 把DNA和RNA 5´端的-PO4基团变成-OH基团，丧失连接能力。
3. 模板可以是单链，也可以是双链，既可以是DNA，也可以是RNA。
4.处理后的核酸纯化后可以直接用于连接反应和标记反应。
5. 本产品足够20次去磷酸化实验。

试剂盒组成

 

成分	规格
10×去磷酸缓冲液	100μl
细菌碱性磷酸酶(0.5U/μL)	50μl
超纯水	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期为6个月。

使用方法：
注意：dNTP和ATP 也是碱性磷酸酶的底物，所以如果核酸溶液中有dNTP和ATP，一定要先将其去除。否则它们会耗掉大量的碱性磷酸酶，降低DNA 去磷酸化效率。

1、在微量离心管中配制下列反应液(50μL)：

成分	用量
DNA片段	不超过10pmol
10×去磷酸缓冲液	5μl
细菌碱性磷酸酶	2.5μl
超纯水到	50μl

2、65℃反应30分钟。如果是RNA样品，建议在37℃反应30分钟。
3、酚*仿抽提去除酶活性，乙醇沉淀DNA 待用(见附)。

附：酚/*仿抽提DNA、乙醇沉淀浓缩DNA(本试剂盒不提供相关试剂，需要从本公司另购相关试剂，下列操作仅供参考)：
1、在50μl DNA溶液中加入50μl超纯水增加体积，以免纯化过程中DNA 丢失。如果有必须，可以加入和4μL 核酸助沉剂提高回收效率。
2、加入100μL 酚/*仿/异戊醇25：24：1 混合液震荡半分钟混匀，室温12000g离心3分钟，转移上清到新离心管中。
3、重复上步操作一次。
4、加0.1倍体积(即10μL)的3 M 乙酸*溶液(pH5.2)。
5、再加入2.5倍体积(即250μL)的无水乙醇。
6、混匀后12000g 4℃离心10分钟，小心弃上清。
7、加入1mL 70%乙醇，短暂离心3分钟后小心弃上清。
8、短暂离心5秒，吸弃残留液体(约30-50μL)。
9、室温放置2分钟干燥后加入适量的超纯水溶解DNA，立即使用或放-20℃长期保存。

更多有关北京DNA去磷酸化试剂盒厂家的价格及使用说明等，请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：

·DNA尿素-PAGE上样液
编号：BTN100874
英文名称：DNA Urea-PAGE Loading Buffer
规格：1.5mL
本品是2×的DNA尿素-PAGE变性电泳上样液，含有去离子甲酰胺、EDTA、染料等。

产品特点：
1. 即开即用，不需要单独配制各种溶液。
2. 使用简单，电泳的DNA样品与本上样液1：1混合，加热95℃处理5分钟，0℃冷却即可直接上样。
3.染料分子小，染色时不会干扰DNA条带的观察。
4.跟本公司的DNA尿素-PAGE变性电泳套装兼容。

储存条件：低温运输和-20℃保存，有效期一年。

·大肠杆菌BL21(DE3)pLysS化学感受态细胞
编号：BTN90507
英文名称：E.coli BL21 (DE3)plysS Chemical Competent Cell
规格：0.1mL*10
本产品是大肠杆菌BL21(DE3)plysS菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的热击转化。使用pUC19质粒检测本产品，转化效率可达107。该菌株带有质粒plysS，具有*霉素抗性，此质粒含有表达T7 溶菌酶的基因，T7 溶菌酶能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰IPTG 诱导的表达。本感受态细胞具有*霉素抗性，适合于毒性蛋白和非毒性蛋白的表达。
菌株基因型为：F- ompT hsdSB(rB-mB-)gal dcm(DE3)pLysS Camr

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备试剂：目的DNA、SOC或LB培养基等。

使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL，根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA 所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB 固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。

注意事项：
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA 总量较少，可取200-300μL转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4,000rpm，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。


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·一管式反转录试剂盒
编号：BTN170403
英文名称：One-tube RT Kit
规格：10次
本产品是一管式反转录预混Mix，内含反转录第一链合成所需的所有试剂(MMLV、Random primers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、反应Buffer等)，用户只需加入模板 RNA和RNase-Free 水即可进行反应。

产品特点：
1. cDNA的合成更加方便，用户只需准备模板和水即可进行反应。
2.快捷，操作步骤已经最大限度地简化，能减少污染，降低实验误差。
3. 效率高，特殊优化的oligo dT和N6 随机引物配比，反转录效率高。
4. 速度快，只需42℃，20分钟即可完成cDNA 第一链的合成。
5. 能够用于GC含量高，二级结构复杂的RNA 模板，合成cDNA片段长度可达12kb。
6. 兼容性好，合成的cDNA可直接用于荧光定量PCR反应，灵敏度高、稳定性好。

试剂盒组成：

成分	规格
2×RT MasterMix	0.1ml
RNase-Free 水	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 解冻后颠倒轻弹混匀各组分，以20μL 体系为例，按下表加入(2×RT Master Mix很粘稠，取用前请短暂离心，并避免吸头外壁沾附损失)：
2×RT MasterMix

10μl
Total RNA/mRNA 模板(自备)	50ng-2μg/5-200ng
补RNase-Free 水到	20μl

 注意：对于二级结构很复杂的RNA 模板，推荐使用变性步骤，即在操作步骤之前，将模板RNA在65℃孵育5分钟后迅速转移到冰上，再进行下一步操作。
2. 轻轻混匀，42℃孵育20分钟进行反转录反应。
 注意：对亍二级结构复杂或者GC含量高的模板，可以提高温度至50℃，以增强反转录效率。
3. 85℃加热5秒钟灭活反转录酶置冰上备用(更长时间保存请置于-20℃)。

注意事项：
1. 实验过程中请注意避免RNase污染，防止RNA降解或实验中的交叉污染。
2. 使用之前请完全溶解并充分混匀，以防因盐离子浓度丌均影响实验结果。
3. 使用后应尽快放回-20℃，避免反复冻融。
4. RNA模板的完整性对cDNA合成效率起着决定性作用，因此请选择可靠的RNA提取/纯化方法。
5. 如果扩增片段较长或者RNA结构复杂，为了加强转录效果，可以将RNA单独置于65-70℃加热5-10分钟后再加入体系。
6. 操作人员请带口罩和一次性手套，并经常更换手套。


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BL0633 SP-琼脂糖凝胶HP SP Sepharose HP
无内毒素质粒大提试剂盒 
BTN130568 α-Tubulin小鼠单抗 α-Tubulin Mouse Mab
3-**甲*(代"酸") HAS 535-80-8
ARB13309 小鼠髓磷脂碱性蛋白(MBP)酶联免疫定量检测 Mouse myelin basic protein,mbp ELISA KIT
BTN100203 通用型LAMP试剂盒 Universal LAMP Amplification Kit
F030802 BIOTIN标记小鼠抗人IgG Fc抗体 Monoclonal Mouse Anti-Human IgG(FC)*BIOTIN
没食子酸正丙酯 Acetoacetanilide 121-79-9
D-亮*酸 D-Lysine 328-38-1
F030606 FITC标记山羊抗小鼠IgG2a抗体 Goat Anti-Mouse IgG2a*FITC
乙酸缓冲液(0.05mol/L,pH4.3)   500ml
ARB13864 猪生长激素释放多肽(GHRP)含量分析 Porcine growth hormone releasing Peptide,ghrp ELISA KIT
SJ0686 200bp
PY01-075  无水葡萄糖  500克  

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