- ￥170 - 1970
- 百奥莱博
- YT265-PHQ
- 北京
- 2025年07月07日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
837
- 英文名：
Biotin-labeled YY1 Probe For EMSA
- 保质期：
一年
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
YY1 consensus oligo的序列如下：
5"-CGC TCC CCG GCC ATC TTG GCG GCT GGT-3"
3"-GCG AGG GGC CGG TAG AAC CGC CGA CCA-5"
本生物素标记EMSA探针已经过纯化，可以直接用于EMSA结合反应。本生物素标记EMSA探针可以和百奥莱博的化学发光法EMSA试剂盒(YT190)配套使用。
注意事项：
1. 避免加热到40℃以上，温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于基于生物素标记的EMSA检测的详细操作可以参考百奥莱博的化学发光法EMSA试剂盒(YT190)的使用说明。
储存条件：-20℃，有效期一年。
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文献和实验（通常是含有转录因子结合位点的启动子序列）相互作用的调控蛋白/转录因子，获得目的基因的启动子序列后，使用该方法可以筛查48/96种常见的调控蛋白/转录因子与启动子序列结合情况。该方法利用转录因子与特定DNA序列结合的特点，针对每一种转录因子设计相应的生物素标记探针；当混合探针与核蛋白样本共同孵育时，探针与相应的转录因子结合形成转录因子/探针复合物；除去游离的探针，收集转录因子/探针复合物；分离复合物中的DNA探针，探针的量与转录因子含量呈正相关。在探针混合物中同时加入启动子片段，如果DNA序列中含有
，可以合成核酸后自行添加，部分已知蛋白有商业化的抗体也可以直接购买。现在大多数实验室已经不再使用放射性标记，生物素使用相对较多。2、形成蛋白-探针复合物（1）在0.5ml离心管中按顺序将下列组份混匀：蛋白样本（2-5μg）Xμlpoly d(I-C)1μlBinding Buffer2μlNuclease-Free ddH2OXμl总体积9μl（2）冰浴5min后，加入1μ探针。（对照组加1ul对照探针）（3）PCR仪中室温（20-23℃）温育30min。3、制备凝胶，电泳（1）制备6.5%非变性聚丙
实验需要制胶、跑胶、转膜、检测等步骤，操作稍显繁琐；特别是在样本量较大的时候，更显得力不从心。 为了解决这些转录因子检测中的问题，美国Signosis开发出了一种快速高效的半定量活性转录因子检测方法——滤板法。这种方法同样基于转录因子与特定DNA序列结合的原理，以标准96孔板为载体进行实验操作。针对不同的转录因子设计特异性的生物素标记DNA探针，探针与样本核提取物中相应的转录因子结合形成TF/DNA复合物。用滤板除去游离的DNA探针，随后从滤板上洗脱并收集TF/DNA复合物中的DNA探针。用标准
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