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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
17
- 供应商:
圻明
- 检测范围:
详见说明
- 检测方法:
免疫组织化学
- 应用:
病理学研究
- 适应物种:
人大小鼠兔牛
- 标记物:
HRP-SA
- 样本:
组织
- 规格:
50T-100T
免疫细胞化学染色方法
1、细胞标本置于载玻片上;
2、固定:建议使用95%乙醇或10%中性缓冲福尔马林固定液固定10分钟;
3、稍水洗,载玻片上加1%Triton X-100试剂,室温下孵育10分钟,PBS冲洗3x3分钟;
4、根据第一抗体的要求,对细胞进行相应的抗原修复;
5、如有必要,每张载玻片上加过氧化物酶阻断试剂,室温下孵育10分钟,PBS冲洗3x3分钟;
6、除去PBS,载玻片上加第一抗体,室温下孵育60分钟或4℃过夜,PBS冲洗3x3分钟;
7、除去PBS,载玻片上加检测试剂盒(按照试剂盒说明书进行操作),PBS冲洗3x3分钟;
8、除去PBS,根据检测试剂盒选择相应的显色系统,后中性树胶封固。
备注:更好的方法是通过离心或直接收集将细胞聚拢,再用蛋清或琼脂包裹后形成细胞块进行固定、脱水、包埋、切片,再按照免疫组化染色步骤进行操作。
免疫组织化学技术是利用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记于结合后的特异性抗体上的显示剂,如酶、金属离子、同位素等,显示一定的颜色。借助显微镜、荧光显微镜或电子显微镜观察其颜色变化,从而在抗原抗体结合部位确定组织、细胞结构的一门新兴组化技术。
在病理学研究中,免疫组化技术的作用和意义颇为重要。免疫组化在肿瘤诊断和鉴别诊断中的实用价值受到普遍认可,其在低分化或未分化肿瘤的鉴别诊断时,准确率可达50-75%。
组织的固定:病理学研究和免疫组化实验中,组织的固定是非常重要的一步。将目的组织放于某些化学试剂中,使组织中的细胞物质接近于具有生命功能时的结构和形态称为固定。组织固定还要减少外源性和内源性分解酶的作用,防止细胞自溶等,从而保持组织和细胞内的抗原性,使抗原不失活。
S100钙结合蛋白A15,S100A15,免疫组化试剂盒人具有以下特点:多聚物技术,使得酶分子与二抗IgG分子直接结合形成的多聚物分子高度的敏感性、染色强度,可以避免由于生物素引起的非特异性背景显色,更适合于生物素含量较高的组织细胞的免疫组化实验;孵育时间短,只需孵育15分钟,使得免疫组化实验时间大为缩短,是医院病理科开展免疫组化实验的理想试剂盒。
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文献和实验综合征;最后明确发作的病因是什么[1]。 不同类型的癫痫具有不同的临床发作特征,但所有癫痫发作都有共同的特征: 图1. 国际抗癫痫联盟的癫痫分类框架[2] 癫痫相关生物标记物[3]: 在癫痫发作后脑脊液以及血液循环中的部分生物化学物质含量均会产生一定特异性的变化。随着测序技术的进步,在获取人脑组织样本方面的困难促使研究人员在癫痫的背景下对血液、血清、血浆和脑脊液中的标本进行了研究,并进一步寻找癫痫发作期相关标志物。 癫痫发作期相关的蛋白 1. S100β 蛋白 S100β 是一种钙结合蛋白,主要由中枢
是否特异性辨认正确蛋白。举例来说,表观遗传学重要蛋白 TET1,一般在细胞内的表达量较低, 蛋白生命周期也短, 往往不易侦测。这时可进一步使用过表达 TET1 的细胞裂解液作对照(下图 B),可看到抗体辨识的条带会明显增强,确定抗体辨识具有特异性。 另一个例子,黑色素瘤标记物-S100B 是钙结合蛋白,主要在中枢神经细胞表达,特别是星形胶质细胞。在黑色素瘤细胞和其他一些组织也发现 S100B 表达。为黑色素瘤的独立预后标志物。GeneTex 的 S100 beta antibody(GTX
肝炎等)。 (一)肿瘤 蛋白组学用于肿瘤研究,旨在研究蛋白质差异表达,建立蛋白质表达数据库;筛选肿瘤标记蛋白,确立早期诊断标志物,确定肿瘤治疗靶标。目前对人类多种肿瘤(包括肝癌、乳腺癌、鼻咽癌、膀胱癌、肺癌、大肠癌等)的研究均取得一定进展。 国内宋海燕等对有无转移的肝细胞性肝癌(HCC)组织进行二维凝胶电泳和质谱分析,发现16个蛋白质表达有差异,包括S100钙结合蛋白(S100)、热休克蛋白27(HSP27)、细胞角蛋白18(CKl8)等,其中HSP27在转移性HCC中高表达,提示
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