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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 细胞类型:
原代细胞
- 品系:
原代细胞
- 组织来源:
人,鸡,大小鼠
- 物种来源:
人,鸡,大小鼠
- 免疫类型:
见说明书
- 细胞形态:
见说明书
- 运输方式:
低温运输
- 年限:
5-10年
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
5×105cells/T25培养瓶
人胃癌组织源成纤维细胞培养基信息:
Neurobasal-A、B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
我们推荐使用
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
三、使用方法
客户收到人胃癌组织源成纤维细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 细胞消化
1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
3) 用吸管轻轻吹打混匀、分散细胞,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4) 待细胞完全贴壁后,培养观察;之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。
四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
5. 该细胞只可用于科研。
备注:由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同,以上方法仅供各实验室参考人胃癌组织源成纤维细胞
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Nat Commun:肖东/孙妍课题组合作揭示 m6A 修饰调节细胞自噬的新机制
的 RNA 修饰可响应不断变化的营养信号实现迅速的基因表达调控,对自噬发挥重要影响,并且一些表观转录组成员在此过程中可能发挥关键作用。 该研究首先基于原代分离的小鼠胚胎成纤维细胞 (mouse embryonic fibroblasts, MEFs),通过蛋白组学检测,发现在营养缺乏期间,m6A 阅读器 YTHDF3 表达显著上调(图 1a)。进一步的分子和细胞功能实验表明,YTHDF3 对自噬诱导至关重要,YTHDF3 过表达促进营养缺乏时自噬体形成和溶酶体降解(图 1c-l)。 图
wanglingyun1981 :)各位大虾帮帮忙,用绿色荧光蛋白以及neo构建载体,转染牛成纤维细胞后,开始是绿色荧光还很亮,可是G418筛选一段时间后,会荧光会越来越弱,到最后筛出单克隆,也几乎没有有荧光的单克隆了。原因是什么?有好的解决办法吗?谢谢各位 !! 绿色荧光蛋白用的cmv启动子。 slytjiaofei 1.开始时的荧光很强,这个很好解释,因为开始时未进行G418筛选,所以发绿色荧光的细胞有两部
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