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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
771
- 英文名:
Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit
- 保质期:
12个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
4℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
细胞质/细胞核蛋白提取试剂盒(国产,进口)的品牌:百奥莱博,是优质的蛋白质研究产品,用于生化研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多细胞质/细胞核蛋白提取试剂盒等蛋白质研究产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:细胞质/细胞核蛋白提取试剂盒(国产,进口)
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
英文名:Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit
编号:ALH387
规格:50次
本试剂盒提供了一种简单、方便的从培养细胞或新鲜组织中抽提核蛋白与浆蛋白的方法。约90分钟就可以完成培养细胞的核蛋白与浆蛋白的分离。抽提得到的蛋白为非变性,有活性,可以用于Western、EMSA、footprinting、报告基因检测以及酶活力测定等后续操作。本试剂盒是通过细胞浆蛋白抽提试剂A和B,在低渗透压条件下,使细胞充分膨胀后破坏细胞膜,释放出浆蛋白,然后通过离心得到细胞核沉淀。最后通过高盐的细胞核蛋白抽提试剂抽提得到核蛋白。本试剂盒可以抽提50个,数量为2×10^6个Hela细胞(约40mg)的样品。可根据需要按比例放大,缩小提取规模。
试剂盒组份:
浆蛋白提取试剂A———————————10ml
浆蛋白提取试剂B———————————0.55ml
核蛋白提取试剂———————————2.5ml
注意事项:
1.需自备PMSF, PMSF一定要在抽提试剂加入到样品前2-3分钟内加入,以免PMSF在水溶液中很快失效。
2.抽提蛋白的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3..对于组织样品,本试剂盒仅适合于新鲜组织,对冻存过的组织抽提效果差。可以抽提的组织样品数通常不足50个。
4.使用本试剂盒抽提得到的细胞核蛋白与细胞浆蛋白都可以直接用我司的BCA蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度。但不适合用Bradford法测定蛋白浓度。
储存条件:4℃,有效期12个月。
本品别名:细胞核蛋白/浆蛋白分提试剂盒|细胞质/细胞核蛋白提取试剂盒
想要了解更多关于细胞质/细胞核蛋白提取试剂盒(国产,进口)的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联*(代"系")。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
·植物大量DNA快速提取试剂盒(CTAB法)
编号:ALH603
英文名称:Plant DNA Rapid Extraction Kit
规格:10次
本试剂盒适用于快速大量提取植物基因组DNA。改进的经典CTAB植物DNA抽提液内(添加多种针对植物特点的多糖、多酚去除成份)迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶,*仿抽提后通过离心清除多糖、多酚和蛋白质,然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 进一步将多糖、多酚和细胞代谢物、蛋白等杂质去除,最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。
试剂盒组份(10次):
裂解液PL————————100ml
结合液PQ————————30ml×2
抑制物去除液IR—————100ml
漂洗液WB————————25ml×2
洗脱缓冲液EB——————15ml×2
吸附柱AC————————10个
收集管(2ml)—————10个
产品特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的*酚等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
3.快速,简捷,单个样品操作一般可在1小时内完成。
4.数种去多糖、多酚成份和多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.7~1.9,长度可达30 kb -50kb,可直接用于PCR,Southern-blot和各种酶切反应。
注意事项:
1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到9,000xg,可容纳50ml离心管的台式离心机。
2. 开始实验前将需要的水浴先预热到65℃备用。
3. 需要自备*仿/异戊醇(体积比24:1混合)、无水乙醇和β-巯基乙醇。
4. 结合液PQ 和抑制物去除液IR中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. 不同来源的植物组织材料中提取DNA 的量会有差异,一般100mg新鲜组织典型产量可达3-25μg。
6. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA, 不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱, 但应该确保pH大于7.5, pH过低影响洗脱效率。用水洗脱DNA应该保存在-20℃。DNA如果需要长期保存,可以用TE缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH 8.0),但是EDTA可能影响下游酶切反应,使用时可以适当稀释。
储存条件:室温,有效期12个月。
细胞质/细胞核蛋白提取试剂盒(国产,进口)关键词:细胞核蛋白/浆蛋白分提试剂盒,细胞质/细胞核蛋白提取试剂盒
大量抗凝血基因组DNA提取试剂盒
9004-67-5 Methyl Cellulose 甲基纤维素
SJ0335 HT(原装)
6578-06-9 5-*-4-*-3-吲哚基磷酸盐 BCIP
F030101 HRP标记小鼠抗乙肝核心抗原抗体 Monoclonal Mouse Anti-HBcAg*HRP
聚腺苷酸 α-D-Lactose monohydrate
PY02-207 改良V-P培养基 250克
鸟苷 5-Fluorouracil 118-00-3
2′-脱氧尿苷 TMB?2HC1 951-78-0
PY02-238 李氏菌选择性培养基基础(MMA) 250克
1%甲**(代"胺")蓝水溶液 100ml
ARB10817 人抗肌动蛋白抗体(AAA)酶标法分析 Human anti-actin antibody,aaa ELISA KIT
2,5-双(5-叔丁基-2-*并恶唑基)噻*(代"吩") OGP 7128-64-5
吉西他滨 TMAC 95058-81-4
直接胆红素(DBIL)检测试剂盒(钒酸微板法) 100T
BOC-D-高*丙*酸 Procyanidin 82732-07-8
2-硫*(代"脲")嘧啶 Basta 141-90-2
F030210 HRP标记山羊抗小鼠IgM抗体 Goat Anti-Mouse IgM*HRP
BTN131140 双脱氧dNTP溶液,10mM ddNTP Solution
细胞质/细胞核蛋白提取试剂盒(国产,进口)关键词:细胞核蛋白/浆蛋白分提试剂盒,细胞质/细胞核蛋白提取试剂盒
·超纯总RNA提取试剂盒(TRIzol法)
编号:ALH011
英文名称:Ultra Pure Total RNA Fast Extraction Kit
规格:20次|50次
本试剂盒适用于动植物组织、动植物培养细胞的总RNA提取,采用改进的异硫*酸胍/酚一步法(TRIzol法)裂解细胞和灭活RNA酶,然后总RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除,最后低盐的RNase free water将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
产品特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.结合了异硫*酸胍/酚一步法试剂稳定性好,纯度高和离心柱方便快捷的优点,不需要异丙醇沉淀和乙醇洗涤过程,RNA可以直接从离心柱上洗脱避免了过度干燥不易溶解问题。
3.独特的RL裂解液配方,可以有效的消除基因组污染。
4.多次漂洗去蛋白过程,提取RNA纯度更高。
5.有效的去除了5S在总RNA中含量,提高了纯度。
试剂盒组份:
| 组份 | 20次 | 50次 |
| 裂解液RL | 20ml | 50ml |
| 去蛋白液RE | 15ml | 25ml |
| 漂洗液RW | 5ml | 10ml |
| RNase-free H2O | 10ml | 10ml |
| 吸附柱和收集管 | 20套 | 50套 |
储存条件:室温,有效期一年。(裂解液RL需4℃避光保存)
注意事项:
1. 第一次使用前请先在漂洗液RW瓶中加入指定量乙醇,加入后请及时打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!
2. 本试剂盒抑制RNA酶效果极佳,所有离心步骤如未加说明,均可在常温进行。
3. 裂解液RL和去蛋白液RE中含有刺激性有害化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4. 考虑到环保问题,本试剂盒不含有实验室常用试剂*仿,使用前需要自备*仿。
5. 常规的琼脂糖凝胶电泳和变性胶电泳均可以用来分析RNA的质量。好的RNA产物在电泳后应该可以看到明显的二条优势核糖体RNA带,分别为~5Kb(28S),~2Kb(18S),条带亮度比值约为2:1。有时候也可以看到~0.1kb和0.3Kb(5S,tRNA)带。但有时候根据不同的物种如某些植物组织可以看到4,5条带也属于正常现象,如果RNA未成熟的前体或者不均一核RNA、小核RNA提取出来也可能看到介于7Kb和15Kb之间的不连续的高分子量条带。
6. 检测OD260/OD280吸光度比值时,如需稀释RNA样品应该用TE(PH 8),如果用水稀释后检测,由于一般水离子强度和PH值低,会使OD280升高,从而使比值降低。
7. 加入裂解液RL匀浆后,加*仿前,样品可在–60℃~70℃ 保存一个月以上。
8. 若提取细菌RNA,推荐细菌RNA提取试剂盒(目录号:ALH027和ALH029)。
操作步骤(实验前请先阅读注意事项)
提示:第一次使用前请先在漂洗液RW 瓶中加入指定量无水乙醇!
1. 匀浆处理
a. 组织
将组织在液氮中磨碎,每50~100mg组织加1ml的裂解液RL后匀浆。组织样品容积不能超过RL容积的10%。
b. 单层生长的细胞
直接往直径3.5 cm的培养板中加入1ml的RL溶解细胞,并用移液枪轻轻吹打混匀。依据培养板的面积而不是依据细胞的数量来决定所需的RL量(每10cm2加1ml)。一般情况下,普通大小的细胞培养瓶,加入1ml的RL, 迅速轻摇使RL充分和瓶底所有细胞接触裂解细胞并灭活RNA酶,轻轻用移液枪反复吹打混匀。当RL量不足时可导致抽提的RNA中污染有DNA。
c. 悬浮生长的细胞
通过离心来沉淀细胞,小心弃上清。每5~10×106的动物细胞或植物细胞加1ml的RL。在RL试剂中用移液枪反复吹打来裂解细胞。在加入RL前应避免洗涤细胞,否则会增加mRNA降解的可能性。
2. 将匀浆样品剧烈震荡混匀,在15~30℃条件下孵育5分钟以使核蛋白体完全分解。
3. 可选步骤:4℃的条件下12,000rpm 离心10分钟,小心取上清转入一个新的RNase free的离心管中。当样品富含蛋白质、脂肪、多糖或是细胞外物质例如肌肉、脂肪组织或植物的块茎部分时可能需要一额外的分离步骤。匀浆化后在2~8℃的条件下以12,000rpm离心10分钟,移除匀浆中不溶解的物质,余下的沉淀中包含有细胞外膜、多糖、以及高分子量DNA,而上层的超浮游物含有RNA。
4. 每1ml RL加0.2ml*仿。盖紧样品管盖,剧烈振荡15秒并将其在室温下孵育3分钟。
5. 于4℃12,000rpm 离心10分钟,样品会分成三层:下层有机相,中间层和上层无色的水相,RNA存在于水相中。水相层的容量大约为所加RL体积的50%,把水相小心转移到新管中(不要触碰中间层),记录水相体积。
6. 加入水相体积一半也就是0.5倍体积的无水乙醇,混匀(此时可能会出现沉淀)。得到的溶液和可能沉淀一起转入吸附柱中(吸附柱套在收集管内,若一次不能将全部溶液和混合物加入吸附柱中,请分两次转入吸附柱中。) ,12,000rpm离心45秒,弃废液,将吸附柱重新套回收集管。
7. 加500μl 去蛋白液RE,12000rpm 离心45 秒,弃废液。
8. 加入500μl漂洗液RW(请先检查是否已加入无水乙醇!),12000rpm 离心45秒,弃废液。
9. 重复步骤8一次。
10. 将吸附柱放回空收集管中,13000rpm离心2分钟,尽量除去漂洗液, 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
11. 取出吸附柱,放入一个RNase free离心管中,根据预期RNA产量在吸附膜的中间部位加50-80μl RNase free water,室温放置2分钟,12000rpm 离心1分钟。如果需要较多RNA,可将得到的溶液重新加入离心吸附柱中,离心1分钟,或者另外再加30μl RNase free water,离心1分钟,合并两次洗脱液。洗脱体积越大,洗脱效率越高,如果需要RNA 浓度较高,可以适当减少洗脱体积, 但是最小体积最好不少于30μl,体积过小降低RNA 洗脱效率,减少RNA产量。
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购细胞质/细胞核蛋白提取试剂盒(国产,进口)。
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