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516
- 英文名:
PPARγ GFP Reporter Plasmid
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括北京现货PPARγ-GFP报告基因质粒批发在内的一系列细胞生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:北京现货PPARγ-GFP报告基因质粒批发
英文名:PPARγ GFP Reporter Plasmid
规格:1μg
产地:国产|进口
编号:SY0163
品牌:百奥莱博
PPARγ GFP Reporter Plasmid是用于检测PPARγ转录活性水平为目的的报告基因。PPAR(peroxisome proliferator-activated receptor)是调节靶基因表达的核内受体转录因子超家族成员,可分为α、β和γ三种类型。其中PPARγ主要表达于脂肪组织及免疫系统,与脂肪细胞分化、机体免疫及胰岛系统抵抗关系密切。
REPOTMPPARγ-GFP报告基因主要用于检测细胞PPAR 信号通路中PPARγ的转录活性、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。
pGMPPARγ-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个PPARγ结合位点,可以高效地检测PPARγ的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因,更便于后续的检测。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。另外,由于质粒体积减小,使得PPARγ-GFP报告基因更易于转染。
质粒图谱

pGMPPARγ -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’
使用说明
pGMPPARγ-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。
注意事项
1)本质粒未经吉满生物允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2)为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
储存条件:-20℃。
更多有关北京现货PPARγ-GFP报告基因质粒批发的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·快速姬姆萨染液(适用于血涂片、骨髓涂片染色)
编号:SY0579
英文名称:Fast Giemsa Stain
规格:250ml*1,500ml*1
姬姆萨染色(Giemsa stain)是一种标准化的组织学染色方法,通过对染色体染色的原理形态学上区分不同的细胞类型如血小板,红细胞,白细胞和其他细胞。吉姆萨染色液是由亚甲基蓝(methylene blue,),曙红(eosin)和天青B(Azure B)组成的混合液,主要用于血液,骨髓涂片,石蜡切片和其他临床细胞学标本。
产品组份:
试剂1————250ml
试剂2————500ml
操作步骤
1. 平置血涂片于染色架上,滴加试剂一3~5滴,使其迅速盖满血膜,染色1~2分钟,以固定血片。
2. 不要倒掉试剂一,直接滴加试剂二6~10滴,轻摇玻片或用洗耳球对准血涂片吹气使染液充分混合,染色5~8分钟。
3. 水洗30秒,待干后镜检。
染色结果
1. 红细胞呈浅红色,中央稍淡而略有蝶形态。
2. 白细胞系统清晰易分,细胞膜清晰呈紫黑色,细胞核着色呈深浅不同的紫红色,胞浆浅红色。胞浆中各种颗粒区分明显。其中1)中性粒细胞胞浆中颗粒呈淡紫红色、嗜酸粒细胞胞浆中颗粒呈桔红色、嗜碱性粒细胞胞浆中颗粒呈蓝褐色。Ⅱ)单核细胞的胞浆呈灰蓝色,胞浆中颗粒呈细小淡紫红色或蓝紫色。Ⅲ)淋巴细胞胞浆呈淡蓝色。
注意事项
1. 推片:取全血3微升左右置载玻片上,将推玻片保持与载玻片30度角,置于血滴正前方,稍往后移与血滴接触,即可见血液沿推片下缘散开,再匀速沿载玻片平面平稳向前滑动,至血液铺完血膜为止。
2. 涂片时不要太厚也不要太薄。太厚红细胞重叠并易皱,太薄时不易找到白细胞。
3. 用蜡笔在血膜两头划线,平放于染色架上。血膜要干透后才能染色,否则染色时血膜易脱落。
4. 试剂一及二染液不能过少,以防很快蒸发引起染液沉淀。试剂一不可少于400微升,试剂二是试剂一的2倍量。滴加试剂一及二时要轻摇玻片或用洗耳球对准血片吹气,使染液充分混合。
5. 镜检时如果红细胞偏蓝,请放在蒸馏水中1~3分钟,直至红润为止。
6. 染色过淡,可复染。染色过深,可用水冲洗或浸泡,还可用75%乙醇脱色3~5秒。
储存条件:室温,有效期12个月。
北京现货PPARγ-GFP报告基因质粒批发关键词:PPARγ-GFP报告基因质粒,PPARγ GFP Reporter Plasmid,SY0163
·PCR Master Mix (含染料)
编号:SY0025
英文名称:PCR Master Mix (With Dye)
规格:1ml
PCR Master Mix是即用型的常规PCR预混合溶液,含有Taq DNA Polymerase,dNTP混合物,MgCl2以及优化的缓冲体系,只需加入引物和模板即可进行扩增,大大简化实验的操作步骤,提高了高通量操作和实验结果的重现性。
Mix中加入电泳缓冲液和染料,使得PCR产物可以直接进行电泳,染料的存在不会干扰扩增效率。体系中含有的保护剂使得Master Mix 4ºC条件下长期放置,或经过反复冻融后仍可维持酶的活性以及产品的稳定性。PCR产物具有3’-dA突出端,可轻松克隆至T载体。
活性定义:用活性化的大马哈鱼精子作为模板/引物,在74ºC,30min内摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位(U)。
质量控制
核酸外切酶残留检测:20 μl本品和0.6 μg λ-Hind Ⅲ在74 ºC下孵育1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
核酸外内酶残留检测:20 μl本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在74 ºC下孵育1小时, DNA的电泳谱带不发生变化。
大肠杆菌残留DNA检测: 50 μl体系中,以ddH2O为模板,扩增E.coil 16s rDNA基因。35个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,无扩增条带。
功能检测:50 μl体系中,以100 ng人基因组DNA为模板扩增α-1-antitrypsin基因。30个循环后取10% PCR产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,观察到单一的360 bp条带。
稳定性检测: PCR Master Mix 分别在-20 ºC放置1年、4 ºC放置3个月、25 ºC放置1个月后,菌落PCR扩增1.2 kb片段。电泳结果显示2×PCR Master Mix具有非常好的稳定性。

操作注意事项
由于Taq DNA Polymerase室温下也有一定的反应活性,PCR反应体系配制需在冰上进行。体系混匀后快速置于PCR仪进行反应。这样可以减少反应准备阶段的非特异扩增,有助于得到更好的PCR结果。
引物设计注意事项
1.引物3’端最后一个碱基选择C或G;
2.引物3’端最后8个碱基应避免出现连续错配;
3.引物3’端尽量避免发卡结构的出现;
4.引物Tm值控制在55℃-65℃之间;
5.引物额外附加序列,即与模板非配对序列,不应参与引物Tm值计算;
6.引物GC含量控制在40%-60%之间;
7.正向引物和反向引物Tm值以及GC含量尽可能一致。
北京现货PPARγ-GFP报告基因质粒批发关键词:PPARγ-GFP报告基因质粒,PPARγ GFP Reporter Plasmid,SY0163
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文献和实验病毒DNA为骨架的复制缺陷型重组腺病毒系统,通过对比其他系统(包括Adeasy、Adeno-X、AdMax等系统),对穿梭载体,病毒骨架载体和包装细胞系都做了改进,并做了大量的实验和重复验证工作后,使得该系统比上述系统有了更强大的优势,可提供高品质、高产量的重组腺病毒。并且在克隆、包装、扩增、纯化、滴度测定等各步条件也做了改进和优化,达到了克隆阳性率更高、质量更可靠、包装稳定、出毒迅速、滴度高等效果。在此基础上,还拓展了更广泛的应用,可以提供各种带报告基因的(如GFP、RFP、Luciferase、LacZ
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动物细胞中的RNAi 在小鼠的胚胎细胞中也存在RNAi,将727个碱基对的双链RNA转入小鼠的畸胎瘤细胞,诱发了细胞内的RNAi机制,并抑制了报告基因的表达。但大于30个核苷酸的双链RNA进入哺乳动物的成体细胞后,会非特异的阻断基因的表达。这是由于当长的双链RNA进入哺乳动物成体细胞后,细胞内的病毒防御机制被激活。细胞内干扰素产生增加,蛋白激酶PKR激活,使转录因子E2F被抑制,非特异的阻断基因的转录,并诱导细胞凋亡。另一方面,RNA酶L(RNase L)被激活,产生非特异的mRNA降解。而未分
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