高致病性猪蓝耳和猪蓝耳通用双重凝胶PCR检测试剂盒(hp-P

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博致力于最快速、最有效的检测产品，包括高致病性猪蓝耳和猪蓝耳通用双重凝胶PCR检测试剂盒(hp-PRRSV/PRRSV)品牌在内的动物疫病PCR检测试剂盒产品是我公司倾力打造的优势产品，欢迎选购。

名称：高致病性猪蓝耳和猪蓝耳通用双重凝胶PCR检测试剂盒(hp-PRRSV/PRRSV)品牌
规格：48次/盒
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
编号：SYA563

想要了解更多关于高致病性猪蓝耳和猪蓝耳通用双重凝胶PCR检测试剂盒(hp-PRRSV/PRRSV)品牌的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息，请和我们联*(代"系")。此外我公司还销*(代"售")下面的产品：

·肠产毒性大肠杆菌(ETEC)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA088
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·基孔肯雅病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA231
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·鼻疽伯克霍尔德菌/类鼻疽伯克霍尔德菌双重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA136
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·甲型H3N2流感病毒双重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA150
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
一、简介：
本试剂盒用一对甲型H3流感病毒特异性引物，一对甲型N2流感病毒特异性引物，分别结合一条特异性荧光探针，用一步法双重荧光RT-PCR技术对甲型H3流感病毒RNA、N2流感病毒RNA进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。本试剂盒中甲型H3流感病毒的探针报告基团为FAM，N2流感病毒的探针报告基团为HEX/VIC/JOE。

二、用途：
本试剂盒适用于各种咽拭子、鼻拭子、泄殖腔拭子、组织样品等临床样品中甲型H3流感病毒和N2流感病毒的特异性检测。适用于甲型H3N2流感病毒感染的辅助诊断、监测及流行病学调查，其检测结果仅供临床参考。

三、试剂盒组成：(48T)
组份 数量 规格
H3N2荧光qRT-PCR反应液(H3N2-qRT-PCR MIX) 1管 672μL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
无核酸酶水(Nuclease-Free Water) 1管 500μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
H3N2阳性对照(H3N2-PTC) 1管 50μL/管

四、储存条件及有效期：
本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为9个月，反复冻融次数不宜超过5次。

五、荧光PCR仪器适用范围：
ABI系列，Stratagene MX系列，Bio-Rad系列等荧光定量PCR检测仪等。

六、样品的采集与RNA提取
6.1 样品的采集
按照相关标准采集。标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-80℃，但不能超过6个月，标本运送应采用0℃冰壶。
6.1.1 血清：用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL，注入无菌的干燥玻璃管，室温(22-25℃)放置30-60min，血标本可自发完成凝集析出血清，或直接使用水平离心机，3000rpm离心5min，吸取上层血清，转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.2 血浆：用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL，注入含EDTA2Na(乙二*(代"胺")四乙酸二*)或柠檬酸*抗凝剂的玻璃管，立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次，使抗凝剂与静脉血充分混匀，5-10min后即可分离出血浆，转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.3 拭子、分泌物等样品：在装有拭子或分泌物的离心管中加入500µL PBS或生理盐水，剧烈振荡30s。棉拭子尽量挤出液体转移到无RNA酶污染的离心管中，6000rpm离心20s，取上清备用。
6.1.4 病灶组织样品：称取组织约0.1g于研磨器或组织匀浆器中研磨(最好置于冰上或加入液氮)，再加1mL生理盐水研磨至无块状物，然后将样品转至1.5mL灭菌离心管中，8000rpm离心2min，取上清液于1.5mL灭菌离心管中。
6.2 RNA提取
可采购北京百奥莱博科技有限公司的RNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤：
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qRT-PCR反应液(H3N2-qRT-PCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1µL
总量 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(H3N2-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qRT-PCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
反转录(Reverse Transcription) 1循环 45℃ for 10 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 45 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM和HEX/VIC/JOE。其中FAM基团检测H3，HEX/VIC/JOE基团检测N2，淬灭基团均为None。

八、结果分析：
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
（1） 阴性对照(NTC)：FAM和HEX/VIC/JOE通道的Ct值＞43或无Ct值。
（2） 阳性对照(H3N2-PTC)：FAM和HEX/VIC/JOE通道的Ct值≤30且有明显指数增长。
以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效
8.3 结果判定
（1） FAM通道：Ct值≤40，H3亚型流感病毒核酸为阳性；Ct值＞43或无Ct值为阴性样本，表明H3亚型流感病毒核酸阴性。Ct值在40-43个循环之间，为灰区，需要进行重复试验。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明H3亚型流感病毒核酸阳性；否则判为样本阴性。
（2） HEX/VIC/JOE通道：Ct值≤40，N2亚型流感病毒核酸为阳性；Ct值＞43或无Ct值为阴性样本，表明N2亚型流感病毒核酸阴性。Ct值在40-43个循环之间，为灰区，需要进行重复试验。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明N2亚型流感病毒核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
（1） 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
（2） 所有使用的离心管最好高压灭菌，而且必须不含RNA酶。
（3） PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
（4） 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
（5） 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。



高致病性猪蓝耳和猪蓝耳通用双重凝胶PCR检测试剂盒(hp-PRRSV/PRRSV)品牌关键词：高致病性猪蓝耳和猪蓝耳通用双重凝胶PCR检测试剂盒(hp-PRRSV/PRRSV),百奥莱博,SYA563

ARB12162 大鼠白介素27(IL-27)含量分析 Rat interleukin 27,IL-27 ELISA KIT
线粒体蛋白提取试剂盒(2D电泳用)   50T|100T
N96 植物基因组DNA提取试剂盒 
BTN80817 mRNA提取试剂盒 mRNA Isolation Kit
ARB11626 人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA检测服务 Human granulocyte-macrophage colony stimulating factor,gm-csf ELISA KIT
N-三(羟甲基)甲基-2-*基乙磺酸 PBS(Phosphate buffer saline)  powdered 7365-44-8
BTN131088 荧光素(FITC)标记亲和素 FITC-Avidin
ARB13998 猪端粒酶(TE)Elisa分析 Porcine telomerase,te ELISA KIT
糖原 Sodium diethyldithiocarbamate trihydrate 9005-79-2
ARB13980 猪流行性腹泻抗体(PED Ab)酶标法分析 
BL1402 RNAwait(非冻型组织RNA保存液)
BFD006 猪伪狂犬GE病毒抗体检测试剂盒
Hoechst33342染色液   10ml
F020231 兔抗绵羊/山羊IgG抗体 Rabbit Anti-Goat IgG
D-葡萄糖-6-磷酸三*盐 Gum tragacanth powder 53411-70-4
ARB10391 人可溶性白细胞抗原G(sHLA-G)ELISA代测服务 Human soluble Human leucocyte antigen g1,shla-g ELISA KIT
BL0156 TEV蛋白酶
M0111 HRP标记物复合稳定剂                                    
BTN130520 壳聚糖磁珠 Magnetic beads,Chitosan
PY04-067  TTC   0.1 mg/支×10支  每支添加于100mlTTC营养琼脂培养基基础中，用于药品卫生检验中细菌总数测定
ARB12736 小鼠I型前胶原羧基端肽(PICP)代做ELISA实验 Mouse carboxyterminal proPeptide of type i procollagen,picp ELISA KIT
ET108 High Affinity HotStart Taq
高致病性猪蓝耳和猪蓝耳通用双重凝胶PCR检测试剂盒(hp-PRRSV/PRRSV)品牌关键词：高致病性猪蓝耳和猪蓝耳通用双重凝胶PCR检测试剂盒(hp-PRRSV/PRRSV),百奥莱博,SYA563

增强革兰氏染色液   4×10ml|4×100ml|4×250ml
F030826 BIOTIN标记兔抗大鼠IgG抗体 Rabbit Anti-Rat IgG*BIOTIN
OED24K型酶制剂、抗生素发酵工业专用消泡剂 Z-DL-phenylalanine
ARB10573 人百日咳毒素(PT)ELISA代测服务 Human pertussiu toxin,pt ELISA KIT
HC0137 柯达胶片(感蓝)
邻甲*(代"酚")酞络合剂 CSA 2411-89-4
BL0916 FITC标记人白蛋白抗体
ARB14152 大鼠血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)含量分析 
ARB12688 大鼠凝血因子Ⅲ(FⅢ)Elisa分析 Rat coagulation factor Ⅲ,fⅢ ELISA KIT
*甲基-2-磺酰三硝基三氮唑 Penicillin&Streptomycin&Amphotericin B solution,γ-Irradiated 74257-00-4
ARB11046 人表皮生长因子(EGF)ELISA检测服务 Human epidermal growth factor,egf ELISA KIT
ARB13075 小鼠肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TSGF)含量分析 Mouse tumor specific growth facter/tumor supplied group of factor,tsgf ELISA KIT
BL1264 50ml离心套管
PY02-024  马铃薯葡萄糖肉汤  250克  

我公司强烈推荐动物疫病PCR检测试剂盒系列产品，热情期待您的咨询选购高致病性猪蓝耳和猪蓝耳通用双重凝胶PCR检测试剂盒(hp-PRRSV/PRRSV)品牌。