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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
690
- 英文名:
Proteinase K Solution
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")蛋白酶K溶液厂家价格,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:蛋白酶K溶液厂家价格
品牌:百奥莱博
规格:5mL
产地:国产|进口
编号:BTN80911
本产品是浓度为10mg/mL的蛋白酶K溶液,可以直接加入到各种溶液中降解其中的蛋白质。可以用于核酸纯化、原位杂交、DNA脉冲电泳和蛋白指纹图谱分析等实验。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
关于蛋白酶K溶液厂家价格的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·乙醇-甲醛固定液
编号:BTN131281
英文名称:A-F Fixative Solution
规格:250mL
本产品为乙醇-甲醛混合固定液,本固定液兼有固定和脱水作用。在临床活检中,因为时间要求快,导致固定时间较短,固定不充分,特别适合使用本产品。也可以在脱水步骤用本产品替代75%乙醇。本产品适用于皮下组织中肥大细胞的固定,固定后的标本可直接入95%乙醇脱水。
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
·红细胞裂解液A型(核酸纯化)
编号:BTN60403
英文名称:Red Cell Lysis Solution,Type A
规格:250mL
本品用于快速裂解哺乳动物全血中的红细胞而基本不破坏白细胞和其他淋巴细胞的完整性。由于红细胞是血液的主要细胞成份,不含DNA和RNA,其所含血红素能抑制PCR反应,所以先用本产品裂解红细胞,再提取基因组DNA或RNA 有助于提高所得样品纯度。
产品特点:
1.快速,一次处理只需要2-3分钟。处理后提取血液DNA可以不需要酚/*仿去蛋白质。
2.高效,一次处理能裂解80%以上的哺乳动物红细胞,一般样品最多只需要处理两次。
3.扩容性好,可以一次处理多达几十毫升的样品,也可以处理100μL的血液。
4. 兼容性好,可以与市场上大多数血液DNA提取试剂盒结合使用。
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1.在装有抗凝血液的离心管中,按1:1的比例加入红细胞裂解液A型并轻柔颠倒混匀。
2. 5000-10000 g室温离心2分钟,小心吸弃弃上清。
3. 将细胞沉淀重悬于1/2 体积的红细胞裂解液A型中,轻柔吹打混匀后5000-10000g室温离心2分钟。
4.沉淀即为去除了红细胞的血液细胞,可以直接用于后续的实验。
蛋白酶K溶液厂家价格关键词:Proteinase K Solution,BTN80911,蛋白酶K溶液
·DEPC处理水
编号:BTN60604
英文名称:DEPC-Treated Water
规格:250mL
本产品是用0.1%的焦碳酸二乙酯处理12-16小时后再经过高温高压处理得到的水溶液。由于DEPC是一种高效烷化剂,可以通过与蛋白质中的His残基反应而使蛋白质失去活性,所以可以灭活水中十分顽固的RNase。本产品可以广泛用于各种RNA相关实验。
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
附录:DEPC灭活RNase的分子机制

·一步法质粒DNA提取试剂盒2.0
编号:BTN70903
英文名称:One-step plasmid DNA extraction kit 2.0
规格:50次
基于碱变性原理的质粒小量制备(Miniprep)是分子克隆研究中最常用的方法之一,其操作包括三种溶液处理,一般需要30分钟左右的时间才能得到可以上柱的质粒DNA初提液。本产品采用百奥莱博自主开发的一步式细菌裂解技术,只需要一种溶液处理即可以完成细菌裂解,并且裂解物可以直接上柱纯化质粒DNA。
试剂盒特点:
1.一步式裂解细菌,比传统的碱变性方法更快捷。
2.产量跟经典碱变性法相当或更高,产率一般为3-5μg质粒DNA/mL 饱和菌液(对高拷贝质粒而言)。
3. DNA 纯度高,OD260/280一般在1.8左右,基因组DNA和RNA污染少。
4.可以直接用于电泳、酶切、PCR、细菌转化、分子克隆、测序等实验。
5. 重复性和稳定性好。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 50ml |
| 离心吸附柱 | 50只 |
| 通用预洗液 | 50ml |
| 通用洗柱液 | 100ml |
| DNA洗脱液2.0 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存(溶液A需要4℃保存),有效期一年。
使用方法:
1. 用塑料离心管收集不超过3mL 过夜培养饱和菌液,室温12000~15000g离心半分钟,弃上清。注意:不能超过3mL菌液,否则质粒回收率将急剧降低。
2. 加入0.6-1mL溶液A(用前需摇匀),充分吹打或振荡裂解细菌直到裂解变澄清,一般需要半分钟左右。注:此方法不同于碱裂解法,故可以充分吹打。
3. 将裂解液全部转移到离心吸附柱中,室温静置2分钟使质粒DNA与膜结合。室温12000~15000g离心半分钟,弃穿透液。如果一次不能将上清全部转移到离心吸附柱中,可以分两次进行。
4.在离心吸附柱中加入0.7mL的通用预洗液,室温12000~15000g离心半分钟,弃穿透液。注意: 如果通用预洗液放置在低温产生了沉淀,用前需要加热到60℃左右使之融化,混匀后再用。
5. 再在离心吸附柱中加入0.3mL的通用预洗液,室温12000~15000g离心半分钟,弃穿透液。此步预洗最好别省略,否则DNA 纯度不高。
6.在离心吸附柱中加入0.7mL的通用洗柱液,室温12000~15000g离心半分钟,弃穿透液。
7. 再在离心吸附柱中加入0.7mL的通用洗柱液,室温12000~15000g离心半分钟,弃穿透液。此为第二次洗涤。
8. 再在离心吸附柱中加入0.4mL的通用洗柱液,室温12000~15000g离心半分钟,弃穿透液。此为第三次洗涤,如果不洗涤三次,最后得到的质粒DNA的OD260和280的比值达不到1.8。
9.室温 12000~15000g离心半分钟,甩干残留液体。注意:此步不能省略,否则残留乙醇会影响后续的电泳上样(DNA 沉不到加样孔里去)和酶反应。
10. 将离心柱置于一个新的1.5mL自备塑料离心管中,加入30-100μl DNA 洗脱液2.0,室温放置2分钟。如果将DNA 洗脱液2.0预热到65-80℃,则效果更好。
11.室温 12000~15000g离心半分钟,离心管底溶液即质粒DNA,可以直接用于后续实验或放冰箱长期保存。
注意:如果需要去除DNA样品中的内毒素,请使用百奥莱博的液相内毒素清除剂。
蛋白酶K溶液厂家价格关键词:Proteinase K Solution,BTN80911,蛋白酶K溶液
·即用型LB平板培养基(含Kan)
编号:BTN130848C
英文名称:LB Petri Dish(Kan)
规格:10块
本产品为即用型LB平板培养基,A型为无抗生素LB平板,B型为LB-Amp平板,C型为LB-Kan平板,LB-Tet平板。
储存条件:低温运输及保存,有效期半年。
·20%CTAB溶液(RNase-Free)
编号:BTN51202
英文名称:LB Petri Dish(Kan)
规格:250mL
本产品为即用型LB平板培养基,A型为无抗生素LB平板,B型为LB-Amp平板,C型为LB-Kan平板,LB-Tet平板。
储存条件:低温运输及保存,有效期半年。
·大肠杆菌Tuner(DE)plysS感受态细胞
编号:BTN130564
英文名称:E.coli Tuner(DE)plysS Rosetta Competent Cell
规格:0.1mL*10
Tuner(DE3)plysS是的Tuner(DE3)衍生菌株,为高度严紧表达宿主菌,用于毒性蛋白表达,lac 透性酶突变,可以精细控制表达水平。抗性为*霉素(34μg/ml)。
基因型:F–ompT hsdSB(rB– mB–)gal dcm lacY1(DE3)plysS(CmR)
储存条件:干冰运输,-80℃保存,有效期6个月。
·大肠杆菌JM109感受态细胞
编号:BTN90207
英文名称:E.coli JM109 Chemical Competent Cell
规格:0.1mL*10
本产品是采用大肠杆菌JM109菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。
产品特点:
1. 使用pUC19质粒检测,转化效率可达108,-80℃保存几个月转化效率不发生改变。
2. recA1和endA1突变阻止对克隆DNA的修饰或对宿主菌染色DNA的重组,提高纯化质粒的产量和质量。
3. JM109菌株基因型:endA1 recA1 gyrA96 thi hsdR17(rk-mk+)relA1 supE44 D(lac-proAB)[F’traD36 proAB laqlqZ Δ M15 ]
4. 本产品质量稳定,使用方便,质优价廉。
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
自备试剂:无菌超纯水,SOB和SOC液体培养基,相关抗菌素。
使用方法:
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl,可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA 所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3. 42℃热击90秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB 固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。
注意事项:
1、涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA 总量较少,可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(4,000rpm ,2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2、新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
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文献和实验洗脱液,接着按照3.2b进行)2a.加入2ulRNaseA(0.5mg/ml).加热至65°C摇晃4-5小时或者过夜以逆转交联。DNA采用PCR纯化试剂盒中厂家说明进行纯化。样品冻存于-20°C.样品之所以加入RnaseA是因为高浓度RNA会在使用PCR纯化试剂盒时干扰DNA的纯化。而纯化柱子的饱和度是既定的。2b.加入5ul蛋白酶K(20mg/ml).加热至65°C摇晃4-5小时或者过夜以逆转交联。采用酚/氯仿抽提的DNA使用乙醇沉淀于10ul的糖原(5mg/ml).中。100ul水重悬浮。样品
%,70%,50%,30%各5min。入PBS(含5mmol/l MgCl 2 ,pH7.3~7.4)10min×2。入0.2n HCl 20min以进一步去除蛋白。 (3)50℃2×SSC,含5mmol/l EDTA溶液中30min。 (4)蛋白酶K(1μg/ml溶于0.1mol/l PBS中,)37℃20~25min。 (5)0.2mol/l 甘氨酸液:室温10min,中止蛋白酶反应。 (6)4%多聚甲醛(PBS新鲜配制):室温20
] 酸性亚硫酸钠(sodium bisulfite )处理组织切片20-30分钟。7. 于2XSSC溶液中漂洗2次,每次5分钟8. 取0.4ml蛋白酶K储存液(20mg/ml)溶于40ml 20XSSC(pH 7.0)得到蛋白酶K工作液(200µg/ml);将组织切片浸泡在蛋白酶K工作液中,37℃下孵育20-30分钟。9. 组织切片经蛋白酶K消化后,于2XSSC溶液中漂洗2次,每次5分钟。特别说明:为确保消化充分,可以自然干燥组织切片,将15µl DAPI复染剂滴加于组织切片区域,立即盖上
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