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350
- 英文名:
Protease Inhibitor for His-tagged Protein
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长期
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北京百奥莱博科技有限公司
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低温运输,-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应His标签蛋白专用蛋白酶抑制剂 蛋白质研究,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:His标签蛋白专用蛋白酶抑制剂 蛋白质研究
产地:国产|进口
规格:10mL
英文名:Protease Inhibitor for His-tagged Protein
编号:BTN130530
品牌:百奥莱博
His-Ni亲和层析是目前分离纯化重组表达蛋白质的重要方法,纯化过程中,为防止各种蛋白酶降解重组蛋白,需要加入足够、特异的蛋白酶抑制剂。本产品即为优化的His标签蛋白蛋白酶抑制剂混合液。专门用于纯化His标签蛋白时,抑制各种内源和外源蛋白酶活性,防止重组表达蛋白质降解。本品抑制谱广,能特异性抑制丝*酸蛋白酶、半胱*酸蛋白酶、天门冬*酸蛋白酶、嗜热菌蛋白酶样蛋白酶和*基肽酶等各种蛋白酶活性。本产品为DMSO溶液。与各种细菌细胞裂解液兼容,在裂解液中加入1/100体积即可。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期两年。
我公司的His标签蛋白专用蛋白酶抑制剂 蛋白质研究,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
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His标签蛋白专用蛋白酶抑制剂 蛋白质研究关键词:BTN130530,His标签蛋白专用蛋白酶抑制剂,Protease Inhibitor for His-tagged Protein
·胰蛋白酶(质谱级)
编号:BTN131029
英文名称:Trypsin,MS Grade
规格:100μg
胰蛋白酶是丝*酸蛋白酶,可特异性地切开赖*酸和精*酸残基的羧基端。胰蛋白酶这种严格的特异性是蛋白质鉴定的基础。天然胰蛋白酶易于自我水解,产生假胰蛋白酶,后者特异性较广,含有胰凝乳蛋白酶样活性。存在于胰蛋白酶制剂中的这些自我水解产物能产生多余的肽片段,从而干扰质谱检测到的片段的数据分析。
本产品是质谱分析级胰蛋白酶,其能提供最大限度的灵敏度。胰蛋白酶中的赖*酸残基已经过还原甲基化修饰,成为活性高且稳定的分子,抗拒自我水解的性能特别强。纯化的胰蛋白酶的特异性又由于TPCK处理使胰凝乳蛋白酶失活而进一步提高。处理过的胰蛋白酶经过亲和层析纯化,制成冻干粉。本产品能够用于胶内消化、溶液中酶解和质谱分析等实验。
产品特点:
➤ 纯度高,使用TPCK处理过,并经亲和纯化得到。
➤产品质量稳定,每批都经过质谱检测。
➤ 方便使用,以小瓶提供。
➤ 价值高,保证5次冻融循环后,性能稳定,这样使残余试剂量最小。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。干粉溶解在50mM醋酸中后,-20℃保存。若要长期储存,将溶解的胰蛋白酶存于-70℃。将冻融循环限制在5次以内。
使用方法:(溶液中酶解实验举例)
1.将目的蛋白溶解在6M guanidine HCl(or 6~8M urea or 0.1% SDS),50mM Tris-HCl(pH8),2–5mM DTT(or β-mercaptoethanol)的溶液中。
2.95℃加热15–20分钟或者60℃加热45–60分钟,自然冷却。
3.分析变性蛋白质时,加入50mM NH₄HCO₃(pH7.8)or 50mM Tris-HCl,1mM CaCl₂(pH7.6),使guanidine HCl or urea终浓度至少为1M。如果上步已经加入SDS,可以不加入NH4HCO3。分析非变性蛋白质时,将蛋白样品溶解在pH为7-9的缓冲液内即可。
4.加入胰蛋白酶,使胰蛋白酶:蛋白质=1:100~1:20(w/w)。37℃孵育至少1小时。将反应体系移至-20℃或者加入胰蛋白酶抑制剂TCA(终浓度10%)终止酶反应。也可以将反应溶液的pH降到4.0以下,终止酶反应。
5.反相HPLC或者SDS-PAGE分析酶解反应结果。
His标签蛋白专用蛋白酶抑制剂 蛋白质研究关键词:BTN130530,His标签蛋白专用蛋白酶抑制剂,Protease Inhibitor for His-tagged Protein
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文献和实验His 标签蛋白纯化效果不理想,宝宝心里苦呀。今天,小编来跟大家一起找找原因。 纯化所得组分中没有收集到重组的His标签蛋白。该问题主要可以分为以下两个方面: 1、His标签蛋白没有结合到填料上就流穿了 原因一 超声的功率不对。超声功率过高,容易导致蛋白炭化;功率过低,蛋白释放不出来。 建议 改变超声功率,同时可以在超声前加入溶菌酶。 原因二 结合缓冲液条件不合适。 建议 检查结合缓冲液中是否有影响结合的因素,如:金属离子螯合剂、强还原剂、过高的咪唑浓度。同时,优化缓冲液的pH、盐
蛋白 酶 已知对应的抑制剂 蛋白 酶 已知对应的抑制
问:请教一个实验问题,PMSF,胃酶抑制剂以及DTT会不会影响HRP活性?要做ELISA,样品中不知道可不可以加复合蛋白酶抑制剂?请大牛指教!答:不会影响酶活性,因为蛋白酶抑制剂,抑制的是蛋白水解酶活性。而HRP不是蛋白酶类,而是过氧化酶。(不过dtt肯定会破坏HRP)。即使会影响酶活性,实际上做elisa也不影响,因为加样品和加hrp是分开的,不存在。 答:我在研究各种抑制剂对L-氨基酸氧化酶酶活性的抑制作用的时候,测定L-氨基酸氧化酶活性的体系含有HRP。我们首先用各种抑制剂对HRP水解
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