miRNA荧光定量RT-PCR检测试剂盒特价促销

miRNA荧光定量RT-PCR检测试剂盒特价促销

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  • ¥110 - 2110
  • 百奥莱博
  • BTN131042-SBE
  • 北京
  • 2025年07月14日
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      233

    • 英文名

      miRNA Realtime qRT-PCR Kit

    • 保质期

      一年

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      低温运输,-20℃

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    百奥莱博专业生产供应miRNA荧光定量RT-PCR检测试剂盒特价促销,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。


    名称:miRNA荧光定量RT-PCR检测试剂盒特价促销
    产地:国产|进口
    英文名:miRNA Realtime qRT-PCR Kit
    编号:BTN131042
    品牌:百奥莱博
    本试剂盒采用SYBR Green I 嵌合荧光染料法的原理来进行miRNA荧光定量PCR检测。本产品是专门为miRNA定量检测而研发的新一代预混形式的荧光定量PCR检测试剂。2×miRNA qPCR Mix包含有Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR增强剂等所有PCR所需要的成分。miRNA qPCR Mix中所含的荧光染料SYBR Green I可以与所有的双链DNA结合,使该产品可用于不同靶序列的检测而不需合成特异性标记探针。其中的Taq DNA polymerase是经化学修饰的高效热启动酶,配合独特的缓冲体系,使反应特异性更好,灵敏度更高,并能在更广的范围内对miRNA进行准确定量。

    产品特点:
    1. 简便、快捷完成miRNA的检测。
    2. 检测通量高,只需最少的RNA样本,即可同时进行多种目标miRNA的检测。
    3. 检测特异性好,独特的miRNA引物设计技术及其优化的反应体系避免了非特异性扩增、特别是Pre-miRNA的污染。
    4. 检测分辨率高:该系统能分辨单碱基差异的miRNA。
    5. 检测灵敏度高:可在低至pg级的总RNA中检测到特异表达的miRNA。

    试剂盒组成:

     
    成分 规格
    2×miRNA qPCR Mix 0.75ml
    Reverse Primer(10μm) 30μl
    RNase-Free Water 1ml
    miRNA cDNA第一链合成试剂盒 25T
    说明书 1份


    储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。

    使用方法:

    一、miRNA cDNA第一链合成
    请参见miRNA cDNA 第一链合成试剂盒产品使用说明书。

    二、miRNA荧光定量检测
    1.室温融化2×miRNA qPCR Mix和Reverse primer(10μm)。
    2. 使用时请将2×miRNA qPCR Mix上下颠倒轻轻均匀混合,避免起泡,并经短暂离心后使用。如果试剂没有混匀,其反应性能会有所下降。
    3. 按照下表组分配制荧光定量PCR反应体系:
    试剂组份 体积
    2×miRNA qPCR Mix 25μl
    Forward Primer(自备) 1μl
    Reverse Primer 1μl
    miRNA 第一链cDNA xμl
    RNase-Free Water 至50μl

    4. 建议反应程序设置如下:
    循环 温度 时间
    95℃ 10min
    40~45× 95℃ 15s
    60℃ 1min
    溶解曲线分析 根据PCR仪要求设定


    注意事项:
    1. miRNA 第一链cDNA的加入量不要超过Real time PCR 体积10%。
    2. 对于特殊的检测体系,高含量的cDNA 模板易导致非特异性扩增,根据所检测miRNA的丰度适当的稀释cDNA(稀释10倍或者100倍)。
    3. 2×miRNA qPCR Mix中含有SYBR Green I和ROX染料,保存本产品或配制PCR反应液时应避免强光照射。

    关于miRNA荧光定量RT-PCR检测试剂盒特价促销的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:

    ·重组蛋白A/G
    编号:BTN131081
    英文名称:Recombinant Protein A/G
    规格:1mg

    ·PCR级甲酰胺
    编号:BTN100839
    英文名称:Formamide,PCR Grade
    规格:250mg
    本产品为PCR级的甲酰胺,其可以促进某些引物、模板退火,降低带有二级结构的DNA的变性温度,是一种常用的PCR增强剂。

    储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。

    ·DNA粘转平试剂盒
    编号:BTN60107
    英文名称:DNA Polishing Kit
    规格:20次
    本产品利用Pfu DNA polymerase所具有3´到5´的聚合酶活性和5´到3´外切酶活性,将3´或5´突出的DNA片段转化成平末端,用于克隆工作。

    产品特点:
    1. 简单,精心优化过的2×Polishing Buffer中含有所需要的所有成分,不需要单独准备。
    2.适用于任何平末端的DNA载体。

    产品组成:
    成分 规格
    Pfu DNA Polymerase(3U/μL) 20μl
    2×Polishing Buffer 0.5ml
    说明书 1份


    储存条件:低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。

    使用方法:

    1. DNA片段的准备:
    无论是来源Taq,Tth,T7,Klenow和Vent等DNA聚合酶合成的DNA片段,还是用限制性内切酶制备的DNA片段,粘转平之前均需要将DNA沉淀以便去除反应液中的无关成份。沉淀DNA的方法包括经典的盐/纯沉淀法,离心柱DNA 吸附法和百奥莱博的一管式非醇超快DNA沉淀法。
    2. 设置粘转平(Polishing)反应:
    在一个干净的离心管中,分别加入
    3´或5´突出的DNA片段 10-500ng
    2×Polishing Buffer 25μL
    Pfu DNA polymerase 1μL
    补水到 50μL
    72℃保温2小时。

    注意:如果不使用热盖式PCR 仪器加热,则需要在反应管中再加入适量液体石蜡以防反应过程中水份蒸发。
    3.反应后处理
    粘转平反应后,样品可以放-20℃长期保存,也可以直接用于T4 DNA连接酶催化的连接反应。对10μL的连接反应体系,一般需要加入1-2μL粘转平反应液。由于Pfu DNA polymerase在连接反应的温度条件下几乎没有活性,所以不必去除。但文献报道,去除后连接效率更高。


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    ·Tris盐*(代"酸")溶液(1M,pH7.0)(不含RNase)
    编号:BTN60902
    英文名称:RNase-Free Tris-HCl Solution
    规格:250mL

    ·柱式分枝杆菌DNA提取试剂盒
    编号:BTN70703
    英文名称:Mycobacteria DNA column extraction kit
    规格:50次
    分枝杆菌属(Mycobacterium)是极为古老的细菌,与人类的疾病相关的就有25种以上,包括引起结核病的结核分枝杆菌(Mycobacteria tubercμLosis)。近年来由于多重耐药性分枝杆菌的出现,分枝杆菌再次成为人们关心的细菌。PCR快速诊断是目前检测分枝杆菌的主流方法,但由于此类细菌具有十分独特的坚硬的细胞壁,快速提取其基因组DNA一直是十分棘手的技术问题。本产品就是为解决这一问题而开发。

    试剂盒特点:
    1. 操作简单,客户不需要准备额外的试剂。
    2. PCR检测灵敏度一般在10-100CFU/mL样品。
    3. 既可以使用培养的细菌,也可以使用痰液、精液、血液、脑脊液等样品。
    4. 价廉物美,与国外同类产品相比质量相当,但价格便宜。
    5. 安全无毒,本试剂盒对人体无害,无腐蚀性和刺激性气味。

    试剂盒组成:
    成分 规格
    化痰液 100ml
    溶液A 7.5ml
    溶液B 15ml
    离心吸附柱 50套
    通用洗柱液 50ml
    DNA洗脱液2.0 10ml
    说明书 1份


    储存条件:常温运输和保存,有效期一年。

    使用方法:
    注意:文献报道部分分枝杆菌在DNA提取过程中还有形成菌落的能力,所以任何丢弃的溶液都必须按有传染性的污染物品对待,并严格按有关部门要求进行消毒处理。

    一:培养的分枝杆菌样品的预处理
    1. 刮取培养的分枝杆菌到0.5mL自备TE缓冲液中。
    2. 80℃放置20分钟以杀灭细菌。
    3. 3000 g室温离心15分钟,弃上清。
    4.细菌沉淀放-20℃冰箱备用或直接进入细菌基因组DNA提取步骤。
    二:含分枝杆菌的痰液样品的预处理
    1. 将需要处理的痰液样品加入到干净的10mL或15mL塑料离心管中。
    2. 加入等体积的化痰液,充分混合均匀后室温放置15-30分钟。如果痰很浓,可以延长保温时间。
    3. 3000 g室温离心15分钟,弃上清。
    4.细菌沉淀放-20℃冰箱备用或直接进入细菌基因组DNA提取步骤。
    三:含分枝杆菌的血液样品的预处理
    1. 用自备红细胞裂解液对血液进行红细胞裂解处理,具体操作见百奥莱博红细胞裂解液(BTN60403)使用手册。
    2. 将得到的白细胞沉淀-20℃或更低温度放置10分钟。
    3. 迅速将得到的白细胞沉淀100℃加热10分钟。
    4.上述处理将使大部分白细胞破裂,加入自备的TE或PBS缓冲液,直到离心管体积的一半位置。此步使白细胞的DNA进入缓冲液中。
    5.离心5-10分钟沉淀细菌,离心速度取决于离心管的大小。如果样品在1.5mL离心管,则可以12000~15000g室温离心。如果样品在10-15mL离心管,则3000-5000g室温离心。
    6. 吸弃上清(含白细胞DNA)后所得细菌沉淀可以放-20℃冰箱备用或直接进入细菌基因组DNA提取步骤。
    四:细菌基因组DNA的提取
    1. 将150μl 65℃预热过的溶液A加到有细菌沉淀的离心管中,充分震荡混匀。
    2. 将细菌和溶液A的混合物转移到一个干净的1.5mL塑料螺旋盖离心管中。强烈建议不要使用压盖式塑料离心管,否则后面处理过程中溶液容易漏出。
    3. 加入300μl溶液B和300μl自备*仿,充分震荡混匀。
    4. -20℃放置直到液体凝固,一般需要20-60分钟。过夜放置也可。
    5. 放室温融化后振荡半分钟。
    6. 12000~15000g室温离心3~5分钟,小心转移上清到离心吸附柱中,室温放置2分钟。
    7. 12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
    8. 加入0.5mL通用洗柱液 12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
    9. 重复第8步的洗涤过程一次。
    10. 短暂离心半分钟。此步不要省略,否则残留的洗柱液(含乙醇)将会影响DNA电泳、酶切和PCR等反应。
    11. 将离心吸附柱转移到一新的离心管中,加入30-100μL DNA洗脱液2.0,12000~15000g室温离心半分钟,所得溶液即基因组DNA。


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