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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输
- 保质期:
长期
- 英文名:
miRNA Realtime qRT-PCR Kit
- 库存:
258
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货miRNA荧光定量RT-PCR检测试剂盒特价促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京现货miRNA荧光定量RT-PCR检测试剂盒特价促销
英文名:miRNA Realtime qRT-PCR Kit
编号:BTN131042
品牌:百奥莱博
规格:25次
产地:国产|进口
本试剂盒采用SYBR Green I 嵌合荧光染料法的原理来进行miRNA荧光定量PCR检测。本产品是专门为miRNA定量检测而研发的新一代预混形式的荧光定量PCR检测试剂。2×miRNA qPCR Mix包含有Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR增强剂等所有PCR所需要的成分。miRNA qPCR Mix中所含的荧光染料SYBR Green I可以与所有的双链DNA结合,使该产品可用于不同靶序列的检测而不需合成特异性标记探针。其中的Taq DNA polymerase是经化学修饰的高效热启动酶,配合独特的缓冲体系,使反应特异性更好,灵敏度更高,并能在更广的范围内对miRNA进行准确定量。
产品特点:
1. 简便、快捷完成miRNA的检测。
2. 检测通量高,只需最少的RNA样本,即可同时进行多种目标miRNA的检测。
3. 检测特异性好,独特的miRNA引物设计技术及其优化的反应体系避免了非特异性扩增、特别是Pre-miRNA的污染。
4. 检测分辨率高:该系统能分辨单碱基差异的miRNA。
5. 检测灵敏度高:可在低至pg级的总RNA中检测到特异表达的miRNA。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 2×miRNA qPCR Mix | 0.75ml |
| Reverse Primer(10μm) | 30μl |
| RNase-Free Water | 1ml |
| miRNA cDNA第一链合成试剂盒 | 25T |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一、miRNA cDNA第一链合成
请参见miRNA cDNA 第一链合成试剂盒产品使用说明书。
二、miRNA荧光定量检测
1.室温融化2×miRNA qPCR Mix和Reverse primer(10μm)。
2. 使用时请将2×miRNA qPCR Mix上下颠倒轻轻均匀混合,避免起泡,并经短暂离心后使用。如果试剂没有混匀,其反应性能会有所下降。
3. 按照下表组分配制荧光定量PCR反应体系:
| 试剂组份 | 体积 |
| 2×miRNA qPCR Mix | 25μl |
| Forward Primer(自备) | 1μl |
| Reverse Primer | 1μl |
| miRNA 第一链cDNA | xμl |
| RNase-Free Water | 至50μl |
4. 建议反应程序设置如下:
| 循环 | 温度 | 时间 |
| 1× | 95℃ | 10min |
| 40~45× | 95℃ | 15s |
| 60℃ | 1min | |
| 溶解曲线分析 | 根据PCR仪要求设定 | |
注意事项:
1. miRNA 第一链cDNA的加入量不要超过Real time PCR 体积10%。
2. 对于特殊的检测体系,高含量的cDNA 模板易导致非特异性扩增,根据所检测miRNA的丰度适当的稀释cDNA(稀释10倍或者100倍)。
3. 2×miRNA qPCR Mix中含有SYBR Green I和ROX染料,保存本产品或配制PCR反应液时应避免强光照射。
北京现货miRNA荧光定量RT-PCR检测试剂盒特价促销正在火爆热销,除此之外,为您推荐下别热销产品:
·乙*(代"烯")乙二醇
编号:BTN131118
英文名称:Ethylene Glycol
规格:200mL
乙*(代"烯")乙二醇为比甘油更稳定的稳定剂。
产品特点:
1.特异性的纯化,能够去除醛类、过氧化物、铁及具有紫外吸收的烃类。
2.适于储存酶而不会损失活性。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
·农杆菌EHA101感受态细胞
编号:BTN161205
英文名称:E.coli EHA101 Rosetta Competent Cell
规格:10×100μL
EHA101菌株为C58型背景,核基因中含有筛选标签-利福平抗性基因rif,为了便于转化操作,此菌株携带一无自身转运功能的胭脂碱型Ti质粒pEHA101(pTiBo542DT-DNA),此质粒含有vir基因,vir基因是T-DNA 插入植物基因组必需的元件。pEHA101(pTiBo542DT-DNA)质粒自身的T-DNA转移功能被破坏,但可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移。pEHA101(pTiBo542DT-DNA)型Ti质粒含有筛选标签:kan,赋予EHA101菌株卡那霉素抗性,适用于玉米、水稻、烟草等植物的转基因操作。
本公司生产的EHA101化学转化感受态细胞经特殊工艺制作,pK7WGF2质粒(壮观霉素抗性)检测转化效率>104cfu/μg DNA。EHA101农杆菌的基因型是:C58(rifR)TipEHA101(pTiBo542 D T-DNA)(kanR)Nopaline。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| EHA101 农杆菌感受态细胞 | 0.1ml×10 |
| pKWGF2(10ng/uL) | 10μl |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:干冰运输,-80℃保存,有效期一年。
自备试剂:质粒DNA、液氮等。
使用方法:
转化前准备
1. 冰水浴和37℃水浴。
2.液氮或干冰/乙醇混合物。
3. 将抗性平板在28℃培养箱中平衡至少15分钟。
转化方法
1. 取-80℃保存的农杆菌感受态于室温或手心片刻待其部分融化,处于冰水混合状态时插入冰中。
2. 每100μL感受态加1μg(体积不大于10μL)质粒DNA,用手拨打管底混匀,依次于冰上静置5分钟、液氮5分钟、37℃水浴5分钟、冰浴5分钟。
3. 加入700μL无抗生素的LB或YEB液体培养基,于28℃振荡培养2~3小时。
4. 6000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的LB或YEB 平板上,倒置放于28℃培养箱培养2-3天(当平板只含有转化所用双元载体抗生素时,28℃培养48小时即可;平板中同时加入双元载体抗生素,20μg/ml rif时,需28℃培养60小时;如果使用的平板含有50μg/ml rif 则需要28℃培养72-90小时)。
注意事项:
1、加入质粒时体积不应大于感受态体积的1/10;质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,转化效率急剧下降;质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。
2、混入质粒时应轻柔操作。转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
3、平板上阳性克隆密度过大时,由于营养不足,阳性克隆生长变慢,菌落变小,为了获得大的菌落,应减少质粒用量。
4、利福平浓度不应高于25μg/mL,过高的利福平浓度不利于农杆菌生长,会降低其生长速度和转化效率。本公司EHA101感受态计算转化效率时所用平板只含有50μg/mL kan,若所用平板含有20μg/mL rif 则转化效率降低到1/2。
5、培养基中加入利福平的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌;根据所用菌株抗性加入链霉素或庆大霉素可防止Ti质粒丢失,但链霉素不利于农杆菌的转基因操作,所以一般培养农杆菌时不考虑链霉素或庆大霉素,Ti质粒丢失的概率极低(可以忽略)。
北京现货miRNA荧光定量RT-PCR检测试剂盒特价促销关键词:miRNA Realtime qRT-PCR Kit,BTN131042,miRNA荧光定量RT-PCR检测试剂盒
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鸟苷 5-Fluorouracil 118-00-3
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*化肉豆蔻酰胆碱 Fast red B salt 4277-89-8
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文献和实验siRNA转染试剂进行预转染实验,优化转染效率,通过荧光定量RT-PCR或者Western-blot验证干扰效率。 服务流程 1)培养细胞 2)优化转染条件:在荧光显微镜下观察转染效率或者用流式细胞检测评估转染效率。 3)根据靶基因序列设计一组RNA干扰序列。 4)采用荧光定量PCR 或Western blot评估RNA干扰效率。 5)(可选)用相应抗生素筛选稳定表达shRNA或miRNA的细胞株。 客户提供
。博士德部分现货ELISA产品超低价促销! 供应以上产品均为现货。特价产品如下: h.Activin A 1000元/96T h.MIP-1a 1500元/96T m.IL-4 1000元/96T h.BDNF 1000元/96Th.MIP-3a 1500元/96T m.IL-5 1000元/96T h.BMP-2 1500元/96Th.MCP-1 1000元/96T m.IL-6 1000元/96T h.CD54 1500元/96Th.MMP
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