北京现货细胞核提取试剂盒折扣价

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名称：北京现货细胞核提取试剂盒折扣价
英文名：Nuclear Extraction Kit
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
细胞核提取试剂盒用于从动物细胞或组织中分离出完整而纯化的细胞核。适合于动物软组织(肝或脑组织)和硬组织(肌肉)以及培养细胞的细胞核的制备。其制备物产量高，可以被用于细胞凋亡、信号传递、代谢和蛋白组学等的研究。产品不含污染性蛋白酶和核酶，性能稳定。

操作步骤：
1. 样本处理
a. 组织匀浆：称取100~200 mg新鲜组织如肝脏、脑、心肌等，PBS或生理盐水冲洗，洗净血水，滤纸吸干，用剪刀剪为碎块放入小容量玻璃匀浆器内。加入1.0 mL预冷的Lysis Buffer，再加入50μL Reagent A，0℃冰浴中上下研磨组织20次;有未研磨开的组织，可用双层纱布过滤。
b. 培养细胞匀浆：消化细胞，PBS洗涤，800 g 离心5~10 min收集细胞，计数。每次提取需要5 ×107个细胞，加入1.0 mL冰预冷的Lysis Buffer重悬细胞，再加入50μL Reagent A，将细胞悬液转移到小容量玻璃匀浆器内，0℃冰浴研磨细胞20~30次。
2. 将组织或细胞匀浆物转移到1.5mL离心管中，4℃，700g 离心5 min。细胞核沉淀在收集管底部，弃上清。加入0.5 mL冰预冷的Lysis Buffer重悬沉淀。
3. 取另一新离心管内加入0.5 mL Medium Buffer，吸取上一步的重悬液，沿管壁小心地加入到此离心管中，置于Medium Buffer之上，4℃，700 g 离心5min。细胞核沉淀在管底。
4. 弃上清，在细胞核沉淀中加入0.5 mL Lysis Buffer重悬细胞核沉淀，1000g 离心10min ，弃上清，得到较纯的细胞核沉淀。
5. 用50-100μL Store Buffer 或合适的反应缓冲液重悬细胞核沉淀，立即使用或-70℃保存。

注意事项：
1. 为保证获得完整的细胞核，务必做到：第一，全程低温操作;第二，快速;第三，在不破坏亚细胞器的情况下破碎细胞，这是制备细胞核的最关键环节。与组织块相比，培养细胞特别是贴壁培养细胞在用玻璃匀浆器匀浆时较难破壁，因而要选用小容量玻璃匀浆器、间隙严密的研杵上下研磨培养细胞。
2. 以离心力g计算正确的离心速度，不同的离心机可据此精确计算离心速度。
3. 进行Western Blot和2D-胶电泳，可直接加入上样缓冲液裂解细胞核。转速与离心力换算：G＝1.11×(10-5)×R×[rpm]2 G为离心力，一般以ｇ(重力加速度)的倍数来表示;[rpm]2即：转速的平方;R为半径，单位为厘米。

储存条件：4℃

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·dCTP(100mM)
编号：QN0523
规格：400μl
本品为dCTP水溶液，浓度为100mM，配合dGTP、dTTP、dATP用于PCR反应。

·8％多聚甲醛
编号：QN1251
英文名称：Paraformaldehyde,8％
规格：100mL|500mL
储存条件：-20℃

·β-胸苷
编号：QN0533
英文名称：Thymidine
规格：5g
别名：2"-脱氧胸苷;β-胸腺嘧啶核苷
CAS号：50-89-5
分子式：C10H14N2O5
分子量：242.23
储存条件：2～8℃

·O-苄基羟胺盐*(代"酸")盐
编号：QN0864
英文名称：Benzylhydroxylamine hydrochloride
规格：5g
CAS号：2687-43-6

·依克立达
编号：QN0021
英文名称：Elacridar
规格：10mg
CAS：143664-11-3
分子式：C34H33N3O5
分子量：563.64
储存条件：-20℃

·L-茶*酸
编号：QN0307
英文名称：L-Theanine
规格：10g
本品仅可用于科研实验研究，L-茶*酸的风味改良效果，增强免疫力，降血压功能，提高大脑，促进大脑对学习和记忆功能，有效增强肝脏排毒功能 茶*酸的降压作用。

别名：L-茶*酸
CAS号：3081-61-6
分子式：C7H14N2O3
分子量：174.2
储存条件：0～5℃
性状：白色结晶性粉末
溶解性：溶于水，不溶于乙醇，乙*(代"醚")。

·*唑西林*
编号：QN0043
英文名称：Cloxacillin Sodium Salt Monohydrate
规格：5g
本品为半合成抗菌素，与*唑西林的作用特点和用途极相似，对耐药金葡菌该品有杀毒作用(仅供参考)。

CAS：7081-44-9
分子式：C19H17ClN3NaO5S.H2O
分子量：475.88
储存条件：2～8℃
纯度：99%
性状：易溶于水，溶于乙醇，微溶于*仿，有引湿性，微臭，味苦。

·亚胺培南
编号：QN0017
英文名称：Imipenem
规格：100mg
CAS：74431-23-5
分子式：C10H12N2O3S
分子量：240.28
别名：亚胺硫霉素;亚胺配能;亚胺碳青烯
储存条件：-20℃

·二甲亚砜
编号：QN0749
英文名称：DMSO(Dimethyl sulfoxide)
规格：500ml
二甲亚砜DMSO是用途非常广泛的有机溶剂，有“万能溶剂”的美誉。

别名：二甲级亚砜;DMSO
CAS号：67-68-5
分子式：C2H6SO
分子量：78.13
纯度：＞99.9％
性状：无色透明液体
储存条件：室温

注意事项：DMSO不能使用PS、PVC、PC材料的容器，而应该使用LDPE、HDPE、PP材料的容器。


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·抑草生
编号：QN0758
英文名称：Naptalam
规格：10g
本品可抑制种子发芽，用于葫芦科植物、大豆、马铃薯和花生等作物中(仅供参考)。

CAS号：132-66-1
分子式：C18H13NO3
分子量：291.31
纯度：＞99.0% (HPLC)
性状：本品为白色结晶固体
溶解性：室温下水中溶解度为200mg/L，几乎不溶于*、己烷、二甲*。
储存条件：2～8℃

·羊抗人C3
编号：QN0270
英文名称：Goat anti-Human C3
规格：0.1ml
储存条件：-20℃

·羧苄青霉素溶液
编号：QN0089
英文名称：Goat anti-Human C3
规格：10mL
本品对绿脓杆菌及部分变形杆菌、大肠杆菌由抗菌性

浓度：50mg/ml
储存条件：—20℃,避光

·细胞松弛素B
编号：QN0326
英文名称：Cytochalasin B
规格：1mg
本品来源于Drechslera dematioidea，仅可用作科研试剂，用于细胞信号转导和神经科学、细胞生物学等领域。

CAS号：14930-96-2
分子式：C29H37NO5
分子量：479.61
储存条件：−20℃
纯度：≥98%(HPLC)
性状：白色结晶性粉末

·原儿茶酸
编号：QN0592
英文名称：3,4-Dihydroxybenzoic acid
规格：5g
CAS号：99-50-3
别名：3,4-二羟基*甲*(代"酸")
分子式：C7H6O4
分子量：154.12

·盐*(代"酸")平阳霉素
编号：QN0029
英文名称：Bleocin
规格：10mg|100mg|1g
CAS：55658-47-4
分子式：C57H89N19O21S2·HCl
分子量：1477.04
储存条件：RT

·SABC免疫组化试剂盒(山羊IgG)(FITC荧光显色)
编号：QN1224
英文名称：SABC(Goat IgG)-FITC Kit
规格：100T-200T
本试剂盒适合于一抗为山羊IgG来源的免疫组化实验.，FITC荧光检测。

试剂盒组份：
封闭液(5% BSA)-——————10ml
Bio-兔抗山羊IgG浓缩液———100ul
SABC-FITC浓缩液——————100ul
稀释液-——————————30ml
抗荧光衰减封片剂-—————10ml

SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的，用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质，同亲和素一样，对生物素有极高的亲和力，亲和素是一个碱性蛋白质(PI=10)，经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性，对组织和细胞的非特异吸附很低，基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。SABC即StreptAvidin—Biotin Complex，SABC大约可形成一百个左右的FITC和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的FITC将保证SABC具有很高的敏感性。

操作步骤：(以石蜡切片热修复为例)
1. 切片常规脱蜡至水。
2. 可选步聚：
a、热修复抗原，将切片浸入0.01M 柠檬酸*缓冲液(PH6.0),电炉或微波炉加热至沸腾后断电，间隔5-10分钟后，反复1-2次。冷却后PBS(pH7.2-7.4)洗涤1-2次。
b、酶消化，滴加消化液，37℃，10分钟，PBS(pH7.2-7.4)洗涤2-3次。
c、跳过此步，直接进入下一步。
3. 滴加5%BSA封闭液,室温20分钟。甩去多余液体, 免洗。
4. 用稀释液将一抗按一定比例稀释(稀释后的一抗4℃可保存一周)，也可另行购买抗体稀释液。滴加稀释的一抗，37℃ 孵育1小时左右或20℃ 2小时左右，也可4℃过夜。PBS(pH7.2-7.4)洗涤3次，每次2分钟(一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说，阳性染色强度不够时，可提高一抗浓度和延长孵育时间;背景过高时，可降低一抗浓度和缩短孵育时间)。
5. 根据使用量,用稀释液将Bio-兔抗山羊IgG浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul Bio-兔抗山羊IgG浓缩液,混匀即成工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加Bio-兔抗山羊IgG工作液,20-37℃ 30分钟。PBS(pH7.2-7.4)洗涤3次，每次2分钟。
6. 根据使用量,用稀释液将SABC-FITC浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul SABC-FITC浓缩液，混匀即成SABC-FITC工作液，此工作液4℃可保存一周)。滴加SABC-FITC工作液，20-37℃孵育30分钟(避光)。PBS(pH7.2-7.4)洗涤4次，每次5分钟。
7. 滴加抗荧光衰减封片剂封片。荧光显微镜观察。

对于细胞爬片，固定后，PBS漂洗两次，再用0.5% Trxiton X-100室温孵育20分钟， PBS漂洗两次，接上述第3步。
对于冰冻切片，固定后，PBS漂洗两次，再接上述第2步。

注意事项：如果背景过高，在SABC反应之后，用加有0.01—0.02% TWEEN-20的PBST(pH7.2-7.4)洗涤切片4次，PBS洗2次，然后封片观察。


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