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594
- 英文名:
Antigen Retrieval Solution,1×(for Frozen Sections)
- 保质期:
1年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
室温
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货冰冻切片抗原修复液促销,我公司是生物试剂、化学试剂专业供应商,立足北京,服务全国的高校、研究所、医院、企业科研部门,欢迎各位老师来电垂询订购。
名称:北京现货冰冻切片抗原修复液促销
英文名:Antigen Retrieval Solution,1×(for Frozen Sections)
规格:100mL|500mL
品牌:百奥莱博
编号:QN1257
产地:国产|进口
冰冻切片抗原修复液是一种特别适合用于冰冻切片的快速抗原修复液,只需室温孵育 5 分钟即可完成对冰冻切片样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。
使用说明:
1、将冰冻切片用 PBS 洗涤 3 次,每次 5min。
2、将切片浸泡在抗原修复液中,室温孵育 5min。
3、PBS 洗涤样本切片,重复 3 次,每次 5min。充分洗涤残留的 SDS,以免造成抗体失去活性。
4、封闭液封闭切片。
5、随后即可进行一抗孵育等后续的免疫染色步骤。
储存条件:室温,有效期1年
更多有关北京现货冰冻切片抗原修复液促销的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·β-胸苷
编号:QN0533
英文名称:Thymidine
规格:5g
别名:2"-脱氧胸苷;β-胸腺嘧啶核苷
CAS号:50-89-5
分子式:C10H14N2O5
分子量:242.23
储存条件:2~8℃
·*茶碱
编号:QN0858
英文名称:Aminophylline hydrate
规格:25g|100g
CAS号:317-34-0
分子式:2C7H8N4O2.C2H8N2
分子量:420.43
性状:白色或淡黄色颗粒或粉末,露置空气中逐渐吸收二氧化碳气体而分解或茶碱,微有近臭,味苦
溶解性:易溶于水,不溶于乙醇或乙*(代"醚")
储存条件:−20℃
·依克立达
编号:QN0021
英文名称:Elacridar
规格:10mg
CAS:143664-11-3
分子式:C34H33N3O5
分子量:563.64
储存条件:-20℃
·酒石酸*胆碱
编号:QN0861
英文名称:Choline bitartrate
规格:25g|100g
CAS号:87-67-2
·2×Taq Plus PCR MasterMix (不含染料)
编号:QN0970
英文名称:Choline bitartrate
规格:1ml|5ml
PCR MasterMix包含三种酶(Taq,Pfu,Taq plus),每种酶对应着两种PCR MasterMix(含染料和不含染料),一共六种PCR MasterMix。
Taq:扩增效率最高的耐热DNA聚合酶,其扩增速度约为1-2kb/min。扩增碱基出错率为10-5左右。其产物未端带有A,可直接用于TA克隆。
Pfu:目前保真度最高的耐热DNA聚合酶,碱基出错率为10-6,但扩增效率低于Taq酶,一般能很好的扩增2kb以下的片段。其扩增速度约为500bp/min左右。其产物为平未端,须加A后才可用于TA克隆。
Taq Plus:Taq和Pfu的等比混合物。集扩增效率高和保真度好于一身。扩增效率比Pfu高,保真度比Taq好。其扩增速度约为1000bp/min左右。其产物未端带有A,可直接用于TA克隆。
染料PCR MasterMix反应完后可以直接电泳检测。不含染料的PCR MasterMix反应完后加入上样缓冲液后电泳检测。
别名:2×Taq Plus PCR MasterMix (不含染料)
英文名称:2×Taq Plus PCR MasterMix (不含染料)
储存条件:-20
性状:液体
北京现货冰冻切片抗原修复液促销关键词:冰冻切片抗原修复液,QN1257,Antigen Retrieval Solution,1×(for Frozen Sections)
·亚胺培南
编号:QN0017
英文名称:Imipenem
规格:100mg
CAS:74431-23-5
分子式:C10H12N2O3S
分子量:240.28
别名:亚胺硫霉素;亚胺配能;亚胺碳青烯
储存条件:-20℃
·潮霉素B
编号:QN0095
英文名称:Hygromycin B
规格:1g
本品由吸水链霉菌代谢产生的一种*基糖苷类抗生素,通过干扰70S核糖体易位和诱导对mRNA模板的错读而抑制蛋白合成,从而杀死原核(如细菌)、真核(如酵母菌,真菌)和高等哺乳动物真核细胞。本品是无菌的潮霉素B溶液(100mg/ml),可直接用培养液稀释使用。
CAS:31282-04-9
分子式:C20H37N3O13
分子量:527.52
储存条件:2~8℃
性状:澄清或轻微浑浊黄色溶液
大肠杆菌( Escherichia coli.)来源的潮霉素抗性基因(hyg或hph),编码潮霉素B磷酸转移酶,将潮霉素B转化成不具有生物活性的磷酸化产物,从而起到解毒作用。针对这一原理,潮霉素B是一种非常有用的选择性标记,用来筛选和维持培养成功转染潮霉素抗性基因的原核或者真核细胞。另外,由于作用模式的差异,常与G418,Zeocin™ 和Blasticidin S联合使用进行双抗性阳性细胞株的选择。潮霉素B还能用作抗病毒剂,因其选择性渗透进入因病毒感染增强通透性的细胞,且具有抑制翻译的功效。还可混合入动物饲料中起到驱虫功能。
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:潮霉素B用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素最低浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1)第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2)根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
| 终浓度(μg/mL) | 培养基体积(ml) | 5mg/ml潮霉素B加入体积(ml) |
| 50 | 9.9 | 0.1 |
| 100 | 9.8 | 0.2 |
| 250 | 9.5 | 0.5 |
| 500 | 9.0 | 1.0 |
| 750 | 8.5 | 1.5 |
| 1000 | 8.0 | 2.0 |
3)第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4)接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5)按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的最低浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1)转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤效果最好。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%。
2)每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3)筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4)挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5)之后更换正常培养基培养即可。
北京现货冰冻切片抗原修复液促销关键词:冰冻切片抗原修复液,QN1257,Antigen Retrieval Solution,1×(for Frozen Sections)
SJ0849 人血清(混合血型)
硼*(代"酸")铵 6-MP 12007-58-8
CV0101 pSURE-T 载体连接试剂盒
Tris-HCl缓冲液(1mol/L,pH6.8) 100ml|500ml|2L
4-羟基*甲醛 Acidic Protease 123-08-0
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PY02-104 真菌培养基 250克
BL1334 通用引物 ITS2
ARB10008 人15脂加氧酶(15-LO/LOX)酶标法分析 Human 15-lipoxygenase,15-lo/lox ELISA KIT
ARB12991 小鼠抗内皮细胞抗体(AECA)elisa检测操作说明书 Mouse anti-endothelial cell antibody,aeca ELISA KIT
罗丹明123溶液 0.5mg/ml 100ul
CYB165031 生物素化人IgG
ARB10990 人冷球蛋白(CG)代做ELISA实验 Human cryoglobulin,cg ELISA KIT
硫*(代"酸")鱼精蛋白副凝固定检测试剂盒(3P凝固法) 60T
大孔吸附树脂D101 1-β-D-Arabinofuranosylthymine 9060-05-3
ARB13460 鸡血小板因子4(PF-4/CXCL4)Elisa方法检测 Chicken platelet factor 4,pf-4 ELISA KIT
PY04-014 肝浸液(猪) 100ml/瓶 根据要求适量添加,用于配制培养较难生长的微生物培养
BTN131045 辛甲基硫吡喃葡萄糖苷 OTG
133-32-4 Indole-3-butyricacid(IBA)吲哚-3-丁酸(水溶)
SJ0698 低分子量蛋白Marker Ⅰ (14.4-97.4kD)
BTN120411 T4 DNA聚合酶 T4 DNA Polymerase
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文献和实验不完全:使用正常山羊血清或 1%~5% BSA 封闭 1h。 (5)离子相互作用造成的背景:降低抗体稀释液的离子强度。 (6)切片或细胞过于干燥或孵育温度过高:实验过程中请保持切片处于湿润状态,一抗孵育时尽量使用 4℃ 过夜孵育。 (7)内源性过氧化物酶残余:适度延长内源性过氧化物酶阻断剂阻断时间。 (8)样本于缓冲液或抗原修复液中浸泡太久:样本在溶液中浸泡时间不要超过 24h。 Q4:为什么会出现非特异性染色,如何避免? (1)抗体孵育时间过长、抗体浓度高易增加非特异性染色:由于本试剂盒使用
抗原修复方法 Antigen Retrieval Methods
技术即可检测到特定抗原。 恢复表位免疫反应性的方法有很多种。即使是改变抗体稀释液的pH值或阳离子浓度这样简单的方法,也能影响抗体与其表位的亲和力。对于部分掩蔽的表位,在进行抗原修复之前,可以先尝试延长一抗的孵育时间。然而,这一步骤也需要进一步优化,包括合适的抗体浓度、孵育时间和温度。在讨论抗原修复方法时,通常将其分为两大类:蛋白酶诱导表位修复(PIER)和热诱导表位修复(HIER)。一旦优化,抗原修复的效果将非常显著。 蛋白酶诱导表位修复(PIER) 在PIER方法中,蛋白酶K、胰蛋白酶和胃
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