超快核酸银染试剂盒现货促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产供应超快核酸银染试剂盒现货促销，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：超快核酸银染试剂盒现货促销
英文名：Rapid Silver Stain for Nucleic Acid
编号：BTN81104
规格：1000mL
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
核酸银染的原理是银离子(Ag+)可与核酸形成稳定的复合物，然后用还原剂如甲醛在碱性环境下使Ag+还原成银颗粒，可把核酸电泳带染成黑褐色。它主要用于聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳染色，也用于琼脂糖凝胶染色，其灵敏度比EB高200倍，常用于检测SSR标记、SNP标记。但常规的银染方法由固定、氧化、染色、显影、终止等步骤组成，操作十分繁琐，尤其不适用于大批量实验。为解决此问题，本公司推出本产品。

产品特点：
1.超快，整个过程只需要20分钟。
2. 操作简单，只有染色和显影两步。
3. 灵敏度跟常规方法相当，EB高200倍，能检测到10ng的DNA 条带。
4. 两个成分都是现用现配，可重复性好。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A组分一(干粉)	2g
溶液A组分二，10×	100ml
溶液A组分三，10×	100ml
溶液B组分一，10×	100ml
溶液B组分二	5ml
说明书	1份

注：1000mL规格指可配制的溶液A(染色液)的体积，实际使用次数根据PAGE胶大小不同而不同。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

使用方法：

一：配制溶液A100mL
需要配制的溶液A(染色液)的体积完全跟PAGE胶的大小相关，一般的mini-PAGE胶需要20-30mL。下面的用量是针对配制100mL溶液A。如果配制的溶液A的体积不是100mL，则需按比例改变各成分用量。在一干净烧杯中加入下列成分搅拌混匀即可。
溶液A需要新鲜配制。

成分	用量
去离子水	80ml
溶液A成分一	0.2g
溶液A成分二	10ml
溶液A组分三	10ml

二：配制溶液B100mL
需要配制的溶液B(显色液)的体积完全跟PAGE胶的大小相关，一般的mini-PAGE胶需要20-30mL。下面的用量是针对配制100mL溶液B。如果配制的溶液B的体积不是100mL，则需按比例改变各成分用量。在一干净烧杯中加入下列成分搅拌混匀即可。
溶液B需要新鲜配制。

成分	用量
去离子水	89.5ml
溶液B成分一	10ml
溶液B组分二	0.5ml

三：染色
1. PAGE电泳结束后，将PAGE胶转移到装有去离子水的瓷盘中，漂洗2次，每次2分钟。
2. 将PAGE胶转移到适当体积的溶液A，使溶液A在轻柔摇晃过程中能够淹没PAGE胶。室温染色时间10分钟。
3. 倒掉溶液A，用去离子水快速漂洗2次，每次半分钟。
4. 将PAGE胶转移到适当体积的溶液B，使溶液B在轻柔摇晃过程中能够淹没PAGE胶。室温摇晃直到颜色显现，一般需要10分钟左右。
5. 将PAGE胶置于适当背景下照相。

我公司的超快核酸银染试剂盒现货促销，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：

·DNA包被溶液
编号：BTN131117
英文名称：DNA Coating Solution
规格：250mL
本产品可以快速将DNA 沉积于塑料表面用于杂交 ，可以有效地将DNA 包被于微平板和微量样品管表面。

产品特点：
1. 无需孵育过夜或加热微平板，无需等待
2. 促进DNA 有效地固定在微平板表面——杂交效率与DNA 表面固相化效率是相关的。
3. 包被的靶DNA可以进行快速和灵活的检测
4. DNA 包被到塑料制品表面后足够稳定，可以在使用前保存数月
5. DNA 包被溶液可通过高压灭菌使DNase失活。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·考马斯亮蓝R-250
编号：BTN131122
英文名称：Coomassie Blue R-250
规格：10g
考马斯亮蓝R-250是考马斯亮蓝系列染料中的一种。R表示其干粉颜色是蓝色偏红，250表示其纯度。其*盐的分子式是C45H44N3O7S2Na，分子量为826。在酸性条件下，染料的硫*(代"酸")基团能跟蛋白的碱性*基酸结合，故常用于主要用于SDS-PAGE染色。考马斯亮蓝R-250 比G-250少两个甲基基团，不能直接替换使用。


储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

·5´末端同位素标记试剂盒
编号：BTN131036
英文名称：DNA 5´End-Labeling Kit
规格：20次
本产品为DNA 5´末端标记系统，利用T4 Polynucleotide Kinase(T4多聚核苷酸激酶)和［γ-32P］ATP 对粘性末端或平末端的DNA或RNA的5´末端进行高效标记反应。原理如下：


产品特点：
1. 使用本试剂盒之前，不需要对 5´末端的磷酸基团进行去磷酸化处理，因为使用的kinase 能使5´末端的磷酸与[γ-32P]ATP的γ-磷酸进行交换。
2. 合成的单链或双寡核苷酸的5´末端游离的OH基团都能通过Kinase反应被标记(或者只是简单的磷酸化)。
3. 提供的两种反应液使交换反应和磷酸化反应都能高效进行，均能得到大于106 cpm/pmol(5´-end)的比活性。

试剂盒组份：

成分	规格
T4 多聚核苷酸激酶(10U/μL)	20μl
5×交换反应缓冲液	100μl
10×磷酸缓冲液	50μl
Control DNA	20μl
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一、交换反应
1. 实验前需自备的试剂：7 M 醋酸铵、100%乙醇、70%乙醇等
2.在微量离心管中制备下列反应液：

成分	加入的体积
自备的5´磷酸化DNA片段	14μL(≤5 pmoles的5´末端)
5×交换反应缓冲液	5μL
[γ-32P]ATP	5μL
T4 多聚核苷酸激酶(10U/μL)	1μL
灭菌的超纯水	补足到25μL

注：5 pmoles的5´末端约等于0.17μg的长100bp的双链DNA。
3. 37℃反应30分钟。
4. 70℃加热5～10分钟使酶失活。
5. 加入10μl的7 M CH3COONH4(pH4.5)。如使用CH3COONa做乙醇沉淀时使其终浓度达300mM。
6. 加入87.5μl(2.5倍)的冷无水乙醇，-20℃放置30～60分钟。
7.离心回收沉淀，用 70%的冷乙醇清洗沉淀，真空干燥。
8. 用适当 Buffer 溶解沉淀。
注：通过第5～8 步操作几乎可以除去大部分未反应的[γ-32P] ATP，如要完全将其除去时，乙醇沉淀后用凝胶过滤等方法精制即可。如需用*酚抽提除去蛋白质时，请在第8 步之后进行。

二、磷酸化反应标记

A. 去磷酸化反应
1. 实验前需自备的试剂：TE 饱和酚/*仿、3 M NaCl 、100%乙醇、70%乙醇、牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)等
2.在微量离心管中制备下列反应液：

成分	加入的体积
自备的DNA片段	133μL(≤10μg)
1M Tris-HCl，pH8.0	15μL
牛小肠碱性磷酸酶(CIAP，10～20U/μL)	2μl
灭菌的超纯水	补足到150μL

3. 50℃反应30分钟。
4. 加入150μl的TE 饱和酚/*仿/异戊醇(25：24：1)，充分混匀。
5.离心，取上层(水层)移到另一个微量离心管中。
6. 重复操作 4～5。
7. 加入7.5μl的3 M NaCl(最终浓度150mM)。
8. 加入375μl(2.5倍量)的冷无水乙醇，-20℃放置30～60分钟。
9.离心回收沉淀，用 1mL 70%的冷乙醇清洗后，沉淀真空干燥。
10. 使用 20μl的TE Buffer 溶解沉淀。

B. 磷酸化反应(前反应)
1.在微量离心管中制备下列反应液：

成分	加入的体积
自备的DNA片段	20.5μL(≤5 pmoles的5´末端)
10×磷酸缓冲液	2.5μL
[γ-32P]ATP	1μL
T4 多聚核苷酸激酶(10U/μL)	1μL
灭菌的超纯水	补足到25μL

2. 37℃反应30分钟。
3.下面的操作与交换反应的第4-8 步操作相同。

三、合成DNA 寡核苷酸的标记
1.在微量离心管中制备下列反应液：

成分	加入的体积
Oligonucleotide DNA with free 5´-OH(5～10 pmoles)	≤3μL
10×磷酸缓冲液	2.5μL
[γ-32P]ATP	1μL
T4 多聚核苷酸激酶(10U/μL)	1μL
灭菌的超纯水	补足到25μL

2. 37℃反应30分钟。
3.下面的操作与交换反应的第4-8 步操作相同。

四、合成DNA 寡核苷酸的标记
当掺入水平很低的时候，需要使用本步骤，即通过体积排阻色谱或过滤试剂盒除去未反应的标记。Sephadex G-50 层析柱(需另购)对于去除未掺入的dNTPs效果很好，它还能大幅减少小于20个碱基的DNA 寡核苷酸和小于20bp的双链DNA的量。使用之前需要在70℃加热5～10分钟以使T4 多聚核苷酸激酶失活。Sephadex G-25 层析柱可以用来纯化长度不小于10个碱基的寡核苷酸。

注意事项：
1.缓冲液可在室温融解。融解后立即置于冰中，使用前充分混匀。
2. 5×交换反应缓冲液于-20℃冻结保存时会有白色浑浊出现，但不影响反应效果。
3.酶切得到的DNA片段需经乙醇沉淀等方法纯化。
4. 当用于交换反应的DNA在5 pmoles以上(约1,000bp以上)时，标记效率有时会低于106 cpm/pmol。
5. 如果交换反应所用 DNA低于500bp时，标记效率有时会有所降低。
6. 若不进行放射线标记，仅使用本试剂盒做5´末端磷酸化反应时，反应体系中的［γ-32P］ATP可用5μl的10mM ATP 代替。
7. 磷酸化反应时的［γ-32P］ATP可用［γ-35S］ATP 替代。

使用举例：
按照使用方法中交换反应和合成DNA 寡核苷酸的标记的实验操作，取λ-BstP I，λ-Hpa I，λ-EcoT22 I 各3 pmols，用［γ-32 P］ATP 通过正向磷酸化反应或交换反应标记。各DNA片段的放射自显影结果如下所示：



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·电泳级SYBR Green I
编号：BTN3280
英文名称：SYBR GreenⅠ, electrophoretic grade
规格：50μL
SYBR Green I，EG是电泳级低毒高灵敏的花青类DNA荧光染料，适用于各种核酸电泳分析。

产品特点：
1.低毒安全，其致突变性低于EB 数倍甚至数十倍。
2. 髙灵敏，SYBR Green I与dsDNA 结合，荧光信号会增强800-1000倍，至少可检出 20 pg DNA，灵敏度高于EB染色法10－25倍。
3.适用范围广，可适用于多种电泳分析，包括琼脂糖凝胶，聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳和毛细管电泳等。与我司的SuperBuffer-2 兼容。
4. 不影响其它修饰酶(Taq酶、逆转录酶、内切酶、T4连接酶等)作用。
5. 操作简单，无须脱色或冲洗。

储存条件：常低温运输，-20℃闭光保存，有效期一年。

使用方法之一：电泳前染色
 本方法是在上样时对DNA进行染色，只适于琼脂糖凝胶电泳。
1. 用高纯度的无水DMSO 将10000×的SYBR Green I 稀释100倍成100×电泳前染色液。染色液可以在-20℃和闭光条件下可以保存一个月以上。
2. 按常规方法制备胶，胶的厚度最好不要超过5mm，胶中不能含任何染料。
3. 将100 X电泳前染色液与DNA样品(包括DNA Marker)按1：10的比例混合，室温放置10-15分钟，加上样液后上样。
4.上样后电泳。
5.在300nm的UV下观察。UV的功率最好为90W(15W X 6)，手持UV一般功率不够，难以得到满意的灵敏度。除300nm外，SYBR Green I还可以在500nm和380nm的激发光下观察(如使用Dark Reader 蓝色可见光透色仪)。也可以用激光扫描仪记录电泳结果。
6. 用配置了520-550nm 滤光片(一般呈黄色或深黄色)的相机拍照。
 注意：不要使用与EB 兼容的红色滤光片(能阻挡520-550nm的光)。如果能再加上能滤去UV的滤光片，效果会更好。
7.后续Southern或Northern转膜或胶回收按常规操作进行。

使用方法之二：电泳中染色
 本方法是将SYBR Green I 加入到琼脂糖凝胶中，优点是不需要额外的染色处理，只适于琼脂糖凝胶电泳。
1. 将10000×SYBR Green I 直接加入到融化的、但温度已经降低到50℃左右的琼脂糖凝胶中，使其终浓度在0.5-1X左右，混合均匀后倒胶，厚度最好不要超过5 mm。
2. 按常规方法上样和电泳。
3.电泳后观察和照相处理同方法一。
 注意：由于在琼脂糖凝胶中的SYBR Green I在加热融化时会大量分解，所以琼脂糖凝胶最好需要多少配多少。

使用方法之三：电泳后染色
 本方法是在电泳后对DNA进行染色，适用于琼脂糖凝胶电泳和PAGE，检测灵敏度可达20 pg DNA，但该方法需要单独的染色处理。
1. 按照常规方法进行电泳。
2. 用pH7.0-8.3的缓冲液(如：TAE，TBE或TE)将10000×SYBR Green I 稀释10000倍成1×电泳后染色液。
3. 将电泳后染色液倒入合适的聚丙*(代"烯")容器中，放入琼脂糖凝胶，用铝箔等盖住容器使染料避光。室温振荡染色10-30分钟。对聚丙*(代"烯")酰胺凝胶，可取下一块玻璃板，然后将配好的电泳后染色液轻轻地倒在PAGE胶板上，让染色液均匀地覆盖整个PAGE胶板，静置染色30分钟。避免让染色液与玻璃表面接触。
4. 观察和照相处理同方法一。
 注意：电泳后染色液可以冷冻避光储存一个星期。反复使用次数取决于胶的大小(胶越大，非特异吸附产生的损耗就越大)，一般可重复使用4次。

注意事项：
1. 融化：本产品溶于DMSO中，融化时一定要让其彻底融化，否则SYBRGreen I在液相和固相中浓度不均，影响实验的可重复性。
2. 容器：SYBR Green I 对聚丙*(代"烯")材料的亲和力非特意吸附最小，故建议在稀释、贮存、染色等使用过程中使用专用的聚丙*(代"烯")类容器，容器表面会被染成橙色。不要使用玻璃和非聚丙*(代"烯")容器。
3. 反复使用：由于凝胶和容器的非特意吸附，使用过的SYBR Green I 再染色时效率会逐渐降低。
4. 稳定性：稀释后的SYBR Green I工作液体最适保存条件是闭光、密封、低温(4℃)、pH在7.5-8.3。避免将本产品直接加入热的琼脂糖凝胶中，禁止用微波加热处理SYBR Green I。
5. 稀释液：可以用电泳缓冲液稀释SYBR Green I，包括常用的TAE、TBE、TE、SuperBuffer-2等。最好不要使用水和pH7.8(25℃)的Tris缓冲液。后者的pH在4℃时会升高到8.4。
6.其他影响因素：染色液中最好不要有SDS，也不要用去污剂洗涤染色用的聚丙*(代"烯")容器时，0.1-.3% SDS 能抑制SYBR Green I与DNA 结合。用deaza-G 替代G的DNA 不能有效染色。

疑难解答：
Q：DNA 条带为何出现弯曲或模糊？
A：DNA 过量，将DNA 用量降低到1-5 ng/条带。电泳时间不要超过2小时，否则SYBR Green I 会从DNA上分离出来，会产生弥散状条带。电压不能太高，否则产热会影响SYBR Green I与DNA的结合。
Q：醇/盐沉淀法能否把结合在DNA上的SYBR Green I 去掉？
A：可以。其中乙醇效果最好，异丙醇次之。但正丁醇、*仿和*酚抽提不能去除与DNA 结合的SYBR Green I。
Q：用SYBR Green I 染过的胶能否用于Southern或Northern Blot？
A：可以，但最好在预杂交和杂交溶液中加入0.1%-0.3%的SDS。SDS 能是SYBR Green I与DNA 分开。
Q：能否用SYBR Green I染色膜上的DNA。
A：可以用来染色带正电的尼龙膜上的DNA，不能用于中性尼龙膜和硝酸纤维素膜。


超快核酸银染试剂盒现货促销关键词：BTN81104,超快核酸银染试剂盒,Rapid Silver Stain for Nucleic Acid


·木材DNA提取试剂盒
编号：BTN130941
英文名称：Timber DNA extraction kit
规格：50次

·单细胞裂解液(DNA提取)
编号：BTN130803
英文名称：Single Cell Lysis Solution
规格：1mL
本产品为单细胞DNA提取专用裂解液，本裂解液经多次优化，含有多种去污剂、变性剂和盐，可有效抑制核酸酶在裂解过程中对核酸的破坏，维持核酸结构的稳定。纯化所得DNA可用于全基因组扩增(WGA)等实验。本产品足够使用200次以上。

储存条件：低温运输，4℃保存，有效期两年。

·Hoechst 33258干粉
编号：BTN130864
英文名称：Fluorescent Dye Hoechst 33258，Powder
规格：10mg
Hoechst 33258是一种可透过细胞膜并对DNA染色的细胞核染色试剂，它在嵌入双链DNA后释放强烈的蓝色荧光，其常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。

CAS号：23491-45-4
分子式：C25H24N6O•3HCl
分子量：533.88

产品特点：
1．Hoechst 33258是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低。
2．Hoechst 33258常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。也常用于普通的细胞核染色，或常规的DNA染色。
3．Hoechst 33258的最大激发波长为346nm，最大发射波长为460nm；其和双链DNA结合后，最大激发波长为352nm，最大发射波长为461nm。
4．Hoechst 33258溶于水，溶解度可达10mg/mL。用于细胞核染色时，推荐的Hoechst 33258工作浓度为0.5-10μg/mL。

储存条件：低温运输，-20℃干燥避光保存，有效期一年。

使用举例：
1．用PBS或合适的缓冲液制备10～50 µM Hoechst33258染料。
2．将1/10细胞培养基体积的Hoechst染料溶液加入细胞培养物中。
3．在37℃培养细胞10～20分钟。
4．用PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
5．用带有350nm激发波长，460nm发射波长的滤光片的荧光显微镜观察细胞。

我公司生产供应销*(代"售")的核酸电泳和回收正全品类优惠促销，十分期待您的咨询选购超快核酸银染试剂盒现货促销。