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北京冷启动核酸酶厂家价格

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  • ¥200 - 1950
  • 百奥莱博
  • BTN130824-ORG
  • 北京
  • 2025年07月12日
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      909

    • 英文名

      Cold-active Nuclease

    • 保质期

      二年

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      -20℃

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    百奥莱博专业生产销*(代"售")北京冷启动核酸酶厂家价格,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。


    名称:北京冷启动核酸酶厂家价格
    规格:10000U
    产地:国产|进口
    品牌:百奥莱博
    英文名:Cold-active Nuclease
    本酶能够切断所有类型的DNA和RNA(单链、双链、线性以及环状),即使在冰上也能进行反应。因此,本酶特别适用于消化蛋白质等一些热不稳定基质中的核酸物质。

    产品用途:
    ➤ 降解基因组DNA。
    ➤从大肠杆菌细胞中抽提蛋白质时,降低溶液黏度。
    ➤ 双向电泳时,对样品进行预处理。
    ➤ 病毒纯化时的预处理。

    产品组成:

     
    成分 规格
    Cryonase冷启动核酸酶(20U/μl) 500μL
    使用手册 1份


    储存条件:低温运输,4℃遮光保存,有效期二年。

    活性定义:以鲑鱼精子DNA为底物,在37℃、pH7.5的条件下,1分钟内使反应液的260nm吸光度增加0.001所需的酶量定义为1个活性单位(U)。

    北京冷启动核酸酶厂家价格正在火爆热销,除此之外,为您推荐下别热销产品:

    ·1M Tris-HCl(pH9.0)(DNA级)
    编号:BTN101208
    规格:250mL

    ·DNA marker(λ/EcoRI+HindIII)
    编号:BTN90602F
    英文名称:DNA ladder(λ/EcoRI+HindIII)
    规格:50次
     本系列产品为传统的酶切分子量标准,由单一的质粒DNA或噬菌体DNA经单个限制性内切酶完成消化后,加热灭活而成。每次上样总DNA含量已知,每条带的含量可根据其摩尔数的比值计算出来。本系列产品成分中已经含有上样缓冲液,所以可以直接上样电泳。得到的电泳条带长度准确,明亮清晰,背景较低,稳定性很好。
     每次加样量为5μL,可用于相对定量。本系列产品与各种琼脂糖和各种电泳缓冲液兼容。

    储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。

    使用方法:直接上样电泳,每次加样量为5uL。

    使用效果:
    DNA marker(λ/EcoRI+HindIII)

    疑难解答:
    a)如对带型要求较高,建议使用0.8-1.5%琼脂糖凝胶(对SuperBuffer-2缓冲液,电压为250-400V)或1.5-2.0%琼脂糖凝胶(对TAE或TBE缓冲液,电压为80V),同时适当延长电泳时间。
    b)电泳图象的质量与琼脂糖、电泳缓冲液有关。请采用高质量的琼脂糖,同时要经常更换电泳缓冲液。


    ·His标记蛋白质微量纯化套装(含核酸酶和溶菌酶)
    编号:BTN100102B
    英文名称:One-Stop His-Tagged Protein Miniprep Pack(B)
    规格:2mL
    本产品基于His-Ni亲和层析的蛋白质纯化方法是目前分离纯化重组表达蛋白质的重要方法,本产品就是专门用于上述实验的一站式产品。

    产品特点:
    1.一站式套装,含所需的介质、溶液和层析柱,用户只需要提供表达His蛋白的细菌(酵母、杆状病毒、培养细胞)即可,非常方便。
    2. 专一性强,一次过柱即可获得纯度高达95%的His-标记蛋白。
    3.变性和非变性条件均可使用,也适用于纯化包涵体中的His标记蛋白。
    4. 每次可以处理20mL的表达菌液,适合初步筛选和鉴定。
    5. 提供4mL浓度为50%的Ni-Agarose介质,其最大载量为20-30mg His标记蛋白质/mL介质。
    6. 介质为CL-6B琼脂糖,含四个Ni离子螯合基团,比只有四个Ni离子螯合基团的Ni-IDA更有效。
    7. 本介质可以反复使用多次。
    试剂盒组成:
    成份 规格
    Ni-Agarose介质,50% 4mL
    1M咪唑溶液 25mL
    1M Tris-HCl pH7.9 25mL
    5M NaCl溶液 25mL
    溶菌酶(20 KU/mg) 30mg(A型无)
    Benzonase(2U/μL) 20μL(A型无)
    盐*(代"酸")胍 6g
    尿素 20g
    PMSF(10mg/mL) 0.5mL
    亲和层析柱,6mL 1套
    使用手册 1份


    储存条件:常温运输和保存,但介质需4℃保存,溶菌酶、Benzonase和PMSF需-20℃保存,有效期一年。

    自备试剂:去离子水、20%乙醇、0.45μm滤膜

    使用方法:
    1.将Ni-Agarose介质充分混匀后,取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中(介质用量需要根据His蛋白产量决定,其最大载量为20-30mg His标记蛋白质/mL介质,请根据实验需要取适量的Ni-Agarose介质加入层析柱)。
    2.用5倍柱体积(指填料的体积,下同)自备去离子水洗柱,共三次。
    3.用5倍柱体积的新配结合液洗柱(配方如下,以10mL为例),共三次:
    成分 用量 在结合缓冲液中浓度
    1M Tri-HCl(pH7.9) 0.2mL 20mM
    1M咪唑溶液 0.1mL 10mM
    5M NaCl溶液 1mL 500mM
    自备去离子水 8.7mL -

    4.室温5000g离心10分钟收集20mL表达菌液,弃上清,沉淀(约100mg)放冰上待用或放-80℃保存。最好用不加诱导物的菌液做对照样。
    5.如果用本产品A型:加入1mL冰浴的结合液(1mL菌液需要用50μL结合液),再加入25μL PMSF(10mg/mL)溶液,冰上超声裂解菌体直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。超声参数需根据仪器型号自行摸索,但裂解物必须不粘稠,否则会堵塞层析柱。如果用本产品B型:加入1mL冰浴的含溶菌酶的结合液(先取20mL结合液,加入所有30mg溶菌酶干粉,溶解后分装成1mL/管,剩余的-20℃放置),再加入25μL PMSF(10mg/mL)溶液和1μL Benzonase,冰上放置30分钟。
    6.4℃下13000-15000g离心10分钟,去除残留细胞和细胞碎片以防堵柱,收集上清,留样做SDS-PAGE电泳对照。如果要纯化裂解液中可溶部分的His标记蛋白,则直接进入第7步;如果要纯化裂解液中包涵体(沉淀部分)中的His标记蛋白,则直接进入第12步。

    A、纯化细胞裂解液中可溶部分的His标记蛋白
    7.将上步得到的上清液上柱,让重力使裂解液自然流出。如要提高His标记蛋白与介质的结合效率,可用试剂盒提供的红盖将层析柱下的漏液口堵上,让细菌裂解液和介质在4℃结合30分钟或过夜。
    8.用10倍柱体积结合液洗柱(配方见上表),收集并保存穿透液(含杂质或没被吸附的His标记蛋白,可做SDS-PAGE电泳的对照)。
    9.如果用一步式洗脱法(适合已经找到最佳咪唑浓度的情况),则直接用适量的新鲜配制的洗脱液洗柱,收集并保存穿透液(含His标记蛋白)。洗脱液的配方如下(以1mL体积和最佳咪唑浓度是500mM为例):
    成分 用量 在洗脱液中的浓度
    1M Tri-HCl(pH7.9) 20μL 20mM
    1M咪唑溶液 500μL 500mM
    5M NaCl溶液 100μL 500mM
    自备去离子水 380μL -

    10.如果用多步式洗脱(适合不知道最佳咪唑浓度或一步式洗脱杂质多的情况),则按上表配制一系列咪唑浓度不同(如40、60、100、200、300和500mM),其他成分浓度不变的洗液,按从低到高的顺序洗涤并收集样品,SDS-PAGE电泳检测His标记蛋白所在的区域。
    11.洗脱后,依次使用10倍柱体积的去离子水洗涤柱子,再用3倍柱体积的20%乙醇平衡(乙醇要将填料浸没),最后堵住层析柱下端的漏口,4℃保存待下次使用。

    B、纯化包涵体中His标记蛋白
    12.将第6步离心得到的包涵体沉淀重悬于1-3mL含盐*(代"酸")胍结合液中或1-3mL含尿素结合液中(建议优先使用尿素做变性剂,因为得到的洗脱液可以直接跑SDS-PAGE,而用盐*(代"酸")胍的洗脱液需先除盐后才能电泳)。冰浴1小时以使包涵体溶解,期间可轻柔摇晃几次。含变性剂的结合液配方如下(以10mL为例):
    成分 含盐*(代"酸")胍结合液 含尿素结合液
    1M Tri-HCl(pH7.9) 200μL 200μL
    5M NaCl溶液 1mL 1mL
    盐*(代"酸")胍(MW=95.6) 5.7g
    尿素(MW=60.1) 4.8g
    自备去离子水 加水到10mL 加水到10mL

    13.室温10000×g离心20分钟,沉淀为未溶解的包涵体。将上清(含溶解后的His标记蛋白)以自备的0.45μm滤膜过滤。
    14.将滤过液上柱,后续纯化步骤同第7-第11步。只是所用结合液和洗脱液均含变性剂,含变性剂的洗脱液配方见下表(以1mL为例):
    成分 含盐*(代"酸")胍洗脱液 含尿素洗脱液
    1M Tri-HCl(pH7.9) 20μL 20μL
    1M咪唑溶液 500μL 500μL
    5M NaCl溶液 100μL 100μL
    盐*(代"酸")胍(MW=95.6) 0.57g
    尿素(MW=60.1) 0.48g
    自备去离子水 补水到1mL 补水到1mL


    注意事项:整个实验需避免含巯基乙醇、DTT和EDTA等成分。若洗脱液不能将His标记蛋白洗脱下来,可改用pH6.5- 4.5的pH递减的Tris-HCl洗脱。


    北京冷启动核酸酶厂家价格关键词:BTN130824,Cold-active Nuclease,冷启动核酸酶

    PY02-428  假单胞P琼脂  250克  
    胸腺嘧啶 Myokinase 65-71-4
    ARB11187 人孤腓肽(OFQ/N)酶标法分析 Human orphanin fq/nociceptin,ofq/n ELISA KIT
    27025-41-8 L-谷胱甘肽(氧化型)/氧化型谷胱甘肽
    ARB12968 小鼠肌红蛋白(MYO/MB)检测服务 Mouse myoglobin,myo/mb ELISA KIT
    H0801 绵羊血浆(去红细胞、无菌过滤) 100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶
    BL0875 羊抗BSA免疫血清
    9032-75-1 Snailase  蜗牛酶
    2×Pfu PCR MasterMix 
    L-精*酸 Pepsin(porcine stomach mucose) 74-79-3
    F010102 小鼠抗乙肝e抗原抗体 Monoclonal Mouse Anti-HBeAg
    BTN120676 Southern封堵液(NC专用) Southern Blocking Buffer(NC)
    CYB163066 BSA-FITC
    9041-35-4 Sephadex G-25 medium(葡聚糖凝胶G-25)
    ARB11921 人髓鞘碱性蛋白抗体(MBP)Elisa分析 Human myelin basic protein autoantibody,mbp ELISA KIT
    121714-22-5 Fluo-3,AM(*离子探针)
    北京冷启动核酸酶厂家价格关键词:BTN130824,Cold-active Nuclease,冷启动核酸酶


    ·dTTP溶液,100mM
    编号:BTN120617
    英文名称:dTTP Solution,100mM
    规格:0.5mL
    本产品纯度在98%以上(HPLC检测),不含DNA内切酶、DNA外切酶、RNA酶和磷酸酶的污染,可以直接用于PCR、RT-PCR、cDNA合成、DNA测序、DNA探针标记等反应。

    dTTP分子式为C10H14N2O14P3Na3,分子量是548.1,消光系数为:9.6×103M-1×cm-1(pH7.0)。λmax为267nm。

    储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。

    ·Southern级血液DNA提取试剂盒
    编号:BTN130931
    英文名称:Blood DNA extraction kit(Southern Grade)
    规格:10次
    本产品纯度在98%以上(HPLC检测),不含DNA内切酶、DNA外切酶、RNA酶和磷酸酶的污染,可以直接用于PCR、RT-PCR、cDNA合成、DNA测序、DNA探针标记等反应。

    dTTP分子式为C10H14N2O14P3Na3,分子量是548.1,消光系数为:9.6×103M-1×cm-1(pH7.0)。λmax为267nm。

    储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。

    ·酸酚-*仿-异戊醇混合液(RNA提取用)
    编号:BTN100805C
    英文名称:Blood DNA extraction kit(Southern Grade)
    规格:250mL
    本产品纯度在98%以上(HPLC检测),不含DNA内切酶、DNA外切酶、RNA酶和磷酸酶的污染,可以直接用于PCR、RT-PCR、cDNA合成、DNA测序、DNA探针标记等反应。

    dTTP分子式为C10H14N2O14P3Na3,分子量是548.1,消光系数为:9.6×103M-1×cm-1(pH7.0)。λmax为267nm。

    储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。

    ·5-*-4-*-3-吲哚磷酸(BCIP)
    编号:BTN100831
    英文名称:5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl Phosphate
    规格:100mg
    BCIP分子式为C8H4BrClNO4P·C7H9N,分子量为433.64,CAS号为6578-06-9。本产品为白色结晶,溶解度为20mg/mL。在碱性磷酸酯酶的催化下,BCIP会被水解产生强反应性的产物,该产物会和NBT发生反应,形成不溶性的深蓝色至蓝紫色的NBT-formazan。NBT/BCIP用于蛋白印迹和免疫组化染色等实验。

    储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。

    ·农杆菌LBA4404化学感受态细胞
    编号:BTN140385
    英文名称:E.coli LBA4404 Chemical Competent Cell
    规格:10×100μL
     本产品为LBA4404农杆菌化学感受态细胞,其具有利福平和链霉素抗性,适用于玉米、烟草等植物的转基因操作,经pCAMBIA2301质粒检测转化效率高达103cfu/μg。

    储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期一年。

    自备试剂:质粒DNA、液氮等

    使用方法:

    转化前准备
    1.冰水浴和37℃水浴。
    2.液氮或干冰/乙醇混合物。
    3.将抗性平板在28℃培养箱中平衡至少15分钟。
    转化方法
    1.取-80℃保存的农杆菌感受态细胞于冰水浴中融化。
    2.无菌条件下,向刚刚融化的感受态细胞悬液中加入需要转化的质粒,每100μL感受态细胞加1ug质粒DNA,轻柔混匀。冰水浴中静置10分钟。
    3.将离心管置于液氮中速冻5分钟(注:也可以用干冰和无水乙醇混合物替代液氮)。
    4.迅速将离心管置于37℃水浴静置中5分钟,不要晃动水面。然后快速转至冰水浴中静置5分钟。
    5.加入800μl无抗生素的2×YT或LB液体培养基,28-30℃振荡培养2~3小时。使菌体复苏,表达抗性。
    6.5000rpm离心1分钟收菌,保留100μL左右上清,轻轻吹打重悬菌体,均匀涂布到含有相应抗生素的LB固体培养基平板上,待平板中的液体完全吸收后,倒置平板,28-30℃培养48-72小时。



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    图标文献和实验
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      。DNA 的一级结构不稳定,会因为水解、非酶甲基化、氧化损伤和酶降解等出现降解。 细胞中存在核酸酶,如果核酸酶处理不干净,残留在纯化的核酸样本中,从而降解靶核酸。微生物如细菌产生的限制性内切酶也会是一个降解 DNA 的因素。有些细菌的 DNA 酶属于热稳定的核酸酶,在扩增中期可水解基因组和引物 DNA。 核酸和引物也因为其不能与 DNA 聚合酶结合而出现不扩增。如蛋白质、多糖、细胞碎片、脂类等对 PCR 的抑制作用,很可能就是通过对 DNA 的物理包裹作用而使其不能与聚合酶接触。 乳胶

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