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- 文献和实验
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- 库存:
820
- 英文名:
Animal Cell Lysis Solution(B)
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温运输、4℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")动物细胞裂解液B(变性) 蛋白质研究,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:动物细胞裂解液B(变性) 蛋白质研究
品牌:百奥莱博
规格:100mL
英文名:Animal Cell Lysis Solution(B)
产地:国产|进口
本产品含有多种细胞裂解成分和蛋白酶抑制成分,可以在非变性或变性条件下迅速裂解组织或培养细胞,使之释放出细胞内蛋白,用于后续实验。
产品特点:
1.快速裂解,多种裂解成分经过精心优化,能快速使细胞裂解。
2. 非变性(BTN80807A)产品能最大程度地保留蛋白天然结构和功能,主要用于免疫沉淀和免疫共沉淀,还可以用于蛋白活性检测(信号传递研究和酶动力学检测)和Western Blot等各种后续实验。
3.变性(BTN80807B)裂解细胞的效率更高,主要用于对抗原空间构型不敏感的免疫共沉淀实验,还可以用于Western Blotting。
4.适用于培养细胞(包括悬浮细胞)和新鲜组织。
储存条件:常温运输、4℃保存,有效期一年。
注意事项:
1. 如果在本产品中额外再加入终浓度为1×的、新鲜配制的蛋白酶抑制剂复合物,可以更有效地抑制蛋白酶活性,防止蛋白降解。
2. 如果用于信号传递研究,最好在本产品中加入终浓度为1×的、新鲜配制的磷酸酶抑制剂复合物。
3. 整个裂解步骤都要在冰浴或4℃操作。本产品和PBS 均需预先冷却。
4. 本产品所含有较高浓度的去垢剂会对Bradford蛋白浓度测定有较大影响,因此只能使用BCA法测定蛋白浓度。
使用方法:
一:处理贴壁的培养细胞
1. 去除贴壁细胞培养液,用冰浴预冷的PBS 洗两遍,去尽残留的PBS。
2. 将培养板放置在冰上待用。
3. 按每106个细胞加入0.1mL 本产品(或100mm 贴壁细胞加1mL 本产品)的比例向培养板中加入适量的本产品(按此比例裂解得到的裂解物的蛋白浓度约在5-10mg/mL 之间)。
注意:裂解效率跟细胞数量和本产品用量的比例密切相关。一般情况下6孔板的单孔(1~2×106细胞)需要0.1~0.2mL本产品;25 cm2培养瓶(3~6×106细胞)需要0.3~0.6mL;75 cm2培养瓶(1~2×107细胞)需要1~2mL。对于特别大或特别小的细胞,需要用户摸索最佳用量。
4. 冰上放置10-30分钟(最佳时间跟细胞系相关),其间偶尔轻轻摇晃或用枪头轻轻吹打。
5. 将细胞培养板倾斜使上清液汇集在一端,并将其全部转移到一个新的1.5mL塑料离心管中。
6. 15000×g,4℃离心10分钟,将上清转移到一个新的1.5mL塑料离心管中,放置在冰上待用或放-80℃长期保存。注意:如果用于免疫沉淀,最好新鲜使用。
7. 用前最好先测定上清液的蛋白浓度,然后再进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。
二:处理悬浮细胞
1. 400×g,4℃离心10分钟收集悬浮细胞,弃上清。
2. 用等体积的预冷PBS 洗涤细胞沉淀两遍,步骤同第一步。
3. 按每106个细胞加入0.1mL 本产品的比例加入本产品,充分悬浮细胞。
4. 冰上放置15分钟裂解细胞,期间偶尔轻柔震荡。
5. 15000×g,4℃离心10分钟,将上清转移到一个新的1.5mL塑料离心管中。为避免吸取到细胞沉淀,最好留20-40μL液体不取。
6. 将上清液放置在冰上待用或放-80℃长期保存。注意:如果用于免疫沉淀,最好新鲜使用。
7. 使用前最好先测定上清液的蛋白浓度,然后再进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。
三:处理组织块
1. 称量组织块,用毛玻片或玻璃匀浆器研磨或匀浆,用5-10倍体积的、预冷的PBS洗两次(包括冲洗器材)。
2. 将匀浆物转移到离心管中,1500g、4℃离心5分钟后弃上清。
3. 按每50mg 组织加入0.2mL 本产品的比例加入预冷的本产品,吹打混匀,放置冰上。
4. 每隔5分钟振荡器轻柔振荡一次,共4次。
5. 15000×g、4℃离心10分钟,将上清转移到一个新的1.5mL塑料离心管中,放置在冰上待用或放-80℃长期保存。注意:如果用于免疫沉淀,最好新鲜使用。
6. 使用前最好先测定上清液的蛋白浓度,然后再进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。
更多有关动物细胞裂解液B(变性) 蛋白质研究的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
L-组*酸甲酯2盐*(代"酸")盐 PEG200 7389-87-9
CYB164028 羊抗鸡IgG(1:500~1000)-HRP
ARB10501 人白细胞介素10(IL-10)elisa测定使用说明书 Human interleukin 10,IL-10 ELISA KIT
PY02-217 肉浸液琼脂 250克
阿利新蓝染色液-A液(pH2.5) 100ml
大豆分离蛋白 Sodium hexametaphoshpate 9010-10-0
F030704 BIOTIN标记小鼠抗HIS抗体 Monoclonal Mouse Anti-His*BIOTIN
Western封闭液 100ml
BTN131152 兔抗鸡IgY,辣根过氧化物酶标记 Rabbit Anti-Chicken IgY,HRP Conjugate
ARB12109 大鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)Elisa分析 Rat soluble cluster of differentiation 86,scd86 ELISA KIT
蛋白酶抑制剂混合物片剂(含EDTA) 1片|10片|20片
ARB14092 人布病(BrucellosIs)酶联免疫定量检测
ARB11838 人凝血因子Ⅶ(FⅦ)elisa检测 Human coagulation factor Ⅶ,fⅦ ELISA KIT
2-甲基吲哚 TMB-PS 95-20-5
PY01-063 甘露醇 100克
6381-92-6 乙二*(代"胺")四乙酸二* EDTA Na2
13718-26-8 偏钒酸*
L0202 小鼠IgM类单克隆抗体腹水纯化试剂盒
柠檬酸*抗原修复液(50×) 100ml
*苄青霉素* Nile Red 69-52-3
动物细胞裂解液B(变性) 蛋白质研究关键词:BTN80807B,动物细胞裂解液B,Animal Cell Lysis Solution(B),变性,动物细胞裂解液B(变性)
·T4 RNA连接酶1
编号:BTN130622
英文名称:T4 RNA Ligase 1
规格:1000U
本酶催化 3´→5´磷酸二酯键的形成,使核苷酸的5´-磷酸末端和3´-羟基末端连接。伴随着ATP水解为AMP和PPi作用底物包括单链RNA、DNA及二核苷焦磷酸。
产品特点:
1.连接单链RNA和DNA
2.用 5´-[³²P] pCp进行 RNA 3´末端标记
3.RNA和DNA分子内及分子间的连接
4.合成单链寡脱氧核苷酸
5.蛋白质中掺入非天然*基酸
6.无单链DNA核酸外切酶、核酸内切酶、RNase以及磷酸酶污染。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1单位指 37℃条件下,30分钟内将1nmol的5´-[³²P] rA16转化成磷酸盐不溶物所需要的酶量。
·Acryl DNA助沉剂
编号:BTN131187
英文名称:Acryl DNApp
规格:1mL
本产品是一种分子生物学级Acryl多聚物溶液,在乙醇沉淀DNA时加入5-10μL,即可明显提高核酸沉淀的得率,更可使痕量DNA的回收率达到95~98%,同时可选择性去除短引物(<30bp)片段和dNTP。
产品特点:
1. 明显提高DNA或RNA沉淀的得率和DNA或RNA提取的产率。
2. 本产品无核酸污染也无DNA酶和RNA酶活性。
3. 痕量DNA和RNA(20pg)回收率达95~98%。
4. 不影响酶切、连接、转录、PCR、转化、转染等实验。
5. 不影响电泳和DNA-蛋白相互作用。
储存条件:低温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. DNA或RNA沉淀回收:
1)在1mL RNA或者DNA溶液中加入4-8μL 本产品,颠倒混匀。
2)按照标准的乙醇沉淀法来沉淀RNA或者DNA,加入3M pH5.2 醋酸*溶液(沉淀RNA时应该使用无RNA酶处理的溶液)到终浓度0.3 摩尔(约1/10 体积),然后加入2倍体积的无水乙醇,混匀后室温或者冰箱放置10-30分钟,12000转离心10分钟,弃上清,70%乙醇漂洗一遍,去上清,晾干沉淀,将沉淀重新溶解于适量DEPC处理水(RNA沉淀)或者其它如TE缓冲液中。
2. DNA或RNA提取:
每毫升总RNA提取试剂TRIzol或者DNA提取试剂DNAzol中加入4-8μL 本产品,然后继续按照这些产品的说明书进行后续步骤。推荐使用我公司生产的动物RNA提取试剂盒(BTN3070)或动物DNA提取试剂盒(BTN3670)。
动物细胞裂解液B(变性) 蛋白质研究关键词:BTN80807B,动物细胞裂解液B,Animal Cell Lysis Solution(B),变性,动物细胞裂解液B(变性)
ARB10890 人抗副流感病毒IgG抗体(Anti-PIV IgG)ELISA代测服务 Human poliomyelitis virus,pv-igG ELISA KIT
BL0626 *甲脒-琼脂糖凝胶4FF Benzamidine Sepharose 4FF
F030502 FITC标记小鼠抗乙肝e抗原抗体 Monoclonal Mouse Anti-HBeAg*FITC
ARB10017 人26S蛋白酶体(26S PSM)检测服务 Human 26s proteasome,26s psm ELISA KIT
L-来苏糖 CHAPS 1949-78-6
ARB12952 小鼠血管内皮生长因子(VEGF)酶标法分析 Mouse vascular endothelial growth factor ELISA KIT
72-19-5 L-Threonine L-苏*酸
人血清白蛋白(组份五) NTA 70024-90-7
PY02-364 石蕊牛奶培养基 250克
ARB12945 小鼠血红素氧合酶2(HO-2)elisa检测操作说明书 Mouse heme oxygenase 2,ho-2 ELISA KIT
ARB10077 人CD4分子(CD4)ELISA代测服务 Human cluster of differentiation,cd4 ELISA KIT
107-43-7 Betaine 甜菜碱
BTN60603 即用型蓝白T载体A型(T7-SP6,有MCS) Instant Blue-White Vector T,Type A
BTN131039 即用型EMSA试剂盒 EMSA Kit
Spinner盐溶液(无酚红) 1×|10× 500ml
632-99-5 碱性品红 Magenta Red
BTN100826 穿刺培养基 Stab Medium
BTN131222 咪唑溶液 Imidozol Solution
D-正缬*酸 Chitodextrinase 2013-12-9
ARB11530 人脑啡肽(ENK)Elisa分析 Human enkephalin,enk ELISA KIT
我公司正在火爆促销蛋白质研究系列产品,欢迎您的垂询选购动物细胞裂解液B(变性) 蛋白质研究。
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文献和实验比活性的探针经短时间的曝 光就可看到。 b.用探针检测PCR 扩增产物的另一方法如下:克隆的靶序列经不对称PCR 扩增,合 成一单链探针,在5'末端标记。其中一个引物的量大大超过另一引物,主要产生单链 产物。单链探针形成之后,它能与待测的变性PCR 扩增DNA 退火。在退火反应中,我们 建议用过量的靶序列,使得所有的探针与靶DNA 结合。使用该方法已得到满意的结 果。需要注意的是,当野生型单链DNA 探针与突变的DNA 链退火互补时,该方法导致形 成单个碱基错配的异源双螺旋链
关于论坛中所有Native PAGE/非变性电泳及蛋白回收的经典总结
5倍体积的浸提液,4 ℃过夜,期间振摇3~4次。5. 第二天,4 ℃,10000 r/m离心10 min,留取上清。6. 使用透析袋,在相应的缓冲液中,4 ℃透析24—48小时7. 进行SDS-PAGE电泳鉴定和蛋白含量测定。注意事项:(切记!)回收前蛋白若为包涵体形式,回收后透析时透析液应加相应变性剂,以免沉淀。将胶在1mM DTT,20mM MgCl2种浸泡4h或过夜,将目的条带切下,置透析带中,电泳,然后收集上清液即为目的蛋白。Native PAGENative PAGE 分离碱性蛋白,要用
, SUPERase.in, RIP 等几个知名品牌的 RNA 酶抑制剂都属于这个类型。Prime RNase Inhibitor 是一种全新的非人源的 RNase 抑制剂,和HPRI 一样,能够非共价结合并抑制 RNases A, B, C 类的 RNA 酶活性而不影响RNases T1, T2, H, U1, U2 和 CL3 的活性,因而不会干扰cDNA合成,SP6/ T7, Hela细胞提取物系统的RNA 体外转录,以及在兔网织红细胞裂解液或者是麦胚提取物中进行的体外翻译。应用范围:1.体外转录2.体外
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