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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
228
- 英文名:
Southern DNA Marker DL2000(Labeled by DIG)
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
冷藏
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京Southern DNA Marker DL2000(DIG标记)哪里卖的品牌:百奥莱博,是优质的核酸电泳和回收产品,用于生化科学研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多Southern DNA Marker DL2000(DIG标记)等核酸电泳和回收产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:北京Southern DNA Marker DL2000(DIG标记)哪里卖
英文名:Southern DNA Marker DL2000(Labeled by DIG)
规格:20次
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
更多有关北京Southern DNA Marker DL2000(DIG标记)哪里卖的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·即用型易错PCR试剂盒
编号:BTN101005
英文名称:Instant Error-Prone PCR Kit
规格:100次
本产品就是专门为广大的研究工作者进行易错PCR而开发。易错PCR是利用Taq DNA多聚酶不具有3´→5´校对功能的特性,在一定条件下(如不同的dNTP浓度、Mg浓度和MnCl2存在)能够按较高的机率引入随机引入突变。如果有适当的选择方法,则可从构建的突变库选出所需突变体。
产品特点:
1. 即开即用,十分简单方便,尤其在生物制药和酶学研究领域显示出了它的优越性。
2. 配方经过精心优化,突变率稳定,突变没有趋向性。易错PCR的突变率为0.66%(±0.13%),详见使用手册疑难解答。
3. 比体内基因突变更快捷简单,但如果在PCR引物中设计位点,则可使产物克隆到表达载体,也可以用于体内蛋白活性的筛选。
4.可用于连续易错PCR,只需把上一次易错PCR的产物用作下一次易错PCR的模板即可,使每一次获得的小突变累积而产生重要的有益突变。
5. 只适用于扩增1kb以下的产物,对于1kb以上的产物,建议分段扩增。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| Taq DNA聚合酶(5U/μL) | 100μl |
| 易错PCR Mix,10× | 300μl |
| 易错PCR专用dNTP,10× | 300μl |
| MnCl2,5mM | 300μl |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期为一年。
使用方法:
1.以30μL的标准PCR反应体系为例,如果反应体系不是30μL,各成分需要等按比例增加或减少。在一干净的PCR管中,加入下列成分:
| 易错PCR Mix,10× | 3μl |
| 易错PCR 专用dNTP,10× | 3μl |
| MnCl2,5mM | 3μl |
| 自备DNA模板(10ng/μL) | 1μl |
| PCR引物(自备,10μm each) | 10pmol each |
| Taq DNA聚合酶(5U/μL) | 1-5U |
| 补水到 | 30μl |
2. 按已经优化的PCR条件进行一定循环数的PCR(循环数与突变率的关系见下表),然后取5μL电泳检查。如果没有优化的PCR条件,一般可以先尝试下面的PCR条件:
| PCR前变性 | 94℃ 3分钟 | |
| 易错PCR | 94℃ 1分钟 | 循环30次(见注) |
| 45℃ 1分钟 | ||
| 72℃ 1分钟 |
注:易错PCR一般不需要热启动,也不需要在PCR结束后做延伸处理。
循环次数与突变几率的关系
易错PCR循环次数决定每个核苷酸位置的突变几率,进而决定每个PCR产物可能得突变位点数,所以所需循环数由客户根据需要改动。
| PCR循环数 | 每个碱基突变几率 | PCR终产物中的突变位点数 | ||||
| 100bp | 200bp | 400bp | 800bp | 1600bp | ||
| 5 | 0.0033 | 0.00 | 0.66 | 1.3 | 2.6 | 5.3 |
| 10 | 0.0066 | 0.66 | 1.3 | 2.6 | 5.3 | 11 |
| 20 | 0.013 | 1.3 | 2.6 | 5.3 | 11 | 21 |
| 30 | 0.020 | 2.0 | 4.0 | 7.9 | 16 | 32 |
| 50 | 0.033 | 3.3 | 6.6 | 13 | 26 | 53 |
3.电泳检测是否得到预计长度的PCR产物。
疑难解答:
Q:易错PCR与定点突变PCR有什么区别?
A:定点突变是指通过聚合酶链式反应(PCR)等方法向目的DNA片段(可以是基因组,也可以是质粒)中引入所需变化(通常是表征有利方向的变化),包括碱基的添加、删除、点突变等。它需要预先知道靶基因的序列。易错PCR是一种随机突变,它不需要预先知道靶基因的序列(引物结合部分除外),但需要后续的筛选方法筛选自己所需要的突变。
Q:易错PCR的错误率是多少?
A:易错PCR的突变率为0.66%(±0.13%),对500bp的PCR产物,相当于有4%的PCR片段为野生型,12%的含一个突变,20%的含两个突变,22%的含三个突变,18%的含四个突变,12%的含五个突变,12%的含六个或更多突变。
Q:如果需要每个核苷酸有高于0.66%的突变率,如何办?
A:可以使用连续多次易错PCR来提高突变率。但最好先用胶纯化回收PCR片段,再用于下一轮PCR。此外不能用少于千分之一的第一次PCR产物作为第二轮易错PCR的模板,否则多样性将受到影响。第三轮易错PCR最好使用所有第二轮的PCR产物作为模板,但需要在10mL体系中完成(可以分成很多100μL体系进行)。
北京Southern DNA Marker DL2000(DIG标记)哪里卖关键词:Southern DNA Marker DL2000(Labeled by DIG),BTN120654D,Southern DNA Marker DL2000(DIG标记)
·dGTP溶液(100mM)
编号:BTN120619
英文名称:dGTP Solution(100mM)
规格:0.5mL
本产品纯度在98%以上(HPLC检测),不含DNA内切酶、DNA外切酶、RNA酶和磷酸酶的污染,可以直接用于PCR、RT-PCR、cDNA合成、DNA测序、DNA探针标记等反应。
dGTP分子式为C10H13N5O13P3Na3,分子量是507.2,消光系数为13.7×103 M-1×cm-1(pH7.0)。λmax为253nm。
储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。
·即用型LB平板培养基(含Tet)
编号:BTN130848D
英文名称:LB Petri Dish(Tet)
规格:10块
本产品为即用型LB平板培养基,A型为无抗生素LB平板,B型为LB-Amp平板,C型为LB-Kan平板,LB-Tet平板。
储存条件:低温运输及保存,有效期半年。
·单细胞悬浮液
编号:BTN130805
英文名称:Single Cell Suspension Solution
规格:1mL
本产品是单细胞悬浮溶液,本产品与后续各种单细胞分析实验、单细胞扩增实验兼容。
储存条件:低温运输,4℃保存,有效期一年。
·dNTP溶液(100mM)
编号:BTN51208C
英文名称:dNTP Solution,100mM
规格:0.5mL
本产品是dATP、dTTP、dGTP、dCTP四种核苷酸的混合液,每种核苷酸的浓度为100mM,纯度在98%以上(HPLC检测),不含DNA内切酶、DNA外切酶、RNA酶和磷酸酶的污染,可以直接用于PCR、RT-PCR、cDNA合成、DNA测序、DNA探针标记等反应。使用浓度根据具体的反应决定,请参考相关手册。
储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。
DNA为何使用2"-脱氧核糖和胸腺嘧啶?
DNA为何不选择现成的光合作用产物核糖和合成RNA的原料尿嘧啶(uracil)分别作为其糖分子和碱基,而去选择需要额外的合成步骤才能得到的2"-脱氧核糖和胸腺嘧啶(thymine),其原因何在呢?目前的主流观点是:DNA不能选择核糖的原因之一是由于核糖2"位置上的OH基团会使得到的双螺旋骨架结构不均匀、不平行,难以有效地折叠进染色体结构中,而使用2"-脱氧核糖则能得到均匀平行的双螺旋结构;原因之二是核糖2"位置上的OH基团会对邻近的磷酸二酯键进行分子内亲核攻击,降低分子的稳定性,而对遗传物质来说稳定性十分重要,所以DNA选择了失去分子内亲核攻击能力的2"-脱氧核糖。对信使分子而言,稳定性并不重要,所以RNA仍然使用核糖。
DNA使用胸腺嘧啶的原因是DNA中的胞嘧啶(cytosine)会缓慢水解变成尿嘧啶,如果尿嘧啶也是DNA的正常组成成份,则DNA修复系统就不能区分哪些尿嘧啶是正常的,哪些是需要修复的。使用胸腺嘧啶(比尿嘧啶分子多一个甲基)不但能保持跟尿嘧啶一样的形成碱基对的能力,同时又能跟尿嘧啶区别开来,使DNA分子中出现的任何尿嘧啶都能被尿嘧啶DNA糖苷酶(uracil-DNA glycosylase)发现和修复。
北京Southern DNA Marker DL2000(DIG标记)哪里卖关键词:Southern DNA Marker DL2000(Labeled by DIG),BTN120654D,Southern DNA Marker DL2000(DIG标记)
F020235 兔抗人γ链抗体 Rabbit Anti-Human IgG (γ chain)
PY04-094 两性霉素B 0.2mg/支×10支 每支添加于100ml 改良CCDA琼脂培养基基础中,用于弯曲杆菌的选择性分离培养
*化硝基四氮唑蓝 Dimedone 298-83-*(代"9")
对*基*酚 Thiazole Orange 92-69-3
BL1392 SABC山羊IgG-AP kit
ARB12673 大鼠雌激素(E)血清中含量检测 Rat estrogen,e ELISA KIT
番红O染色液 1%|0.5%|0.1% 100ml
868272-85-9 3,3-二*基联*(代"*")*(代"胺") 4HCL DAB-4HCL
ARB10768 人抗Q热抗体(Anti-Q-Ab)酶免分析 Human anti-q fever antibody,anti-q-ab ELISA KIT
λ DNA/HindIII(125-23130bp) 100次
曲拉通x-405 Tetracycline HC1 92046-34-9
α-硫代甘油 Toluidine blue O 96-27-5
ARB12743 小鼠Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)酶联免疫定量检测 Mouse collagen type Ⅳ,col Ⅳ ELISA KIT
BL0869 羊抗大鼠免疫血清 0.5ml
HC0339 雷勃大容量电动移液器
9000-90-2 α-淀粉酶
L0102 小鼠单抗ig类/亚类鉴定用酶标二抗即用套装
Fmoc-D-天冬酰胺 3-Phenylpropanoic acid 108321-39-7
RNA保存液 5ml|10ml|50ml
ARB13971 猪胰岛素样生长因子结合蛋白-I(IGFBP-I)血清中含量检测 Porcine igfbp-iELISA KIT
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