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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
827
- 英文名:
Maximov Fixative Solution
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应BTN131288型Maximov固定液北京厂家,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:BTN131288型Maximov固定液北京厂家
编号:BTN131288
品牌:百奥莱博
英文名:Maximov Fixative Solution
本固定液主要成分为*化汞、重铬酸*、甲醛。与Zenker固定液相比,本产品不含铬酸,所以重铬酸*未被酸化,因此,对细胞浆固定较好。甲醛有促染胞浆的作用,增加对酸性染料的亲和力。
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
欲咨询购买BTN131288型Maximov固定液北京厂家,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
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BTN131288型Maximov固定液北京厂家关键词:Maximov固定液,Maximov Fixative Solution,BTN131288
·硫*(代"酸")葡聚糖
编号:BTN120643
英文名称:Dextran Sulfate
规格:1g
硫*(代"酸")葡聚糖是一种广泛用于较长双链探针杂交的促进剂。它是一种多聚胺,平均分子量为500000。在某些条件下5%~10%硫*(代"酸")葡聚糖效果较好,若用5%~10%PEG则可产生很高的本底。因此,使用促进剂时有必要优化条件。

储存条件:常温运输和保存、有效期一年。
·改良Lowry法蛋白定量试剂盒
编号:BTN101102
英文名称:Enhanced Lowry Assay Kit
规格:1000次
Folin酚试剂(磷钼酸和磷钨酸混合物)跟蛋白质中含酚*基酸(色*酸和酪*酸)发生颜色反应,可用于测定蛋白质浓度,但灵敏度较低。Lowry在此基础上加入Biuret(双缩脲)反应步骤,即先在碱性条件下使蛋白质和Cu+形成复合物,再使其与Folin酚试剂发生显色反应,产物在750nm检测。
Lowry法使不含酚的蛋白质也能被检测出来,灵敏度是单独使用Folin酚的10倍左右,是双缩脲反应的200倍,因此成为早期检测蛋白浓度的主要方法。传统Lowry法受到很多常用的试剂(如DTT、糖、甘油、Triton等)干扰,步骤繁琐。本公司对Lowry法进行改良。
Lowry检测原理图如下:

产品特点:
1.即开即用,不需要单独购买每个成分再配制。
2.能抵抗部分干扰物(如一定浓度SDS或其他去污剂)的干扰。
3.检测线性范围广,在2-100μg,检测上限比经典Lowry法高30%-40%。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A成分一 | 208ml |
| 溶液A成分二 | 16ml |
| 溶液A成分三 | 16ml |
| 溶液B | 80ml |
| 溶液C | 80ml |
| 福林酚 | 10mL(用100mL 棕色瓶) |
| BSA标准品(2mg/mL in水) | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存(但BSA 标准品需要-20℃保存),有效期一年。
使用方法:
一、准备工作
1.制备溶液A:将16mL溶液A成分二和16mL溶液A成分三加入到装溶液A成分一的塑料瓶中,混合均匀得到240mL溶液A。注意:溶液A各成分分开提供更加稳定。
2.制备 Lowry工作液:将溶液A、溶液B和溶液C按3:1:1的体积比混合得到Lowry工作液。此工作液可以室温放置2-3周,所以最好用多少配多少。如果发现溶液B或溶液C有沉淀,需37℃溶解并摇匀后再使用。
3.制备福林酚工作液:在装有10mL 福林酚的棕色塑料瓶中加入90mL 去离子水,摇晃混匀待用。此工作液在避光条件下可以放置6个月。
二、试管法
4.先用去离子水将BSA 标准(2mg/mL)稀释到50μg/mL,然后在标记的试管中加入下列成分(单位:μL)。注意:每个样品最好做三个稀释度,每个稀释度最好设置三次重复,阴性对照和标准品也最好做三次重复。
| 标准品(每个做三次重复,此处只列出一个) | |||
| 编号 | BSA 标准(50μg/mL) | 水 | 总体积 |
| 阴性对照 | 0 | 0 | 200 |
| 1 | 0 | 200 | 200 |
| 2 | 25 | 175 | 200 |
| 3 | 50 | 150 | 200 |
| 4 | 100 | 100 | 200 |
| 5 | 150 | 50 | 200 |
| 6 | 200 | 0 | 200 |
| 样品(以1个样品、3个稀释度为例,每个稀释度三个重复,此处只列出一个) | ||
| 编号 | 样品 | 总体积 |
| 1 | 200(稀释度1) | 200 |
| 阴性对照1 | 200(用稀释度1稀释的溶解蛋白样品的缓冲液) | 200 |
| 2 | 200(稀释度2) | 200 |
| 阴性对照2 | 200(用稀释度2稀释的溶解蛋白样品的缓冲液) | 200 |
| 3 | 200(稀释度3) | 200 |
| 阴性对照3 | 200(用稀释度3稀释的溶解蛋白样品的缓冲液) | 200 |
5.每管中加入200μl Lowry工作液,振荡混匀后室温反应10分钟。
6.每管中加入100μl 福林酚工作液,振荡混匀后室温反应30分钟。
7.用容量为0.5mL、光径为1 cm的玻璃比色杯或聚*乙*(代"烯")比色杯测定750nm的光吸收。测定时,先空白(即阴性对照)后样品,测定样品和BSA标准品时,先低浓度后高浓度。测定未知样品前需要将杯子清洗干净,必要时可以用甲醇清洗吸附到比色杯壁上的染料。
8.根据标准品三个重复的平均值绘制标准曲线,然后根据未知样品的光吸收从标准曲线中查得其对应的浓度。
三、96微孔板法
9.同上,只是反应用96 微孔板设置,用酶标测试仪750nm 测定光吸收。
四、样品中干扰物质的去除(本产品不含相关产品,如果样品中有干扰Lowry法蛋白定量的物质(见附表),可另购本公司的微量蛋白质沉淀试剂盒(BTN81217)去除,也可以用自备试剂按下法去除:用水将样品调到体积为200μl,加入20μl 0.15%去氧胆酸*,混匀,室温放置10分钟。加入20μL 72%的TCA,室温放置5分钟。3000 g离心15分钟,小心去除上清。用200μl水溶解蛋白沉淀后以用于Lowry法测定。
附:常见Lowry法蛋白定量干扰物(低于所列浓度不干扰,高于所列浓度则会干扰,需要按上法去除。不能含任何浓度的DTE,DTT和硫*(代"酸")胺)。
| 干扰物 | 浓度 | 干扰物 | 浓度 |
| Acetone | 10% | 2-Mercaptoethanol | 1mM |
| Aprotinin | 10mg/mL | NaCl | 1 M |
| CHAPS | 0.05% | NaOH | 100mM |
| DMF | 10% | NaPi | 100mM |
| DMSO | 10% | NP40 | 0.02% |
| EDTA | 1mM | PMSF | 1mM |
| EGTA | 1mM | SDS | 1% |
| Ethanol | 10% | Sodium Citrate | 100mM |
| Glucose | 100mM | Sucrose | 7% |
| Glycin | 100mM | Tris | 10mM |
| HEPES | 1mM | Trition X-100 | 0.03% |
| Imidazole | 25mM | Tween 20 | 0.05% |
| Methanol | 10% | Urea | 3M |
疑难解答:
1. 该方法检测的蛋白质浓度范围1μg~50μg/ml。
2. 由于Lowry法测定的是蛋白质中酪*酸残基,对于那些酪*酸残基数高于或低于BSA,其测定的蛋白质含量将偏低或偏高。如果遇到该情况,需要采用BCA或Bradford法测定。
3. 阅读测定方法后化学试剂对测定方法的影响。
BTN131288型Maximov固定液北京厂家关键词:Maximov固定液,Maximov Fixative Solution,BTN131288
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