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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
991
- 英文名:
CTP Solution,2.5mM
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输,-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应北京现货CTP溶液(2.5mM)哪里买,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京现货CTP溶液(2.5mM)哪里买
规格:2mL
品牌:百奥莱博
英文名:CTP Solution,2.5mM
产地:国产|进口
GTP分子式为C9H13N3O14P3Na3 ,分子量是549.1,消光系数为9.0×103M -1×cm-1(pH7.0),λmax为271nm。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
更多有关北京现货CTP溶液(2.5mM)哪里买的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·EDTA溶液(RNase-Free)(0.5M,pH8.0)
编号:BTN60308
规格:250mL
·T4 RNA连接酶2(截短型)
编号:BTN130856
英文名称:T4 RNA Ligase 2(truncated)
规格:2000U
T4 RNA连接酶2(截短型),又称T4 RNL2截短型,可特异性地将DNA或RNA的预腺苷酰化5´末端连接到RNA 3´末端。该酶连接时不需要ATP,但需要预腺苷酰化底物。该酶的表达来自E.coli质粒,该质粒编码T4 RNA连接酶2基因的前249个*基酸。与全长的T4 RNA连接酶2不同,T4 RNL2截短型不能将底物的5´末端腺苷酰化,因此无法将RNA或DNA的5´磷酸末端连接到RNA 3´端。该酶可用于microRNA克隆中接头连接的优化,因为此酶只能利用腺苷酰化的引物,因此,可以降低连接背景。其结构式如下图:

产品用途:
1.将5´预腺苷化的DNA或RNA连接到任何 RNA 3´末端;
2.将单链腺苷化引物连接至小RNA上,用于cDNA克隆文库构建;
3.将单链腺苷化引物连接至RNA上,用于链特异cDNA文库构建;
4.无单链和双链DNA核酸外切酶、核酸内切酶、RNase以及磷酸酶的污染。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
北京现货CTP溶液(2.5mM)哪里买关键词:CTP Solution,2.5mM,CTP溶液(2.5mM),BTN131219
·5´RACE试剂盒
编号:BTN101105
英文名称:5´-RACE Kit
规格:10次
研究真核基因的最基础的工作之一就是确定其转录终止位点,目前最通用的方法是5´-RACE法,RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)是Frohman发明的、通过PCR快速克隆cDNA末端的技术,它在不建立cDNA文库的前提下,利用已知cDNA序列设计引物,通过往两端延伸和扩增获得其5´-端序列。本试剂盒就是根据5´-RACE原理而开发。RACE的原理如下图:

产品特点:
1. 即开即用,客户不需要单独准备各种材料。
2.反应条件经过精心优化,包括使用无RNase H活性的MMLV和优化的引物。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| MMLV逆转录酶-RI混合液(RNase H-,200U/μL) | 10μl |
| MMLV Buffer-dNTP混合液 | 60μl |
| 微量核酸沉淀剂 | 400μl |
| TdT(末端转移酶) | 10μl |
| 2×TdT Buffer(含dATP) | 100μl |
| PCR MagicMix 3.0 | 1.5ml |
| 5´-RACE引物A-引物B混合液 | 100μl |
| 5´-RACE引物C | 100μl |
| RNase-Free水 | 1ml |
储存条件:低温运输、-20℃保存、有效期一年。
使用方法:
1.变性模板RNA:将1μg mRNA或5μg总RNA加入到一个RNase-free的PCR管中,补RNase-Free水到9μL,65℃保温5分钟后短暂离心,立即放冰上待用。如果RNA浓度偏低,体积超过9μl,可以使用本公司的核酸浓缩剂(需另购,产品编号为BTN110801)浓缩到所需的体积。
2. 设置RT反应(用户可以根据需要设阴性对照):在上步的含变性后的RNA模板的PCR管中,按顺序加入:
| 成分 | 用量 |
| 自备的基因专一性引物A(10μM) | 4μl |
| MMLV Buffer-dNTP混合液 | 6μl |
| MMLV逆转录酶-RI混合液 | 1μl |
| 合计 | 20μl |
3. 37℃保温60分钟,42℃保温30分钟,50℃保温10分钟,最后75℃保温10分钟使逆转录酶变性。
4. 短暂离心5秒后待用。
5.在PCR管中加入40μl微量核酸沉淀剂(本产品含不溶的核酸助沉剂,用前需要充分摇匀再取用),震荡混匀。
6.室温12000rpm离心15分钟,小心吸弃上清。
7. 加入1mL自备75%乙醇,室温12000rpm离心5分钟,小心吸弃上清。
8. 短暂离心数秒,小心吸弃残留液体后,稍微晾干后加入10μL RNase-free水,充分吹打溶解,得到cDNA溶液。注意:为保证加尾效率,溶解cDNA的RNase-free水最好不要超过10μl。
9. 加尾反应:在10μL cDNA溶液中加10μL 2×TdT Buffer(含dATP)和1μL TdT酶,轻柔吹打混匀。
10. 37℃保温15分钟进行加尾反应,然后75℃保温3分钟灭活末端转移酶。
11. 加入0.5mL RNase-free水稀释加尾反应体系。此稀释液将作为PCR的模板。
12. 第一轮PCR:用不同量的稀释后的加尾反应液设置PCR反应(样品组最好设用量梯度,单位:μL)。
| 成分 | 梯度1 | 梯度2 | 梯度3 | 梯度4 |
| PCR MagicMix 3.0 | 25 | 25 | 25 | 25 |
| 自备基因专一性引物B(10μM) | 2.5 | 2.5 | 2.5 | 2.5 |
| 5´RACE引物 A-引物B混合液 | 2.5 | 2.5 | 2.5 | 2.5 |
| 稀释后的加尾反应液 | 1 | 5 | 10 | 15 |
| RNase-free 水 | 19 | 15 | 10 | 5 |
| 合计 | 50 | 50 | 50 | 50 |
13. 按下列条件进行 PCR(注:应根据实际情况选择适当的退火温度)。
第1次循环:94℃ 5分,48-52℃ 2分,72℃ 4分
第2-30次循环:94℃ 40秒,52-60℃ 1分,72℃ 3分
最后延伸:72℃ 15分
14. 取10-20μL PCR产物进行琼脂糖电泳电泳检查PCR结果,如果一条清晰的条带,则可以不做后续的第二轮PCR,而直接进行 DNA 测序或TA克隆。
15. 第二轮PCR:如果第一轮PCR没有一条清晰的条,则带从4管PCR产物中各取1μL分别加入到20μL RNase-free水中进行稀释,然后各取1μL分别作为4管第二轮PCR的模板:
| 成分 | 用量 |
| 第一轮 PCR产物的稀释液 | 1μl |
| PCR MagicMix 3.0 | 25μl |
| 5´RACE引物 C | 2.5μl |
| 自备基因专一性引物 C(10μm) | 2.5μl |
| RNase-free 水 | 补水至50μl |
| 合计 | 50μl |
16. 按下列条件进行 PCR:第 1-30次循环(94℃ 40秒,52-60℃ 1 分,72℃ 3分),最后延伸:72℃ 15分
17. 取10-20μL第二轮 PCR产物进行琼脂糖电泳,一般都会有一个样品有清晰的条带出现,则可以直接进行DNA测序或TA克隆。
北京现货CTP溶液(2.5mM)哪里买关键词:CTP Solution,2.5mM,CTP溶液(2.5mM),BTN131219
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