北京现货蓝色DNA上样液(6×,非甘油)批发

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百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货蓝色DNA上样液(6×,非甘油)批发，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京现货蓝色DNA上样液(6×,非甘油)批发
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
编号：BTN130958B
英文名：DNA Loading Buffer(Blue)

北京现货蓝色DNA上样液(6×,非甘油)批发极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·甲基化PCR试剂盒2.0
编号：BTN130428
英文名称：Methylation-Specific PCR Kit 2.0
规格：150次
亚硫*(代"酸")*盐修饰DNA时要求DNA必须在单链状态，反应还必须在低温进行，常规的修饰试剂盒由于是在液相进行，要在低温下让DNA 不相互复性而保持单链状态非常棘手，所以常规修饰试剂盒的修饰效率一般都不高。此外，常规方法要切换反应液，有多次沉淀步骤，使得DNA的回收率一般都不超过50%。为克服这些缺点，本公司开发出了此升级产品。


产品特点：
1．用包埋的样品进行所有操作，免去所有沉淀和纯化步骤，极大简化了操作。
2．免去了DNA提取过程，所需实验材料比常规方法更少，最少几个细胞都可以，极大地节约了宝贵材料，尤其适用于珍稀材料。
3．包埋处理后，DNA在整个操作过程中都处于最适于修饰的单链状态，极大提高了修饰效率。
4．DNA 包埋于包埋块中，切换反应液非常方便，而且DNA 不会丢失，所以最终回收率都在90%以上。
5．适用于实体材料、悬浮细胞和纯化好的DNA样品。
6．本试剂盒提供的甲基化修饰试剂盒足够制备150多个10μL包埋块(如果用纯化好的DNA)或25个10μL包埋块(如果用悬浮细胞)；本试剂盒提供的PCR试剂盒足够180次100μL体系的PCR反应。

试剂盒组成：
成分一：甲基化修饰试剂盒(BTN130301)

 

成分	规格
包埋液	1.5ml
分子生物学级石蜡油	25ml
包埋块裂解液	12.5ml
蛋白酶K溶液(10mg/mL)	150μl
溶液A	30ml
溶液B成分一	2.3 g×5棕色瓶
溶液B成分二	110mg×5棕色管
TE缓冲液，pH8.0	125ml
说明书	1份

注：包埋液用1.5mL旋盖离心管包装，溶液B成分一用5mL棕色瓶包装，溶液B成分二用1.5mL旋盖棕色管包装。
成分二：即用型PCR 3.0(BTN90805)

成分	规格
PCR MagicMix 3.0	9ml
专用染料	360μl
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存，保存期一年。但Proteinase K和即用型PCR Mix3.0 需要低温运输，-20℃保存。

使用方法：

一、准备试剂
1．在装有2.3g溶液B成分一干粉的瓶中加入3.9mL水和0.9mL溶液A，摇晃溶解得到4.8mL溶液B成分一。在装有110mg溶液B成分二干粉的离心管中加入1mL 50℃预热的超纯水，摇晃溶解，得到溶液B成分二。将0.6mL溶液B成分二加入到4.8mL溶液B成分一中，得到5.4mL溶液B，冰上放置待用。未用完的溶液B下次不得再使用。
2．每次实验前，将装有1.5mL 包埋液离心管在沸水浴上放置数分钟直到变成溶液，然后放80℃待用。

二、对微量组织材料(如果材料足够，可先纯化DNA，再按第三方案进行)
1．用常规的胰酶消化法处理动物实体组织或培养细胞，得到浓度不超过60细胞/μL的单细胞PBS 悬液。如果实验材料已经是单细胞悬浮液(如卵细胞)，则PBS 洗涤后直接离心沉淀，再重悬在PBS中(浓度不超过60细胞/μL)。注：本试剂盒不含本步所需相关试剂。
2．在一个2mL离心管中加入3μL细胞悬液，再迅速滴加7μL在80℃预热的包埋液。注：不需要吹打混匀以免混合液在抢头里面凝固。
3．加入500μL分子生物学级石蜡油，将离心管在沸冰浴中放置20分钟。
4．将离心管转移到冰上放置30分钟，低温下包埋液和细胞混合液将凝固成10μL的包埋块。
5．加入500μL 包埋块裂解液和5μL Proteinase K溶液，37℃保温过夜。加入的溶液比重都比石蜡油大，将会自动沉降到石蜡油下层，不需离心。
6．吸弃包埋块之外的所有溶液(包括石蜡油)，用1mL TE缓冲液室温浸泡包埋块2次，每次15分钟。此步可去除残留包埋块裂解液。
7．酶切包埋块中的DNA：选定不识别PCR靶片段的内切酶(本试剂不提供该相关试剂)，再用100μL选定内切酶的1×缓冲室温液浸泡包埋块15分钟，吸弃缓冲液后再加入100μL 选定内切酶的1×缓冲液和50U选定的内切酶，37℃保温2小时。
8．吸弃酶切反应液，再加入500μL 新鲜配制的处理液A(配制方法：100μL溶液A+400μL超纯水)室温放置15分钟，重复此步一次。此时DNA 将呈单链。
9．吸弃处理液A，用1mL新鲜配制的处理液B(配制方法：50μL溶液A+950μL超纯水)室温浸泡包埋块5分钟。
10．吸弃处理液B，加入750μL石蜡油，然后沸水浴20-30秒，使DNA单链彻底彼此分开。
11．奖离心管转移到冰上放置30分钟使包埋块重新凝固。
12．在离心管中加入1mL预冷的溶液B，溶液B将自动沉降到石蜡油下层。继续在冰上放置30分钟。此步用于修饰单链的DNA。
13．将离心管转移到50℃放置3.5小时。
14．吸弃溶液B，用1mL TE缓冲液常温洗涤包埋块2次，每次15分钟。
15．吸弃TE缓冲液，用500μL新鲜配制的处理液C(50μL溶液A+450μL超纯水)常温洗涤包埋块2次，每次15分钟。
16．吸弃处理液C，用1mL TE缓冲液常温洗涤包埋块3次，每次10分钟.
17．吸弃TE缓冲液，所得包埋块可以在4℃保存数月待用，也可以用超纯水洗涤两次(每次15分钟)后直接用做100μL体系甲基化PCR的模板。

三、对纯化好的DNA
18．选用不识别PCR 靶片段的合适内切酶酶切纯化的基因组DNA(本试剂不提供所需试剂)，总体积不超过20μL，基因组DNA 不超过700ng。
19．酶切结束后，沸水浴5-10分钟灭活内切酶并变性DNA。
20．冰上放置并短暂离心数秒后，再加入4μL溶液A，50℃保温15分钟。
21．迅速加入50μL在80℃预热的包埋液，用手指快速弹击管底混匀溶液并继续放80℃待用。不要吹打混匀以避免包埋液在移液枪头中凝固。
22．在一个新的、2mL离心管中，加入1mL预冷的溶液B，再加上750mL石蜡油，并将离心管放冰上预冷。
23．迅速取80℃保温的混合液10μL，用在空中滴加的方式加到上步准备的预冷的离心管中，滴加的混合液遇冷将迅速在石蜡油中形成包埋块并自动沉入管底。注意：不要将枪头浸入到预冷的溶液中，否则包埋液将迅速在枪头内凝固。如果包埋块没有沉到管底，可以用枪头将其拨到石蜡层下面的液相中。
24．再重复上步操作，共可以得到7个包埋块(约含100ng DNA)。
25．将离心管(含7个包埋块)继续放冰上30分钟进行修饰。
26．后续操作同第13-17步。

四、甲基化专一性PCR(由于包埋块可能会抑制PCR，所以最好使用100μL体系的PCR进行甲基化检查，如果效果不好，建议使用巢式PCR)
27．在一干净的PCR 管中，加入下列成分(冰上操作)：

成份	样品管	对照管
PCR MagicMix 3.0	50μl	50μl
DNA包埋块(修饰后DNA)	1块(约含100ng DNA)	无
对照DNA(修饰前DNA)	无	100ng
自备MSP引物F	25 pmol	无
自备MSP引物R	25 pmol	无
自备非甲基化PCR引物F	无	25 pmol
自备非甲基化PCR引物R	无	25 pmol
补水到	100μl	100μl

28．将混合物混匀，放入PCR仪中进行热启动PCR，结束后取5-10μL PCR产品直接进行琼脂糖电泳。


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·蛋白*(代"磷")酸酶抑制剂混合液Ⅰ
编号：BTN80809
英文名称：Phosphotase Inhibitor Cocktail 1
规格：1mL
组织/细胞裂解时会释放出大量内源性蛋白*(代"磷")酸酶，以各种方式催化磷酸化蛋白的去磷酸化，导致不同于正常生理状态的差异，影响实验结果。因此，加入外源性蛋白*(代"磷")酸酶抑制剂，抑制磷酸化蛋白的去磷酸化，维持蛋白质的磷酸化状态，是Western Blotting、免疫共沉淀检测磷酸化蛋白质和蛋白激酶活性测定等研究不可缺少的一步。本产品就是针对这一用途开发。

产品特点：
1．即开即用，不需要单独购买每个成分然后再配制。
2．由5种蛋白*(代"磷")酸酶抑制剂(钒酸*、*化*、钼酸*、酒石酸*、咪唑)组成，各成分的浓度经过精心优化。
3．抑制谱广，能特异性地抑制丝*酸磷酸酶、苏*酸磷酸酶、酪*酸磷酸酶、酸性磷酸酶、碱性磷酸酶和ATP酶。
4．与各种细胞裂解液兼容。
5．使用简单，在细胞裂解液中按一定比例加入即可(根据蛋白*(代"磷")酸酶决定，一般按1/100的体积比)。
6．适用于Western blot、免疫共沉淀检测磷酸化蛋白质、蛋白激酶活性测定等试验。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1.在临用前溶解本产品，并按1/100的比例加入到细胞裂解液中(1mL细胞裂解液中加入10μl)。注意：对蛋白*(代"磷")酸酶含量特别丰富的组织，可以将加入比列提高到1/20-1/50。
2.后续处理按常规方法进行即可。

注意：避免反复冻融本产品，所以第一次溶化后，如果还有剩余，可将其分装成小份冻存，每次用多少取多少。


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PY06-002  大肠杆菌显色培养基  1000ml，用于大肠杆菌的快速分离与计数
柠檬酸*-EDTA抗原修复液(40×)   100ml
甲基橙 H-Glu-PNA 547-58-0
9068-59-1 中性蛋白酶
总胆汁酸(TBA)检测试剂盒(酶比色法)   50T
ARB11871 人糖蛋白130(gp130)含量分析 Human glucoprotein 130,gp130 ELISA KIT
CD111 超纯dATP(100mM)
Dacie氏液   100ml
ARB11822 人精*酸加压素(AVP)含量检测 Human arginine vasopressin,avp ELISA KIT
ARB10188 人α干扰素(IFN-α)elisa检测 Human interferon α,ifn-α ELISA KIT
ARB11340 人胎盘催乳素(HPL)Elisa定量检测 Human placenta lactogen,hpl ELISA KIT
ARB13777 豚鼠γ干扰素(IFN-γ)血清中含量检测 Guinea pig interferon γ ,ifn-γ ELISA KIT
琼脂粉 Sodium 1-butanesulfonate 9002-18-0
Tris缓冲盐溶液(20×TBS,pH8.0)   500ml
ARB13376 牛病毒性腹泻抗原(BVD Ag)定量分析 
丁二酸 4′-Hydroxypropiophenone 110-15-6
组织裂解液 "Tissue lysis solution 
吲哚乙酸酯 Lithium phosphate hemihydrate 608-08-2
F020203 山羊抗小鼠IgG2a抗体 Goat Anti-Mouse IgG2a

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