酵母tRNA溶液(精提)折扣价

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")酵母tRNA溶液(精提)折扣价，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：酵母tRNA溶液(精提)折扣价
英文名：Yeast tRNA Solution
编号：BTN70904B
规格：1.5mL
品牌：百奥莱博
本产品分A和B两个规格，浓度均为5mg/mL。A是酵母tRNA粗提液，用作制备更高纯度(如分子生物级)酵母tRNA的原材料。B是精提液，是经过本公司柱式RNAadsorp纯化的分子生物学级别的酵母tRNA溶液，不含蛋白质和DNA污染，OD260/OD280在1.9左右，可直接用作微量RNA提取和回收的助沉剂，也可以用作原位杂交、Northern杂交的封堵剂，对于探针为RNA的杂交试验尤其适用。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一：以tRNA粗提液(BTN70904A)为材料，酚法制备tRNA精提液(BTN70904B)
1.在1倍体积的tRNA粗提液中加入一倍体积的自备Tris饱和酚，振荡混匀后12000～15000g离心3分钟得上清。
2.在上清中再加入一倍体积的自备Tris饱和酚和0.2倍体积自备的*仿，振荡混匀后12000～15000g离心3分钟得上清。
3. 重复此步直到酚相和水相之间没有白膜出现。一般需要2-4次抽提。
4.在上清中加入0.1倍体积的自备3M NaAc(pH5.2)和2倍体积的自备无水乙醇，振荡混匀。
5. 12000～15000g离心15分钟以上，小心移弃上清。
6. 用1mL自备 75%乙醇洗一次(即加入1mL 75%乙醇，振荡混匀后12000～15000g离心5分钟，小心移弃上清)。
7. 短暂离心数秒，小心移弃残留液体，所得沉淀即是精提的酵母tRNA，可以溶解在自备的DEPC水中，UV测定其浓度，然后直接用于各种分子生物学实验。
注意：tRNA比较短，又是单链，所以电泳时结合EB等染料的能力很弱，测定其浓度时最好不要使用电泳比较法，而要使用分光光度法。
注意：此法得率较高，但缺点是不能去除部分多糖污染，因为多糖也能在醇沉淀时沉淀下来。如果最后得到的溶液带颜色，则需要用本公司柱式RNAadsorp精提，详细过程见该产品使用说明书。

二：tRNA精提液(BTN70904B)作为核酸助沉剂
1.在核酸(DNA或/和RNA)溶液中，加入适当浓度的盐离子，盐离子不同其终浓度也不相同，具体如下：

 

盐	终浓度
NH4OAc(醋酸铵)	0.5M
NaCl(*化*)	0.25M
NaOAc(醋酸*)	0.3M

2. 加入本产品使其终浓度为20μg/mL，混合均匀。
3. 加入两倍体积的乙醇，混合均匀。
4. 冰上放置15分钟。
5. 12000～15000g离心15分钟以上，小心移弃上清。
6. 用1mL 75%乙醇洗一次(即加入1mL 75%乙醇，振荡混匀后12000～15000g离心5分钟，小心移弃上清)。
7. 短暂离心数秒，小心移弃残留液体。
8. 将沉淀溶于适当缓冲液中待用。
注：由于tRNA是多聚核苷酸激酶和末端转移酶的底物，因此如果回收的DNA或RNA要用于此类反应，就不能使用tRNA作为助沉剂。如果回收的RNA要用于RT-PCR，使用tRNA可能会对反应的特异性产生干扰。

三：tRNA精提液(BTN70904B)作为杂交封堵剂
本产品可以作为原位杂交、Northern杂交和RNA斑点杂交的封堵剂，也可以作为Southern杂交和DNA 斑点杂交的封堵剂，但不适于作为菌斑杂交。其在杂交液或预杂交液中的终浓度为100μg/mL。
如果使用RNA探针，最好使用本产品做封堵剂，以保护RNA探针。

更多有关酵母tRNA溶液(精提)折扣价的价格及使用说明等，请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：

·1M Tris-HCl(pH8.5)(DNA级)
编号：BTN101207
规格：250mL

·柱式藻类RNA大量提取试剂盒
编号：BTN120504
英文名称：Algae RNA Column large-scale extraction kit
规格：5次
本试剂盒是在本公司柱式藻类RNA提取试剂盒(BTN120503)的大提升级产品，跟柱式藻类RNA提取试剂盒相比，它具有下列特点：
1.样品处理量大，最多可以处理50mL液体藻类培养物。
2. 操作简单快捷，整个过程只需要约30分钟。
3. RNA 纯度高，OD260/280一般都在2.0左右，可直接用于RT-PCR、Northern杂交、microarray hybridization、cDNA 合成等。
4. RNA产量高，一般在20-70μg/mL液体藻类培养物(约2.0×107个细胞)。非酶细胞破裂法，适用于各种形态的藻类和各个种属的藻类。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	50ml
溶液B	50ml
溶液C	150ml
溶液D	50ml
大提离心吸附柱	5套
通用洗柱液	100ml
RNA 洗脱液	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 将50mL液体藻类培养物在塑料离心管中5000-7,000rpm 4℃离心1分钟，并弃尽液体培养基(可以分多次离心)。
2. 加入10mL溶液A并充分吹打混匀。注意：溶液A存放时容易产生沉淀，如果有沉淀，用前请置于65℃融化并充分摇晃均匀。
3. 加入10mL溶液B，剧烈振荡30秒。
4. 65℃保温5分钟。注意：不要超过5分钟，否则RNA 容易降解。
5. 5000-7,000rpm 4℃离心3～5分钟，转移上清到一自备的、干净的50mL塑料离心管中。
6.在上清液中加入2mL自备的*仿，充分振荡30秒混匀。
7. 4℃ 5000-7,000rpm离心3～5分钟，转移上清液到一自备的、干净的50mL塑料离心管中。
8. 加入相当于上清液(约10mL左右)3倍体积的溶液C和1倍体积的溶液D，充分混匀。如果上清为10mL，则加入30mL溶液C和10mL溶液D。
9. 将混合液分多次转移到离心吸附柱中，每次转移后需要室温放置2-3分钟以让RNA跟吸附膜充分结合，然后5000-7,000rpm室温离心30-60秒，弃收集管中的穿透液，然后再加入后一批混合液，重复操作，直到混合液全部挂柱。
10. 第一次洗涤：将10mL 通用洗柱液加到离心吸附柱中，室温离心半分钟，弃收集管中的穿透液。
11. 第二次洗涤：一次洗涤一般足够去除杂质，但如果样品OD260/280 比值不高，可以再用10mL 通用洗柱液重复上步洗涤一次。
12.室温离心空柱子(带收集管)半分钟。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会影响RNA的使用。
13. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 50mL塑料离心管中，加入1mL RNA 洗脱液。
14.室温离心半分钟，离心管中溶液即为RNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。
15. RNA完整性的电泳检测：
注意：普通DNA上样液不含变性剂，更没经过去RNase处理，所以最好不要用于RNA电泳。
16. RNA产量和纯度产率测定：
将5-10μL RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL)，进而计算出RNA的产量(浓度×体积)和产率(RNA产量/细菌用量)。注意不要将RNA 稀释在DEPC 水中检测OD260和OD280，否则光吸收比在TE中测得的低10%-15%；也不要稀释过度，使OD读数在仪器的有效范围之外，这样得到的OD 比值没有意义。

疑难解答：
Q：上样孔里的红色荧光物一定是污染的基因组DNA 吗？
A：不是。用TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳RNA时容易产生此现象，百奥莱博初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA 通过碱基互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用TBE作电泳液的话)形成的复合物，加RNase处理后，这些红色荧光物一般会消失。为避免此现象，建议最好使用甲醛变性胶电泳。如果需要使用非变性胶，也必须在上样前使RNA变性。使用百奥莱博优化的上样/变性/染色三用溶液RNAload可以使RNA在非变性胶上电泳时也有较好分辨率。使用非变性胶时，可以使用TAE或超快电泳液SuperBuffer-2，最好不要使用TBE缓冲液，因为TBE中的硼*(代"酸")能与RNA的多羟基形成复合物，RNA 很难形成锐利的条带。
Q：如何确认和去处除污染的基因组DNA？
A：如果怀疑有DNA污染，可以用RNase处理RNA样品，然后再电泳。如果上样孔里的红色荧光物不消失，则表示是基因组DNA污染。进一步确认可以使用PCR扩增法。去除污染的DNA可以使用5分钟柱式DNA 清除剂、非酶的DNA 去除剂DNA Scavenger或RNase-free DNase，由于RNase-free DNase一般都有残留的RNase污染，所以必须严格按照厂家提供的使用说明书进行操作。


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·革兰氏阴性菌DNA提取试剂盒(百万碱基级)
编号：BTN130948
英文名称：Gram negative bacteria DNA extraction kit(millions of base)
规格：10次

·*化乙锭溶液
编号：BTN3180
英文名称：Ethidium Bromide Solution
规格：1.5mL
本品是浓度为10mg/mL的*化乙锭水溶液。它可以直接加入到溶化的琼脂糖凝胶中(终浓度为0.5μg/mL)用于核酸的电泳染色，也可以用于核酸的PAGE电泳后染色。

储存条件：常温运输，4℃避光保存、有效期一年。

·柱式血液DNA提取试剂盒
编号：BTN60306
英文名称：Blood DNA column extraction kit
规格：50次
本试剂盒是基于离心柱/硅胶膜原理的、专门用于从新鲜或冷冻的动物(包括人和禽类)抗凝全血中提取基因组DNA的试剂。

产品特点：
1. DNA纯净，OD260/280在1.8-2.0之间。不含蛋白质和RNA污染，可直接用于PCR、酶切、杂交等。
2.产量高，一般为1-10μg/mL全血(对哺乳动物血液)。
3. 操作简单，整个过程约20分钟，全室温操作，适合大规模样品处理。
4. 用量广泛，每次可以处理少达20μl(对禽类动物血液)，多达1mL的血液(对哺乳动物血液)。
5. 安全无毒，本试剂盒对人体无毒，无腐蚀性和刺激性气味。

试剂盒组成：

成分	规格
红细胞裂解液(A型)	25ml
溶液A	25ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
DNA洗脱液2.0	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输、4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1.在0.02-1mL新鲜或抗凝血液(冷冻血需先37℃水浴融化)中加入0.5mL红细胞裂解液(A型)，吹打混匀。
a)哺乳动物，血液使用量以300μl以下为宜，使用量越大产量越高，但产率会降低。如果血液多于300μl，重复1-2步两次可以提高产率。
b)禽类动物，血液使用量以20μl以下为宜，可以从第3步做起。
2.室温12000～15000rpm离心5分钟，沉淀呈粉红色，小心倾去上清。
3. 再短暂离心半分钟，吸弃残留的液体。此步有利于后面的细胞裂解，但一般可以省略。
4. 向有沉淀的离心管内加入0.5mL溶液A(溶液A有少量晶体沉淀，用前需要摇晃均匀)，用移液枪吹打使沉淀充分悬浮起来。此步目的是裂解细胞，释放DNA，所以吹打越充分越好。
5. 静置2分钟待溶液变清亮后，将液体转移到离心吸附柱中并静置2-5分钟，以使DNA与膜充分结合。
6. 12000rpm离心半分钟，DNA将吸附到膜上，弃收集管中的废液。
7. 加入0.7mL的通用洗柱液，12000rpm离心半分钟，弃收集管中的废液。
8. 加入0.3mL的通用洗柱液，12000rpm离心半分钟，弃收集管中的废液。
9. 12000rpm离心半分钟，甩干残留液体。此步很重要，以去除膜上残留通用洗柱液，否则会影响后续反应。
10. 将离心吸附柱置于一新的1.5mL塑料离心管(自备)中，加入适量50μl DNA洗脱液2.0，室温放置2分钟。如果将DNA洗脱液2.0在65℃预热后再使用，洗脱DNA的效果会更好。
11. 12000rpm离心半分钟，离心管底溶液即DNA溶液。可以立即使用或放冰箱长期保存。


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BTN130417 蓝胶琼脂糖 Cibacron Blue Agarose
BTN100210 dNTP溶液(标记专用) dNTP Solution
PC4101 TUREscript One Step qRT-PCR Kit (一步法荧光定量反转录PCR试剂盒)
ARB13865 猪生长激素释放肽ghrelIn(GHRP-GhrelIn)Elisa分析 Porcine growth hormone releasing Peptide-ghrelin,ghrp-ghrelin ELISA KIT
BL1278 2×蛋白上样缓冲液(含β-巯基乙醇)
盐*(代"酸")左旋咪唑 C10E6 16595-80-5
Heinz小体染色液(结晶紫法)   100ml
CYB165024 生物素化羊抗小鼠IgG
ARB12541 大鼠胰岛素样生长因子2(IGF-2)酶免分析 Rat insulin-like growth factor 2,igf-2 ELISA KIT
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黄嘌呤 Novobiocin Sodium Salt 69-89-6
ARB12888 小鼠甲状腺过氧化物酶(TPO)含量分析 Mouse thyroid-peroxidase,tpo ELISA KIT
线粒体蛋白提取试剂盒   50T|100T
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BTN120699 多粘菌素B硫*(代"酸")盐 Polymyxin B Sulfate Solution
聚丙*(代"烯")酸树脂Ⅱ β-Lactoglobulin
甘油-甲基绿溶液   50ml
5-胞苷二磷酸二*盐 Methyl 4-hydroxybenzoate 63-38-7
5-*尿嘧啶 Gallic acid 51-20-7

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