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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
801
- 英文名:
TCEP·HCl
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输,-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应TCEP盐*(代"酸")膦折扣价,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:TCEP盐*(代"酸")膦折扣价
英文名:TCEP·HCl
规格:1g
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
编号:BTN131055
本产品全名是Tris[2-carboxyethyl]phosphine hydrochloride),中文名是Tris[2-羧乙基]盐*(代"酸")膦,它是高效、水溶性、无味的还原剂,其特点是选择性并彻底地还原最稳定的、水溶性的烷基二硫键。在室温、pH5.0的条件下,在五分钟内高效地还原。水溶性为310克/升。抵抗空气氧化;非挥发性并且对于蛋白中的其它基团无反应活性。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
我公司的TCEP盐*(代"酸")膦折扣价,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
·RNase H
编号:BTN120413
英文名称:Ribonuclease H
规格:600U
RNase H是特异性分解RNA-DNA杂交体中的RNA链的核糖核酸内切酶,产生具有游离 3´-OH和5´-磷酸末端的产物,该酶对单链的核酸,双链DNA或双链RNA不起作用。
产品用途:
1.通过Okayama-Berg法进行cDNA Cloning。
2.DNA-RNA杂交体的检定。
3.在Oligo(dT)存在下除去mRNA的Poly(A)末端。
4.mRNA的定量。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:以Poly(rA)*Poly(dT)为底物,在30℃、pH7.7的条件下,20分钟内产生1nmol酸可溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位
纯度:
1.50U的本酶和1μg的λDNA-Hind III分解物在37℃下反应16小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
2.50U的本酶和1μg的Closed circular(RFI)pBR322 DNA在37℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
3.50U的本酶和1μg的16S,23S rRNA在37℃下反应1小时,RNA的电泳谱带不发生变化。
TCEP盐*(代"酸")膦折扣价关键词:BTN131055,TCEP盐*(代"酸")膦,TCEP·HCl
·哺乳动物专用蛋白酶抑制剂
编号:BTN130527
英文名称:Protease Inhibitor for Mammal
规格:1mL
本产品为哺乳动物蛋白酶抑制混合液,溶剂为DMSO。专门用于裂解哺乳动物组织(如,血液、肝脏、肌肉等)时,抑制各种内源和外源蛋白酶活性,防止蛋白质降解。本产品抑制谱广,能特异性抑制丝*酸蛋白酶、半胱*酸蛋白酶、天门冬*酸蛋白酶和*基肽酶等各种蛋白酶活性。与各种细菌细胞裂解液兼容,在裂解液中加入1/100体积即可。
储存条件:低温运输、-20℃保存、有效期两年。
·cDNA第二链合成试剂盒
编号:BTN131005
英文名称:Second Strand cDNA Synthesis Kit
规格:30次
cDNA第二链合成的原理是用RNase H使RNA-DNA杂合链中的RNA产生切口,再用DNA Polymerase I通过切口平移(nick translation)反应进行RNA链取代合成cDNA第二链。
产品特点:
1. 即开即用,含有合成cDNA第二链的所有试剂。
2. 所得双链cDNA可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR、cDNA文库构建、抑制性差减杂交等。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 5×cDNA第二链合成缓冲液 | 480μl |
| 20×cDNA第二链合成酶混合液 | 120μl |
| 0.2 M EDTA溶液 | 120μl |
| 超纯水 | 2ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一、合成cDNA第一条链
本试剂盒不提供cDNA第一链合成试剂,用户需自备相关试剂合成cDNA第一链。
二、合成cDNA第二链
1.在冰浴上向已经完成合成cDNA第一条链的反应体系中依次加入下表试剂:
| 成分 | 用量 |
| cDNA第一链合成反应液 | 10μl |
| 超纯水 | 48μl |
| cDNA第二链合成缓冲液 | 16μl |
| cDNA第二链合成酶混合液 | 4μl |
| 轻柔吹打混匀后,短暂离心,16℃保温2小时 | |
| 自备的T4 DNA聚合酶 | 2μl |
| 轻柔吹打混匀后,16℃继续保温30分钟 | |
| 0.2M EDTA溶液 | 4μl |
注:如果不需要将双链cDNA平末端化,则可以跳过T4 DNA聚合酶处理步骤。
2.电泳5μl检测cDNA质量。如果cDNA在0.5-10Kb的范围内呈模糊一片,则cDNA合格。如果没看见cDNA或有其他异常,需查找原因后再继续。
3. 所得cDNA可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR、cDNA文库构建、抑制性差减杂交等实验。
TCEP盐*(代"酸")膦折扣价关键词:BTN131055,TCEP盐*(代"酸")膦,TCEP·HCl
·鲱鱼精DNA溶液
编号:BTN130908
英文名称:Herring Sperm DNA Solution
规格:1mL
本产品是浓度为10mg/mL的、经过热变性处理的单链鲱鱼精DNA溶液可以用于Southern、Northern预杂交,还可以用于酵母化学转化和电转化。本产品即开即用,非常方便。
储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。
·甲基化专一性PCR试剂盒
编号:BTN100923
英文名称:Methylation Specific PCR Kit
规格:50次
本产品是基于PCR的甲基化DNA检测试剂盒(即MSP试剂盒)。它由两个成分组成,一个是亚硫*(代"酸")*盐试剂盒,用于将DNA中所有没有甲基化的C转化成U,而甲基化的C不变。二是优化的PCR试剂盒,利用客户自备的专一性引物,根据PCR来检测甲基化位点的位置。
产品特点:
1.本产品是亚硫*(代"酸")盐修饰试剂盒和即用型PCR 3.0的整合,即开即用,非常方便。
2.柱式DNA回收方法极大提高亚硫*(代"酸")盐修饰后DNA的回收率。
3.优化的PCR mix,含有PCR所需要的所有成分,减少了操作误差。
4.PCR结束后可以直接上样电泳,非常方便。
5.用户需要自备MSP专一性引物。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 5ml |
| 溶液B成分一(干粉) | 2.3g×5瓶 |
| 溶液B成分二(干粉) | 110mg×5瓶 |
| 通用溶胶液 | 50mL×2 |
| 离心吸附柱 | 50套×2 |
| 通用洗柱液 | 100mL |
| DNA洗脱液 | 10mL |
| PCR MagicMix 3.0 | 1.5mL |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存(PCR MagicMix 3.0要低温运输,-20℃保存),有效期一年。
自备试剂:超纯水、MSP引物、对照DNA模板和引物。
注:严格的实验一般要求下列5种对照DNA模板和相应的引物对,用户可以根据自身实验的要求只做其中的部分。
| 对照名称 | 起始DNA | 处理 |
| 未修饰未甲基化DNA对照 | 未甲基化DNA (无甲基化宿主菌或体外扩增而得) |
未经过亚硫*(代"酸")*盐修饰 |
| 已修饰未甲基化DNA对照 | 未甲基化DNA(同上) | 经过亚硫*(代"酸")*盐修饰 |
| 未修饰甲基化DNA对照 | 甲基化DNA (用甲基化酶修饰未甲基化DNA而得) |
未经过亚硫*(代"酸")*盐修饰 |
| 已修饰甲基化DNA对照 | 甲基化DNA(同上) | 经过亚硫*(代"酸")*盐修饰 |
| 未修饰样品DNA对照 | 样品DNA | 未经过亚硫*(代"酸")*盐修饰 |
使用方法:
Ⅰ.亚硫*(代"酸")*盐修饰
一、准备试剂
1.配制溶液B成分一溶液:加5.0mL超纯水和27μl溶液A到装有溶液B成分一干粉的棕色塑料瓶中,轻柔摇晃至溶(尽量少的剧烈摇晃,约需要5分钟),总体积约5.5mL。
2.配制溶液B成分二溶液:加10mL超纯水到装有溶液B成分二干粉的棕色塑料瓶中,轻柔摇晃混匀(尽量少的剧烈摇晃)。
3.配制溶液B工作液:将55μL溶液B成分二溶液加入到溶液B成分一溶液中,轻柔颠倒混匀即可使用。一瓶溶液B工作液可以用10次。
二、DNA变性处理
1.将5μL溶液A加入到45μL DNA溶液中并吹打混匀(总体积没有45μL需要用水补足到45μL,DNA总量在0.2-5μg之间,不能超过 5μg,一般使用2μg DNA即可)。 注意:DNA必须是线状的,长度最好在20-50 Kb左右。基因组DNA可以预先用酶切处理(酶的位点不得在研究的DNA序列之内),也可以用机械打断法处理(得到的DNA一般在20-50 Kb左右)。
2.37℃放置15分钟使DNA充分变性。
3.立即在DNA溶液中加入500μl溶液B工作液,轻柔颠倒混匀。
4.55℃避光保温8-16小时。如果使用水浴或没有热盖的PCR仪器保温,最好加50-100μL石蜡油,避免水分蒸发。
注意:必须避光保温。55℃处理8小时足以使95%的C变成U,保温时间过长会引起DNA的断裂。如果有的区域的C难以转化成U,可以改用两步式PCR处理(每55℃保温3小时后95℃变性处理5分钟,共5-10个循环),效果会更佳。
5.冰浴10分钟。
6.加入1mL的通用溶胶液,颠倒混匀后取一半溶液上柱。单链DNA会结合在离心吸附柱上,亚硫*(代"酸")*盐等将穿透过柱。
7.12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。
8.取另一半溶液再上柱,12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。单链DNA会结合在离心吸附柱上,亚硫*(代"酸")*盐等将穿透过柱。
9.加入0.7mL通用洗柱液,12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。此步可以洗涤残留的亚硫*(代"酸")*盐。
10.干甩半分钟后,将离心吸附柱转移到一个新的离心管中,加入50μl新鲜配制的溶液A稀释液(5μl的溶液A原液与45μl的超纯水混合而得),室温放置2分钟后离心半分钟。
11.将洗脱下来的DNA溶液放置在37℃保温15分钟。
12.加入0.7mL的通用溶胶液,混匀后上柱。
13.12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。单链DNA会结合在离心吸附柱上,杂质等将穿透过柱。
14.干甩半分钟后,将离心吸附柱转移到一个新的离心管中,加入50μl DNA洗脱液,室温放置2分钟后离心半分钟。
15.所得溶液即为亚硫*(代"酸")*盐修饰的DNA,可以用于下面的甲基化专一PCR。
说明:此方法的回收率一般为50%,2μg DNA最后可以得到1μg的修饰后的DNA。由于修饰后的DNA呈长短不一的单链,EB染色效果很差,所以不能用灵敏度低的琼脂糖电泳-EB染色的方法检测,但可以用灵敏度更高的PAGE-银染方法检测。
Ⅱ.甲基化专一性PCR(以60μL的标准PCR反应体系为例)
1.在一干净的PCR管中,加入下列成分(冰上操作):
| 成分 | 样品管 | 对照管 |
| PCR MagicMix 3.0 | 30μl | 30μl |
| 亚硫*(代"酸")*盐修饰的DNA模板 | 100-500ng | 无 |
| 对照DNA模板 | 无 | 100-500ng |
| 自备MSP引物F | 25pmol | 无 |
| 自备MSP引物R | 25pmol | 无 |
| 对照模板专一性PCR引物F | 无 | 25pmol |
| 对照模板专一性PCR引物R | 无 | 25pmol |
| 补水到 | 60μl | 60μl |
注:有5种对照DNA模板可以供用户根据自身需要选择,详见自备试剂栏。
2.将混合物混匀,放入PCR仪中进行热启动PCR,结束后取5-10μL PCR产品直接进行琼脂糖电泳。
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文献和实验);6-糠基腺嘌呤(KT),又称激动素;这类物质不溶于水,易溶于盐酸或乙醇。均可用于组织培养诱导芽的形成。 3乙烯利(Ethrel,CEPA)化学名称2-氯乙基膦酸。在常温和pH3以下时较稳定,pH4以上即逐渐分解,放出乙烯。随着溶液温度和pH增高,乙烯释放速度加快。乙烯利常用于促进水果成熟、落叶和疏果;刺激橡胶树排泌胶乳,提高橡胶产量;对松脂和漆液等也有类似的增产效果。 4矮壮素(Cycocel,CCC)化学名称为2-氯乙基三甲基氯化铵,又称氯化氯胆碱。纯品为白色结晶,有鱼
分装。DTT和巯基乙醇相比,作用相似,但DTT的刺激性气味要小很多,毒性也比巯基乙醇低很多。而且DTT比巯基乙醇的浓度低7倍时,两者效果相近。但DTT价格略高一些。DTT粉末的一般保存条件:-20℃保存。1M DTT溶液可以在-20℃保存2年以上。 由于容易被空气氧化,因此DTT的稳定性较差;但冷冻保存或在惰性气体中处理能够延长它的使用寿命。由于质子化的硫的亲核性较低,随着pH值的降低,DTT的有效还原性也随之降低;而Tris(2-carboxyethyl)phosphine HCl(TCEP
5.5 含有酸、碱、氧化剂、还原剂及无机盐类的有机类废液 此类废液包括:含有硫酸、盐酸、硝酸等酸类和氢氧化钠、碳酸钠、氨等碱类,以及过氧化氢、过氧化物等氧化剂与硫化物、联氨等还原剂的有机类废液。 首先,按无机类废液的处理方法,把它分别加以中和。然后,若有机类物质浓度大时,用焚烧法处理(保管好残渣)。能分离出有机层和水层时,将有机层焚烧,对水层或其浓度低的废液,则用吸附法、溶剂萃取法或氧化分解法进行处理。但是,对其易被微生物分解的物质,用水稀释后,即可排放。
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