北京MMLV逆转录酶多少钱

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名称：北京MMLV逆转录酶多少钱
品牌：百奥莱博
编号：BTN60905
英文名：MMLV Reverse Transcriptase
产地：国产|进口
规格：10000U
该酶是突变型的MMLV逆转录DNA聚合酶，从表达莫洛尼氏鼠白血病病毒reverse transcriptase基因(pol基因)的E.coli细胞中分离纯化而得，由一个分子量为76.1KDa的单亚基组成，可催化以单链DNA、RNA或DNA:RNA杂交链为模板的互补DNA链的聚合反应。跟野生型相比,它没有RNase H活性。

产品特点;
1．延伸性能好，可合成长达12.5 Kb的fμLl-length cDNA。
2．最佳反应温度为42℃，但在50℃时仍然有活性，70℃10分钟能使其失活。
3．能以Cy3-，Cy5-，rhodamine-，aminoallyl-，fluorescein等标记的nucleotides 为底物。
4．可用于first strand cDNA 合成，second strand cDNA 合成，DNA labeling，RNA primer extension等。
5．与PCR 兼容，RT产物可以用于PCR和real-time PCR。
6．能被金属螯合剂，无机磷酸，焦磷酸和多胺抑制。
7．没有RNase H活性。

产品组成：

 

成分	规格
MMLV逆转录酶(200U/μL)	50μl
5×RT Buffer	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有限期一年。

使用方法：

一、合成PCR用的1st-strand cDNA
1．按下表配制RT反应体系:

加入物	加入量
总RNA 或poly(A)mRNA 或专一的RNA	100-500 ng 10-500 ng 0.01pg-500ng
注：RNA样品不能有基因组DNA污染。
Oligo(dT)18(0.5ug/μL) 或随机引物(0.2ug/μL) 或RNA模板专一性引物	1μL 1μL 15-20pmol
注：随机引物于RNA模板的比例跟最后得到的cDNA的平均长度成反比
RNase-free水	补水到12μL

2．70℃保温5分钟后立即冰浴。
3．严格按下表顺序加入各成分：

5×RT Buffer	4μL
RNase Inhibitor(20U/μL)	1μL
dNTP(10mM each)	2μL

4．37℃保温5分钟。对富含二级结构的高GC RNA模板，可以改成45℃保温5分钟。如果使用随机引物，则保温温度只能是25℃(5分钟)。
5．加入1μL(200U)MMLV逆转录酶，反应终体积为20μL。
6．42℃保温60分钟(但如果使用随机引物，需要先25℃保温10分钟，然后再转移到42℃保温60分钟)。
7．70℃保温10分钟以终止反应，放置在冰上待用。合成的cDNA可以直接作为PCR模板使用，不需要纯化。

二、合成建文库用的1st-strand cDNA
1．按下表配制RT反应体系:

加入物	加入量
poly(A)mRNA 或专一的RNA	1ug 0.5-1ug
注：RNA样品不能有基因组DNA污染。
Oligo(dT)18(0.5ug/μL) 或随机引物(0.2ug/μL) 或RNA模板专一性引物	1μL 1μL 100pmol
注：随机引物于RNA模板的比例跟最后得到的cDNA的平均长度成反比
RNase-free水	补水到12μL

2．70℃保温5分钟后立即冰浴。
3．严格按下表顺序加入各成分：

5×RT Buffer	4μL
RNase Inhibitor(20U/μL)	1μL
dNTP(10mM each)	2μL

4．37℃保温5分钟。对富含二级结构的高GC RNA模板，可以改成45℃保温5分钟。如果使用随机引物，则保温温度只能是25℃(5分钟)。
5．加入1μL(200 U)MMLV逆转录酶，反应终体积为20μL。
6．42℃保温60分钟(但如果使用随机引物，需要先25℃保温10分钟，然后再转移到42℃保温60分钟)。
7．70℃保温10分钟以终止反应，放置在冰上待用。合成的cDNA可以用于第二链cDNA的合成或放置在-20℃。

北京MMLV逆转录酶多少钱极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·蛋白胶微量回收试剂盒
编号：BTN90402
英文名称：Protein Gel Mini-Extraction Kit
规格：50次
十二烷基硫*(代"酸")*-聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)不仅可用于检测蛋白质的相对分子质量，而且也是分离纯化蛋白质的重要工具之一，随着蛋白质技术的微量化，有必要从凝胶中回收蛋白质以用于制备抗体、免疫印迹、*基酸组分分析或末端序列测定等。

产品特点：
1．简单，不需要复杂而昂贵的仪器(如电洗脱仪)。
2．适用于变性胶(SDS-PAGE)和非变性胶。
3．回收率一般在50-90%之间(跟蛋白质大小，洗脱时间相关)。
4．跟后续的实验兼容，包括2-D电泳、质谱测序等。

产品组成：

成分	规格
溶液A	10ml
溶液B	50ml
微型离心管专用研磨杵	50只

储存条件：常温运输，4℃保存(微型离心管专用研磨杵可以室温保存)，有效期一年。

使用方法：
1．按常规方法进行变性(SDS-PAGE)或非变性蛋白电泳。
2．切取含目的蛋白的胶(尽可能地把多余的胶切除，否则会影响回收效率)。
 注意：固定和染色后蛋白回收效果很差，所以建议把样品分多孔上样，电泳后只切其中一个样孔的胶条进行固定和染色，然后将此胶条放回到在整体胶中原来的位置，通过显色胶条上的蛋白条带找到在未染色胶上对应区域，并切下此区域的胶进行回收。
3．将切下的胶块转移到1.5mL塑料离心管中。
4．用研磨杵充分将胶块压磨成尽可能细小的碎片。
5．加入20μL溶液A，4℃摇晃洗脱至少2-16小时(过夜)。此时最好将溶液B放在冰箱预冷。
6．10000g离心10分钟，转移上清到新的离心管中，注意不要吸取碎胶。
7．加入5倍体积的预冷的溶液B，摇晃混匀。
8．-20℃放置至少10-30分钟。
9．室温12000g离心5-20分钟，弃上清。
10．室温充分晾干，得到的沉淀即为回收的蛋白质。回收的蛋白质可溶解在适当的缓冲液中，可用于后续实验(2-D电泳、质谱测序等)。


北京MMLV逆转录酶多少钱关键词：MMLV Reverse Transcriptase,MMLV逆转录酶,BTN60905


·柱式动物RNA大量提取试剂盒
编号：BTN80901
英文名称：Animal RNA Column large-scale extraction kit
规格：5次
本试剂盒是柱式动物RNA提取试剂盒(BTN71201)的大提升级产品，可用于从各种动物组织(包括白细胞)中大规模快速提取总RNA。跟柱式动物RNA提取试剂盒相比，其主要特点是：
1.大规模提取，一次最大可以提取到80-100μg的动物总RNA。
2. 操作简单快速，整个过程只需要不到二十分钟(对一个样品而言)。
3. RNA 纯度更高，OD260/OD280一般在2.0左右。
4.一般不含用电泳可以检测到的基因组DNA污染。
5.适用于培养细胞、大部分动物组织和部分植物组织。
6. 得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA合成等实验。

试剂盒组成：

成分	5T
溶液A	50ml
溶液B	50ml
离心吸附柱	5套
通用洗柱液	100ml
RNA 洗脱液	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 先将1-2 g左右剪切好的动物组织放入50mL塑料离心管中，加10mL溶液A，用匀浆器匀浆30秒左右。对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织(细胞中含大量正在复制的DNA)，建议组织的使用量不要超过50mg/mL 裂解液，否则十分容易产生DNA污染。
2. 加入0.2倍体积的自备*仿(10mL溶液A需2mL*仿)，振荡器上充分振荡混均30秒。
3. 5000-7000rpm室温离心3～5分钟。
4. 将上清液(约6-7mL的无色透明水相，有时水相比重大时，水相在下层，有机相即蓝相在上层，吸取时应吸取透明水相)转移到一个干净的50mL塑料离心管中。注意：离心后下层有机相和中间层含有DNA和蛋白质，避免触及，否则将产生蛋白质和DNA污染。为保险起见，可以留下少许上清液不取。同时吸取上清时最好缓慢进行，否则容易吸出交界面的不可见的丝状DNA。
5. 加入等体积的溶液B，充分颠倒混匀。加入溶液B后，溶液为乳白色。
6. 将溶液转移到离心吸附柱中，5000-7000rpm室温离心1分钟，弃穿透液。
7. 加10mL 通用洗柱液到离心吸附柱中，室温离心1分钟，弃收集管中的穿透液。一次洗涤一般足够去除杂质。
8. 加10mL 通用洗柱液，室温离心1分钟，弃穿透液。此步可以省略。
9.室温5000-7000rpm离心2分钟。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会影响RNA的使用。
10. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 收集管中，加入1mL RNA 洗脱液。
11.室温5000-7000rpm离心2分钟，离心管中溶液即为RNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。
12. 重复10-11 步一次，大提离心吸附柱吸附能力较强，一般第二次洗脱能洗脱较第一次洗脱更多的RNA。
13. RNA 完整性的电泳检测：如果需要做Northern杂交，强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳，因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques，28：414，2000)。
14. RNA产量产率测定：将5-10μl RNA 溶于TE缓冲液中(pH在7.5-8.2之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1OD260 RNA=40μg/mL)，进而计算出RNA的产量(浓度×体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
15. RNA 纯度测定：无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1 之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关)，高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染，但一般不影响RT-PCR等反应。

疑难解答：
Q：上样孔里的红色荧光物一定是DNA污染吗？
A：不是。用TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳RNA时容易产生此现象，初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA通过碱基互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用TBE作电泳液的话)形成的复合物，加RNase处理后，这些红色荧光物(RNA)一般会消失。为避免此现象，建议最好使用甲醛变性胶电泳和RNA专用上样液(如RNA上样液)。
Q：如何确认和去处除污染的基因组DNA？
A：如果怀疑有DNA污染，可以用RNase处理RNA样品，然后再电泳。如果上样孔里的红色荧光物不消失，则表示是基因组DNA污染。进一步确认可以使用PCR扩增法。去除污染的DNA可以使用非酶的DNA去除剂DNA Scavenger或RNase-free DNase，由于RNase-free DNase一般都有残留的RNase污染，所以必须严格按照厂家提供的使用说明书进行操作。


北京MMLV逆转录酶多少钱关键词：MMLV Reverse Transcriptase,MMLV逆转录酶,BTN60905

GeneGreen核酸染料 
脂肪组织蛋白提取试剂盒 Adipose tissue protein extraction kit  50T|100T
ARB10716 人色素上皮衍生因子(PEDF)含量测试 Human pigment epithelium-derived factor,pedf ELISA KIT
BTN120705 L-谷胱甘肽(还原型) Glutathione
ARB10205 人β2糖蛋白1抗体IgG(β2-GP1 Ab IgG)含量检测 Human β2-glycoprotein 1 antibody igg,β2-gp1 ab igG ELISA KIT
气溶胶OT Iron(III) phosphate tetrahydrate 577-11-7
ARB12175 大鼠白血病抑制因子(LIF)elisa测定使用说明书 Rat leukemia inhibitory factor,lif ELISA KIT
PY02-436  改良绿色酵母菌和真菌肉汤  250克  
F010201 小鼠抗鸡IgG(IgY)抗体 Monoclonal Mouse Anti-Chicken IgG(IgY)
H1401 小鼠血浆(去红细胞、无菌过滤) 100ml/200ml/500ml
BTN3672 植物DNAOUT Plant DNAOUT
罗斯试剂(Rous Reagent)   2×100ml
ARB11899 人磷酸肌醇3激酶(PI3K)定量分析 Human phosphotylinosital 3 kinase,pi3k ELISA KIT
590-46-5 甜菜碱Betaine HCL 
Ficoll 400铺垫液(1.25%)   100ml
L-*甘*酸 Dicofol 2935-35-5
ARB10940 人低密度脂蛋白免疫复合物(LDL-IC)酶标法分析 Human ldl-ic ELISA KIT
ARB10151 人Runt相关基因2(RUNX2)elisa测定使用说明书 Human runt-related transcription factor 2,(runx 2)ELISA KIT
PY02-071  西蒙氏枸橼酸盐琼脂  250克  

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