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名称:Benzonase核酸酶厂家价格
品牌:百奥莱博
英文名:Benzonase Nuclease
编号:BTN101001
产地:国产|进口
产品简介:
Benzonase是由粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)分泌的、由两个大小为26 kD的亚基组成的一种广谱核酸酶,由Benzon公司最先商品化,故名Benzonase。其活力比DNase I强34倍,能以相同的效率酶切单联和双链DNA和RNA,将其消化成3-5碱基长度(杂交限度以下)的5’-单磷酸寡核苷酸。其活性需要Mg2+,最佳pH在6-10之间,最适温度在35-44℃。本产品是在野生型的Benzonase的基础上经过基因工程改进而得,它具有下列特点:
1.微量本产品就能高效降解所有形式(包括单链,双链,线性和环状)的DNA和RNA,尤其适合从细胞裂解物中去除核酸,降低样品粘度而不影响蛋白电泳图谱。
2.在有变性剂存在的条件下(如4M尿素)还有活性,可以直接加入很多蛋白裂解液中。
3.降解核酸完全,符合FDA关于核酸污染的处理规程,可以用于工业生产。
4.可以用于蛋白提取、2D凝胶电泳、Western Blot、免疫沉淀等实验。
酶储备液的配方是:50 mM Tris-HCl pH 8.0, 20 mM NaCl, 2mM MgCl2,50%甘油。
酶单位定义:在标准反应体系内30分钟内使OD260改变1.0的酶量,相当于彻底降解37 ug DNA的酶量。标准反应体系是: 1mg/mL的超声打断的DNA*(代"片")段,50 mM Tris-HCl pH8.0, 0.1 mg/mL BSA, 1mM MgCl2,37℃保温。
运输及保存:低温运输、-20℃保存,有效期两年。注意:不能放在-70℃保存。
使用方法:
一、酶的稀释
本产品浓度为1 U/uL,如果需要稀释Benzonase,需要自备酶稀释液,稀释液的配方是:50 mM Tris-HCl pH8.0, 20 mM NaCl, 2 mM MgCl2。在稀释液中的Benzonase只能在4℃放置数天。
二、用于去除核酸的标准试验(用户可以以此为参考设计自己的实验)
将500 ng鲑鱼精DNA溶解在50 mM Tris-HCl pH8.0,1 mM MgCl2, 0.1 mg/mL BSA中,然后加入90U 的Benzonase,37℃保温4小时,只剩下0.2 ng可以杂交检测的DNA,如果23℃保温4小时,只剩下0.5 ng可以杂交检测的DNA。如果0℃保温4小时,只剩下1 ng可以杂交检测的DNA。
二、用于降低E.coli裂解液的粘度的标准试验(用户可以以此为参考设计自己的实验)
将7.5 g E.coli 悬浮于15 mL悬浮液(10 mM Tris-HCl pH 9.0,1 mM EDTA,6 mM MgCl2)中,加入适量的本产品,然后将悬浮液经过弗氏压碎器破碎后迅速置于0℃冰上。
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·Lambda核酸外切酶
编号:BTN130628
英文名称:Lambda Exonulease
规格:1000U
产品简介:
Lambda 核酸外切酶作用于双链 DNA,沿 5" →3"方向逐步切去 5" 单核苷酸。
最适底物是 5" 磷酸化的双链 DNA,也能缓慢降解单链 DNA 和非磷酸化底物。该酶不能从 DNA 的切刻或缺口处起始消化。其反应示意图如下:
具体有下列特点:
1.高效5" →3" 核酸外切酶
2.切下双链 DNA 的 5" 单核苷酸
反应条件:
1X Lambda 核酸外切酶反应缓冲液 [67mM Glycine-KOH (pH 9.4 @ 25℃),2.5 mM MgCl2,50μg/ml BSA],37℃ 温育。
单位定义:
1 单位指在 50 μl 反应体系中,37℃条件下,30 分钟内能从双链 DNA 底物上催化产生 10 nmol 酸溶性脱氧核糖核苷酸所需的酶量。
Buffer 成分:
25 mM Tris-HCl,50 mM NaCl,1 mM DTT,0.1 mM EDTA,50% Glycerol,pH 8.0 @ 25℃
热失活:
75℃ 10 分钟。
备注:
5" -0H 端的切割速度比 5" -PO4 端慢 20 倍。单链 DNA 比双链 DNA 慢 100倍。
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,有效期半年。
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