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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 细胞类型:
原代细胞
- 供应商:
拓普生物
- 库存:
1×106个
- 英文名:
HuMSCs
- 生长状态:
贴壁培养
- 运输方式:
干冰运输(1 Vial)或活细胞运输(T-25 flasks)
- 器官来源:
脐带
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 物种来源:
人
- 组织来源:
脐带
产品简介
TopBiotech提供的人脐带间充质干细胞取自新鲜组织,按照标准操作流程分离培养。自主研发的人脐带间充质干细胞完全培养基(货号:TOPM0001)能提供细胞最佳的生长条件,降低杂细胞污染,同时保证不同批次间细胞质量的稳定。此外,TopBiotech还建立了严格的细胞鉴定流程,所提供的原代细胞均经过细胞类型特异性标记物、细胞形态学等检测来保证细胞纯度;同时也需要经过微生物检测,保证不含有HIV、HBV、HCV、支原体、真菌及其它类型的细菌和病毒。
细胞简介: 脐带间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells,MSCs)是指存在于新生儿脐带组织中的一种多功能干细胞,它能分化成许多种组织细胞,具有广阔的临床应用前景。脐带间充质干细胞(MSCs)具有较高的分化潜能,可向多个方向进行分化。它在骨、软骨、肌肉、肌腱、韧带、神经、肝、内皮和心肌等组织工程方面具有广阔的临床应用前景。从人脐带中分离出MSCs的细胞含量、增殖能力优于骨髓MSCs,免疫原性比骨髓MSCs低,并且具有取材方便,无伦理学争议等优点,因此越来越受到研究工作者们的关注。
组织来源:人脐带
产品规格:1×106/Vial(冻存细胞/干冰运输)或1×106/ T-25 flasks(活细胞运输)
细胞纯度:>95%
细胞活力:98%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
细胞检测:细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
培养信息:贴壁生长,上皮细胞样形态
细胞培养基:DMEM、 FBS、细胞因子等
细胞冻存:液氮冻存(完全培养基+10%DMSO+20%FBS)
我们推荐使用TopBiotech的人脐带间充质干细胞完全培养基(货号:TOPM0001)作为体外培养使用的培养基。
运输保存
干冰运输:收到细胞时,若干冰已经完全融化,请立即将细胞复苏培养;若尚留有干冰,请立即将细胞放入液氮中保存待用,请按指定条件贮存细胞,切不可将细胞置于高温环境。
常温运输:取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态;待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
一、细胞复苏
1. 将水浴锅预热至37℃。
2. 用75%酒精擦拭紫外线照射30min的超净工作台台面。
3. 在超净工作台中按次序摆放消过毒的离心管、吸管、培养瓶等。
4. 迅速将冻存管投入到已经预热的水浴锅中迅速解冻,并要不断的摇动,使管中的液体迅速融化,时间控制在1分钟左右。
5. 融解好的细胞迅速放进离心机中,2000r/min 或者600g离心2min。
6. 用4-5ml完全培养基重悬细胞,吹打制成单细胞悬液,细胞浓度以5×105/ml为宜。
7. 将复苏好的细胞悬液分装入培养瓶内,将培养瓶放入37℃和5%CO2的培养箱内,8-24小时后换液继续培养,换液时间由细胞生长情况而定。
二、传代培养
1. 细胞吸除或倒掉原瓶中的旧培养基(以25mL培养瓶为例)。
2. 每瓶加入2mL 的PBS,漂洗一次后倒掉。
3. 每瓶加入1mL消化液(0.25%胰蛋白酶或0.02%EDTA或混合液),轻轻摇动培养瓶,经消化液铺满所有细胞表面,待细胞层略有松动,肉眼可观察到“薄膜”现象时,倒掉消化液,再继续作用2~3分钟,轻轻摇动,细胞层可随残留的消化液呈片状从瓶壁上脱落下来,在显微镜下可发现细胞回缩变圆,细胞间隙增大,此时应立即终止消化。
4. 加入完全培养基5mL,用吸管反复吹打瓶壁上的细胞,吹打时要按顺序进行,以确保所有瓶壁均吹打到,吹打时动作要轻柔,不要用力过大,尽可能不要出现泡沫,以避免细胞的机械损伤。
5. 细胞用计数板计数,计算细胞的浓度,并用培养基调整适当的细胞浓度后再分瓶培养。
三、细胞冻存
1. 配制含10%DMSO、10~20%小牛血清的冻存培养液;
2. 取对数生长期的细胞,去除旧培养液,用PBS清洗。
3. 去除PBS,加入适量胰蛋白酶(覆盖培养皿表面)把单层生长的细胞消化下来;
4. 消化完成后加入完全培养基终止消化,收集细胞悬液1000rpm离心5min;
5. 去除上清,加入适量冻存培养液后轻轻吹打使细胞均匀,计数并调节冻存液中细胞的最终密度为5×106/ml~1×107/ml;
6. 将细胞分装入冻存管中,每管1~1.5 ml,在冻存管上标明细胞的名称,冻存时间及操作者;
7. 冻存:标准的冻存程序为降温速率-1~-2℃/ min;当温度达-25℃以下时,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃时,则可迅速浸入液氮中。也可将装有细胞的冻存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中过夜,最后取出冻存管,移入液氮容器内。
四、 注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后每天拍照记录细胞生长状态,便于和技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
备注:该细胞只可用于科研,由于实验所用试剂、 操作环境及操作手法的不同, 以上方法仅供各实验室参考。
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文献和实验人脐带间充质干细胞(MSCs)和集落形成样内皮前体细胞(ECFCs)的分离和其无动物血清的扩大培养
脐带是高增殖潜能祖细胞,诸如间充质干细胞(MSCs)和集落形成样内皮前体细胞(ECFCs)一个丰富的资料来源,本视频即示范分离和扩增培养脐带祖细胞的方法。 0:00 人脐带间充质干细胞(MSCs)和集落形成样内皮前体细胞(ECFCs)的分离和其无动物血清的扩大培养0 0:21 内容订阅21 1:33 内容简介93 2:14 制备脐带134 3:39 分离ECFCs219 6:56 ECFCs扩大培养416 8:42 MSCs扩大培养522 10:11
检测 •内毒素检测 • 霉浆菌检测 • 法定传染病检测 UltraGROTM 用于脐带间充质干细胞培养 • 脐带间充质干细胞,α-MEM • 细胞总数結果,相较于 20% Defined FBS (P3-P4) • 5% UltraGROTM 高出 3X • 平均倍增時間 25 hours
Biomaterialia》上发表文章,阐述了缺氧处理下间充质干细胞(MSCs)来源的外泌体(Hypo-Exos)比常氧下的外泌体(Exos)可进一步增强血管生成、增殖和迁移。此外,文中揭示了缺氧预处理通过激活 HIF-1α 介导了外泌体 miR-126 的产生,从而促进骨折的愈合。 图十 缺氧可促进人脐带间充质干细胞外泌体的释放 综上所述,外泌体既可以促进肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭,抑制肿瘤细胞凋亡,实现肿瘤的发展、转移和耐药,也可以增强神经元存活、血管生成等,从而作为神经系统疾病、代谢系统疾病的治疗
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