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人脐带间充质干细胞

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  • TOPBIOTECH
  • TOPCP0001
  • 2026年01月23日
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    • 细胞类型

      原代细胞

    • 供应商

      拓普生物

    • 库存

      1×106个

    • 英文名

      HuMSCs

    • 生长状态

      贴壁培养

    • 运输方式

      干冰运输(1 Vial)或活细胞运输(T-25 flasks)

    • 器官来源

      脐带

    • 是否是肿瘤细胞

    • 物种来源

    • 组织来源

      脐带

    人脐带间充质干细胞使用说明书
                                                      Cat NoTOPCP0001
    产品简介
    TopBiotech提供的人脐带间充质干细胞取自新鲜组织,按照标准操作流程分离培养。自主研发的人脐带间充质干细胞完全培养基(货号:TOPM0001)能提供细胞最佳的生长条件,降低杂细胞污染,同时保证不同批次间细胞质量的稳定。此外,TopBiotech还建立了严格的细胞鉴定流程,所提供的原代细胞均经过细胞类型特异性标记物、细胞形态学等检测来保证细胞纯度;同时也需要经过微生物检测,保证不含有HIVHBVHCV、支原体、真菌及其它类型的细菌和病毒。

    细胞简介: 脐带间充质干细胞(Mesenchymal Stem CellsMSCs)是指存在于新生儿脐带组织中的一种多功能干细胞,它能分化成许多种组织细胞,具有广阔的临床应用前景。脐带间充质干细胞(MSCs)具有较高的分化潜能,可向多个方向进行分化。它在骨、软骨、肌肉、肌腱、韧带、神经、肝、内皮和心肌等组织工程方面具有广阔的临床应用前景。从人脐带中分离MSCs细胞含量、增殖能力优于骨髓MSCs,免疫原性比骨髓MSCs低,并且具有取材方便,无伦理学争议等优点,因此越来越受到研究工作者们的关注。
    组织来源:人脐带
    产品规格:1×106/Vial(冻存细胞/干冰运输)或1×106/ T-25 flasks(活细胞运输)
    细胞纯度:>95
    细胞活力:98%(Viability by Trypan Blue Exclusion
    细胞检测:细胞不含有HIV-1HBVHCV、支原体、细菌、酵母和真菌
    培养信息贴壁生长上皮细胞样形态
    细胞培养基:DMEMFBS、细胞因子等
    细胞冻存:液氮冻存(完全培养基+10%DMSO+20%FBS
    我们推荐使用TopBiotech人脐带间充质干细胞完全培养基(货号:TOPM0001作为体外培养使用的培养基。 

    运输保存
    干冰运输:收到细胞时,若干冰已经完全融化,请立即将细胞复苏培养;若尚留有干冰,请立即将细胞放入液氮中保存待用,请按指定条件贮存细胞,切不可将细胞置于高温环境。
    常温运输:取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态;待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。 
    一、细胞复苏
    1.
    将水浴锅预热至37℃。
    2.
    75%酒精擦拭紫外线照射30min的超净工作台台面。
    3.
    在超净工作台中按次序摆放消过毒的离心管、吸管、培养瓶等。
    4.
    迅速将冻存管投入到已经预热的水浴锅中迅速解冻,并要不断的摇动,使管中的液体迅速融化,时间控制在1分钟左右。
    5.
    融解好的细胞迅速放进离心机中,2000r/min 或者600g离心2min
    6.
    4-5ml完全培养基重悬细胞,吹打制成单细胞悬液,细胞浓度以5×105/ml为宜。
    7.
    将复苏好的细胞悬液分装入培养瓶内,将培养瓶放入37℃和5CO2的培养箱内,8-24小时后换液继续培养,换液时间由细胞生长情况而定。
    二、
    传代培养
    1.
    细胞吸除或倒掉原瓶中的旧培养基(以25mL培养瓶为例)。
    2.
    每瓶加入2mL PBS,漂洗一次后倒掉。
    3.
    每瓶加入1mL消化液(0.25%胰蛋白酶或0.02%EDTA或混合液),轻轻摇动培养瓶,经消化液铺满所有细胞表面,待细胞层略有松动,肉眼可观察到“薄膜”现象时,倒掉消化液,再继续作用2~3分钟,轻轻摇动,细胞层可随残留的消化液呈片状从瓶壁上脱落下来,在显微镜下可发现细胞回缩变圆,细胞间隙增大,此时应立即终止消化。
    4.
    加入完全培养基5mL,用吸管反复吹打瓶壁上的细胞,吹打时要按顺序进行,以确保所有瓶壁均吹打到,吹打时动作要轻柔,不要用力过大,尽可能不要出现泡沫,以避免细胞的机械损伤。
    5.
    细胞用计数板计数,计算细胞的浓度,并用培养基调整适当的细胞浓度后再分瓶培养。
    三、
    细胞冻存
    1.
    配制含10%DMSO1020%小牛血清的冻存培养液;
    2.
    取对数生长期的细胞,去除旧培养液,用PBS清洗。
    3.
    去除PBS,加入适量胰蛋白酶(覆盖培养皿表面)把单层生长的细胞消化下来;
    4.
    消化完成后加入完全培养基终止消化,收集细胞悬液1000rpm离心5min
    5.
    去除上清,加入适量冻存培养液轻轻吹打使细胞均匀,计数调节冻存液中细胞的最终密度为5×106/ml1×107/ml
    6.
    将细胞分装入冻存管中,每管11.5 ml在冻存管上标明细胞的名称,冻存时间及操作者;
    7.
    冻存:标准的冻存程序为降温速率-1-2/ min;当温度达-25以下时,可增至-5-10/min;到-100时,则可迅速浸入液氮中。也可将装有细胞的冻存管放入-20冰箱2h ,然后放入-70冰箱中过夜,最后取出冻存管,移入液氮容器内。
    四、 注意事项
    1.
    培养基于4条件下可保存3-6个月。
    2.
    在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
    3.
    传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
    4.
    建议客户收到细胞后每天拍照记录细胞生长状态,便于和技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
    备注:该细胞只可用于科研由于实验所用试剂、 操作环境及操作手法的不同, 以上方法仅供各实验室参考。

     

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