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武汉康测科技有限公司
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全转录组测序
简介
全转录组是指某个物种或特定的细胞在某一功能状态下转录产生的所有RNA的总和，包括mRNA和非编码RNA（non-coding RNA）。针对非编码RNA的研究主要集中在具有调控作用的长非编码RNA（long non-coding RNA, lncRNA）和环形RNA（circle RNA, circRNA)。全转录组测序研究，可同时分析同一样本中的mRNA、lncRNA、circRNA，是研究细胞表型和功能的一个重要手段，可深入挖掘生命现象背后的转录调控问题。 LncRNA不编码蛋白，但可通过其保守的二级结构与蛋白、DNA和RNA相互作用，参与调控多种生物学过程，如指导染色质修饰、调控转录、转录后调控等。绝大多数lncRNA的生物学功能还不清楚，因此这是一片广阔的未知领域，具有极大的研究价值和意义。康测科技使用rRNA去除的方法来富集lncRNA和mRNA，之后进行建库测序，可分析lncRNA和mRNA的表达情况，并发现大量新的lncRNA。
康测技术优势
- 微量起始DNA建库技术
- 超短建库时间，整个文库构建可以在6h内完成
- 个性化定制，根据不同的研究目的和研究方向制定个性化的分析解决方案
- 捕获效率高、覆盖度好，确保精确的文库和高质量的数据
- 提供多种疾病研究的高级分析
建库方法 技术流程
分析结果展示
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文献和实验454测序仪的出现极大促进了测序业务的开展，科研人员已经将测序技术作为解决科研工作中许多常见 问题的利器。这是因为454测序仪在以下几个方面取得了质的突破：首先是解决了高通量测序问题；其次它简 化了样品准备步骤，将以往转化大肠杆菌扩增质粒的繁琐过程全部用简单的体外PCR扩增法替代了；最后， 它缩小了测序反应体积，节省了 试剂 。这样，454测序仪做到了以极其低廉的价格进行大规模平行测序反应。 它的测序规模之大、测序费用之低
如Corall total RNA seq library preparation kit，这一点可以忽略）。 利用所选的RNA样本和文库生成引物进行逆转录进行一链合成。 然后通过沿cDNA链随机引物进行第二链合成。 进行末端修复，接头连接。 最后进行PCR扩增，为文库添加index，或文库扩增以以获得足够量的文库，以及进行文库质量控制。 Lexogen mRNA-Seq文库准备与其他全转录组测序文库制备方法略微不同。在Lexogen mRNA-Seq文库准备中
HeliScope测序仪是由Quake团队设计开发的，它实际上也是一种循环芯片测序设备。不过，HeliScope 测序仪最大的特点是无需对测序模板进行扩增，它使用了一种高灵敏度的荧光探测仪直接对单链DNA模板进 行合成法测序。首先，将基因组DNA切割成随机的小片段DNA分子，并且在每个片段末端加上poly-A尾。然 后通过poly-A尾和固定在芯片上的poly-T杂交，将待测模板固定到芯片上，制成测序芯片。最后借助聚合酶 将荧光标记的单核苷酸掺入到引物
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