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的孔径极限则蛋白样品也不保留。在用反相色谱分离蛋白时,流动相中有机溶剂的比例会影响蛋白的保留值。有机溶剂比例过高,会使蛋白的样品与填料的作用变弱而过早地洗脱。流动相中的三氟乙酸可作为离子对试剂和pH调节剂,有利于蛋白的保留。 ②回收率(质量回收率)低 蛋白质量回收率低往往发生在使用凝胶过滤柱时,特别是以硅胶为基质的凝胶蛋白分析柱时,尽管硅醇基已经过双醇封口,但残留的硅醇基仍会与蛋白的碱性基团发生非GFC效应,造成回收率低,分离度差等现象,解决这一现象的方法是在流动相(通常是水)中加入0M
的可分离蛋白的分子量范围,若蛋白的分子量超过填料的孔径极限则蛋白样品也不保留。 在用反相色谱分离蛋白时,流动相中有机溶剂的比例会影响蛋白的保留值。有机溶剂比例过高,会使蛋白的样品与填料的作用变弱而过早地洗脱。流动相中的三氟乙酸可作为离子对试剂和pH调节剂,有利于蛋白的保留。 ②回收率(质量回收率)低 蛋白质量回收率低往往发生在使用凝胶过滤柱时,特别是以硅胶为基质的凝胶蛋白分析柱时,尽管硅醇基已经过双醇封口,但残留的硅醇基仍会与蛋白的碱性基团发生非GFC效应,造成回收率低,分离度差等现象,解决
1),能吸附或者交换溶液中的阳离子。在所有的pH条件下,这种官能团都能带上电荷。对所分析的阴离子化合物,其样品的pH值要比其pka小2个单位,以保证其带电荷。通常分析的化合物是强碱性或弱碱性的。固相萃取固定相的选择固相萃取技术最初是在临床研究和药物毒理学研究中用来从生物体液如血浆和尿液中分离药物。发展到现在,SPE技术已广泛用于环境监测中富集和提取痕量有机污染物,食品、蔬菜中农残检测,新药筛选和开发等众多领域。SPE的固定相种类也非常齐全,可根据待分离样品的性质和干扰组分的性质,选择不同的固定
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