北京现货MTS细胞增殖与细胞毒性检测试剂盒供应

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北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货MTS细胞增殖与细胞毒性检测试剂盒供应，我公司供应的细胞生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京现货MTS细胞增殖与细胞毒性检测试剂盒供应
规格：500T
品牌：百奥莱博
编号：KFS322
此试剂盒是用于测定细胞增殖与毒性试验中活细胞数目的一种高灵敏度，无放射性的比色检测法。该试剂盒单溶液试剂包含一种四唑化合物[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium,内盐；MTS] 和一个电子耦合试剂( 乙硫吩嗪，PES)。PES 的化学稳定性已得到增强，这使它能与MTS 混合形成一个稳定的溶液。

检测时，只需将少量MTS 溶液直接加到检测板孔德培养基中，孵育1-4 小时，然后酶标仪读取490nm的吸光度值就可，省掉了有机溶剂的溶解步骤，简化了实验过程，实验的灵敏度比其它如MTT, XTT 高。

注意事项
1. 本试剂盒的检测依赖于脱*酶催化的反应，如果待检测体系中存在较多的还原剂，例如一些抗氧化剂会干扰检测，需设法去除。
2. 如果待测溶液有还原性，测定不含细胞，但含有新型细胞增殖及毒性检测溶液在490 nm 处的空白吸光度。如果该吸光度很小，则可以直接加入此细胞增殖及毒性检测溶液，如果吸光度相对较大，则需要除去培养基，并用培养基洗涤细胞两次，然后加入新的200μl 培养基和10μl 新型细胞增殖及毒性检测溶液进行检测。
3. 用酶标仪检测前请确保孔内没有气泡，否则会干扰测定。
4. 为保证您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作方法1.96 孔板加入细胞100μL/孔（约1×104），置37℃ 5%CO2 细胞培养箱培养24 小时。2.加入适当浓度的受试化合物。3.将96 孔板在37℃，含5% CO2 空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。4.向各孔中加入10μl 的MTS 细胞增殖及毒性检测溶液。5.37℃下孵育1～4 小时。
6. 酶标仪在490nm 波长处检测每孔的光密度。

结果分析
1. 细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（完全培养基加新型细胞增殖及毒性检测溶液，无细胞）或空白药物孔OD 值（完全培养基加受试药物的不同稀释度加新型细胞增殖及毒性检测溶液，无细胞），各重复孔的OD 值取均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100
2. 求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)。

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·Caspase 2荧光法检测试剂盒(AFC)
编号：KFS201
英文名称：Caspase-2 Fluorescence Metric Assay
规格：20T|50T|100T
本试剂盒适用于培养细胞及新鲜组织Caspase-2 检测。Caspase 家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用，其中Caspase-2 为关键的执行分子，与DNA 断裂、染色质凝聚和凋亡小体形成有关。Caspase-2 在正常状态下以酶原的形式存在于胞浆中，没有活性；但在细胞发生凋亡阶段，它被激活，活化的Caspase-2 由两个大亚基和两个小亚基组成，裂解相应的胞浆胞核底物，最终导致细胞凋亡。Caspase-2 荧光检测试剂盒就是将Caspase-2 序列特异性的多肽偶联至发色基团。当底物被Caspase-2 剪切后，发色基团即游离出来，可通过荧光酶标仪测定其荧光强度（激发波长=485nm,发射波长=535nm）。

注意事项
1. Caspase-2 Substrate 避光保存及使用。
2. 对某些凋亡诱导剂引起的细胞凋亡可能存在非依赖于Caspase-2 活化的机制，这种情况时利用本试剂盒检测Caspase-2 活性无明显改变，需要考虑凋亡机制中的其他信号通路。
3. 细胞数量需达到3~5×106 个或新鲜组织50~100mg，以便能达到测定需要的100~200μg 蛋白的要求，因为Caspase-2 的活性与细胞裂解液的蛋白含量有关，如测定的RFU 值偏低，可以通过适当延长反应的时间，如果值还是不高，可通过增加细胞数量或组织量的方法来提高蛋白量。


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·细胞凋亡形态学检测试剂盒
编号：KFS285
英文名称：Apoptotic/Necrotic Cell Detection Kit
规格：100T
形态学检测是研究细胞凋亡的最基本方法。细胞凋亡的形态学变化是多阶段的，起初，细胞间连接和微绒毛消失，细胞体积缩小，胞浆凝缩，内质网变疏松并与胞膜融合，形成一个个空泡，核糖体与线粒体等细胞器聚集，结构尚无明显改变，细胞核内的染色质逐渐凝聚成新月状附在核膜周边，细胞核固缩呈均一的致密物，进而断裂成碎块，此时细胞膜仍保持完整：然后，胞膜及核膜不断出芽、脱落，一个细胞变成数个大小不等的有膜包裹的凋亡小体：最后凋亡小体被周围具有吞噬能力的细胞吞噬、消化。上述这些形态学的变化，可以通过本试剂盒中的染色及光学显微镜观察。

试剂盒组分：
Dye Reagent 1×10mL
Dye Reagent 2×1mL
Buffer A×10mL

注意事项：利用血球计数板进行该项操作时，不要用血计板配套的质地较硬的盖玻片，而用普通的盖玻片反而更利于结果的观察。

操作方法
1. 用适当的方法诱导细胞凋亡，消化收集细胞；
2. 用PBS 洗涤细胞二次，并调成浓度为1×106cells/ml 细胞悬液；
3. 吸取50~100μL 的细胞悬液均匀涂布于载玻片（A 片）上或用离心涂片机制片，室温晾干，甲醇固定5min；
4. 在A 片上滴加数滴100μL 的Dyes Reagent 1 室温染色1 min，用水轻轻洗去染液；
5. 在含体积分数为1%盐*(代"酸")的80%乙醇中分化10 s，流水冲洗1 min，晾干，显微镜下观察细胞的形态。
6. 在另一张涂有细胞并已于无水乙醇固定2min 的载玻片（B 片）上滴加100μL 染色液2（Dyes Reagent2 ：Buffer A=1:9 的混合液），室温染色5～20min，用水轻轻洗去染液，室温晾干；
7. 二甲*浸泡3 min，以去除杂质，使载玻片透明，最后树脂封片，显微镜下观察细胞形态；
8. 观察200-500 个细胞，计数凋亡细胞所占的比例。

结果分析A 片：凋亡细胞皱缩，胞膜完整。染色质凝聚，嗜碱性增强，染成深蓝色，呈环状或新月状附在核膜周围，或细胞核固缩碎裂成数个圆形颗粒，核膜消失。而坏死细胞体积增大，染色质变稀疏成网状，嗜碱性减低，染成淡蓝色，胞核破碎，细胞膜不完整。

B 片：凋亡细胞皱缩，胞膜完整。胞浆稀少或缺乏，染成淡红色，染色质凝聚，染成深紫色，细胞核固缩碎裂成数个圆形颗粒。

计算细胞凋亡率和死亡率：
细胞凋亡率=凋亡细胞/细胞总数×100%
细胞死亡率=坏死细胞/细胞总数×100%

储存：RT,避光，有效期12个月。


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