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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
422
- 英文名:
DAPI Stain Solution
- 保质期:
12个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括即用型DAPI染色液北京厂家在内的一系列细胞生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:即用型DAPI染色液北京厂家
品牌:百奥莱博
编号:RFT199
产地:国产|进口
规格:10ml
英文名:DAPI Stain Solution
本品是适用于常见细胞和组织细胞核染色的染色液。本DAPI染色液为即用型,可以直接用于固定细胞或组织的细胞核染色。
DAPI是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料。和双链DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光。和EB(ethidium bromide)相比,对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。 DAPI染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。 DAPI的最大激发波长为340nm,最大发射波长为488nm;DAPI和双链DNA结合后,最大激发波长为364nm,最大发射波长为454nm。
操作步骤:
1、对于细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行DAPI染色。如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的DAPI染色。
2、对于贴壁细胞或组织切片,加入少量DAPI染色液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞,至少加入待染色样品体积3倍的染色液,混匀。
3、室温放置3-5分钟。
4、吸除DAPI染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5分钟。
5、直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时,会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。
注意事项:
1、本DAPI染色液的浓度经过优化,确保可以满足各种常规染色的需要。
2、荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。
3、为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
4、DAPI对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
储存条件:-20℃避光,有效期12个月。
想要了解更多关于即用型DAPI染色液北京厂家的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联*(代"系")。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
·彩色预染超低分子量蛋白Marker(1.2~45kD)
编号:RFT043
英文名称:Rainbow pre dyeing ultra low molecular weight protein
规格:10T(50μl)
本蛋白Marker可以直接观察蛋白电泳及清晰判断Western Blotting的转膜效果。本产品包含3种多肽和3种低分子量蛋白质组成,分子量范围为1.2kD-45kD,分子量大小为 1.2kD,4.6kD,10kD,16kD,27kD,45kD (注:蛋白大小已在18%Tricine-SDS-PAGE中用非预染蛋白Marker标定过。
储存条件:-20℃。
·66KD蛋白Marker
编号:RFT041
英文名称:Rainbow pre dyeing ultra low molecular weight protein
规格:50mg
本产品包含一种已知分子量的标准蛋白质,分子量大小为66kD,可以用来判断SDS-PAGE未知蛋白的分子量。本品以干粉状态提供。
使用方法:
1、配制10mg/ml 66kD蛋白Marker母液:取10mg 粉末溶于1ml超纯水中。此溶液-20℃贮存。
2、按照下表配制Marker溶液
| 配制量 | 浓度 | 66KD母液(10mg/ml) | 超纯水 | 5×DualColor蛋白上样缓冲液 |
| 10μl | 0.2 μg/μl | 0.2μl | 7.8μl | 2μl |
| 50μl | 0.2 μg/μl | 1μl | 39μl | 10μl |
| 100μl | 0.2 μg/μl | 2μl | 78μl | 20μl |
3、取配制好的溶液彻底混匀后,95℃处理5分钟立即上样电泳,每次上样10μl。
4、电泳结束后,染色,观察结果。
储存条件:-20℃。
即用型DAPI染色液北京厂家关键词:即用型DAPI染色液,RFT199,DAPI Stain Solution
4-(2-吡*(代"啶")偶氮)间*二酚 5′-IDP,2Na 1141-59-9
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3483-12-3 二硫苏糖醇 DTT
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即用型DAPI染色液北京厂家关键词:即用型DAPI染色液,RFT199,DAPI Stain Solution
·SDS-PAGE凝胶制备及电泳试剂盒
编号:RFT076
英文名称:SDS-PAGE gel preparation and electrophoresis Kit
规格:50次
本公司提供的SDS-PAGE蛋白电泳试剂盒包含凝胶制备以及蛋白电泳所需的全部试剂。本试剂盒可配制至少50块常规大小的PAGE胶。
试剂盒组成:
| 组份 | 规格 | 保存条件 |
| 40%PAA(29:1) | 100 ml | 4℃ |
| 4×Tris/SDS分离胶缓冲液 pH8.8 | 100 ml | 4℃ |
| 4×Tris/SDS浓缩胶缓冲液 pH6.8 | 50 ml | 4℃ |
| APS(干粉) | 0.5 g | RT |
| TEMED | 0.5ml | 4℃,避光 |
| 4×蛋白电泳上样缓冲液(含还原剂) | 1 ml | -20℃ |
| 5×Tris-甘*酸电泳缓冲液(干粉) | 1 L | RT |
使用方法:
一、配制分离胶(各试剂使用量请参考表二)
根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度(表一),再按照下面的分离胶配方表(表二)配制SDS-PAGE的分离胶(即下层胶)。
表一:不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围:
| SDS-PAGE分离胶浓度 | 最佳分离范围 |
| 6% | 50-150kD |
| 8% | 30-90kD |
| 10% | 20-80kD |
| 12% | 12-60kD |
| 15% | 10-40kD |
配制分离胶前,根据以下配方准备10% APS:
10% APS配制-5 ml:将0.5 gAPS干粉溶于5 ml灭菌水中,彻底溶解后分装,1 ml/支,-20℃备存,每次取一管使用。10% APS应尽量减少室温存放时间,以防失效。10%APS在4℃有效期为一周,-20℃有效期6个月。若发现凝胶聚合时间延长,应考虑更换使用-20度保存的10%APS。
制备分离胶步骤:
1、参照凝胶模具说明书,装配好凝胶模具。
2、按照表二将不同体积的成分在小烧杯或试管中混合;加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
3、在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液(对于mini-gel,凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5 cm或距梳齿约0.5 cm即可),然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-5 cm的水层,使凝胶表面保持平整。
4、静置30-60分钟,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后,说明凝胶已聚合
表二:SDS-PAGE分离胶配方表
| 组份 | 不同凝胶体积对应各组份的取样量(ml) | |||
| 5ml | 10ml | 15ml | 20ml | |
| 8%胶 | ||||
| H2O | 2.7 | 5.4 | 8.1 | 10.8 |
| 4×Tris/SDS分离胶buffer pH8.8 | 1.25 | 2.5 | 3.75 | 5 |
| 40% PAA(29:1) | 1 | 2 | 3 | 4 |
| TEMED | 0.005 | 0.01 | 0.015 | 0.02 |
| 10% APS | 0.05 | 0.1 | 0.15 | 0.2 |
| 10%胶 | ||||
| H2O | 2.45 | 4.9 | 7.35 | 9.8 |
| 4×Tris/SDS分离胶buffer pH8.8 | 1.25 | 2.5 | 3.75 | 5 |
| 40% PAA(29:1) | 1.25 | 2.5 | 3.75 | 5 |
| TEMED | 0.005 | 0.01 | 0.015 | 0.02 |
| 10% APS | 0.05 | 0.1 | 0.15 | 0.2 |
| 12%胶 | ||||
| H2O | 2.2 | 4.4 | 6.6 | 8.8 |
| 4×Tris/SDS分离胶buffer pH8.8 | 1.25 | 2.5 | 3.75 | 5 |
| 40% PAA(29:1) | 1.5 | 3 | 4.5 | 6 |
| TEMED | 0.005 | 0.01 | 0.015 | 0.02 |
| 10% APS | 0.05 | 0.1 | 0.15 | 0.2 |
| 15%胶 | ||||
| H2O | 1.825 | 3.65 | 5.475 | 7.3 |
| 4×Tris/SDS分离胶buffer pH8.8 | 1.25 | 2.5 | 3.75 | 5 |
| 40% PAA(29:1) | 1.875 | 3.75 | 5.625 | 7.5 |
| TEMED | 0.005 | 0.01 | 0.015 | 0.02 |
| 10% APS | 0.05 | 0.1 | 0.15 | 0.2 |
二、浓缩胶制备:
1、去除覆盖在分离胶上的水层。
2、按照表三将不同体积成分在一个小烧杯或试管中混合;加入10%过硫*(代"酸")铵和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
3、将浓缩胶溶液加至分离胶的上面,直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
4、将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。
5、静置30-60分钟,等待浓缩胶聚合。
表三:SDS-PAGE浓缩胶(4%)配方表
| 组份 | 不同凝胶体积对应各组份的取样量(ml) | |||
| 2 ml | 4 ml | 5 ml | 10 ml | |
| H2O | 1.17 | 2.34 | 2.925 | 5.85 |
| 4×Tris/SDS浓缩胶buffer pH6.8 | 0.63 | 1.26 | 1.575 | 3.15 |
| 40% PAA(29:1) | 0.2 | 0.4 | 0.5 | 1 |
| TEMED | 0.002 | 0.004 | 0.005 | 0.01 |
| 10% APS | 0.02 | 0.04 | 0.05 | 0.1 |
三、电泳:
凝胶凝固好后,根据以下配方准备电泳缓冲液。
5×Tris-甘*酸电泳缓冲液的配制-1 L:将一包5×Tris-甘*酸电泳缓冲液干粉全部倒入1L烧杯中,加入约900 ml水彻底溶解,用水定容至1 L,即配成5×Tris-甘*酸电泳缓冲液(此溶液不用调节pH值)。用前再稀释5倍即配成1×Tris-甘*酸电泳缓冲液。在电泳槽的内槽内加入1×Tris-甘*酸电泳缓冲液(让电泳缓冲液漫过加样孔),轻轻的拨出梳子,随后在电泳槽外槽加入适量的1×Tris-甘*酸电泳缓冲液。上样,电泳,一般是浓缩胶80V,分离胶120V恒压,等指示前沿*酚兰电泳到分离胶下缘后,结束电泳,染色或者进行下一步实验。
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购即用型DAPI染色液北京厂家。
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