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分化诱导·分化标记
Stemsure® LIF, 小鼠, 重组
Stemsure® 系列使用小鼠ES细胞D3株进行实验测试(细胞增殖试验和菌落形成试验)和碱性磷酸酶(ALP)染色,是对细胞增殖和未分化能力有质量保证的产品系列。本产品是纯化自大肠杆菌中表达的小鼠LIF。可用于小鼠ES细胞的培养。
◆产品概述
● 表达:大肠杆菌(在C端含有6×His标签)
● 活性:10⁶ units/mL
● 单位的定义:在使用小鼠ES细胞株(D3株)的细胞增殖促进试验中,当达到最大增殖度的50%时,在此增殖度下产品使用量的1/20相当于1 unit
● 使用浓度:培养小鼠ES细胞株(D3株),建议使用终浓度为1,000units/mL
● 形状:D-PBS,1%BSA
● 0.2µm过滤灭菌
● 保存条件:-20℃保存。融解后请在2-10℃保存,并尽快使用。
◆试验项目
● 实用试验(小鼠ES细胞)
● 支原体检测
● 无菌试验
● ALP染色(小鼠ES细胞)
● 内毒素测试
等等。
◆细胞形态/未分化标记物在小鼠ES细胞D3株中的确认
●集落形态和ALP染色●
使用本产品培养小鼠ES细胞D3株,可以观察到小鼠ES细胞特有光泽的细胞集落。同时确认了ALP染色呈阳性。
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| 细胞形态确认 | ALP染色 |
●未分化标记物表达的确认●
使用本产品将小鼠ES细胞D3株继代培养8代,确认了各种未分化标记物呈阳性。
培养基组成
StemSure® D-MEM + 15% SSR + 2mmol/L L-Glutamine + 1×MEM Non-essential Amino Acids + 0.1mmol/L StemSure® 2ME + 1×Penicillin-Streptomycin + 1,000units/mL StemSure® LIF

产品信息
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文献和实验传统 ES 打靶 VS TurboKnockout® 基因敲除
上个世纪 80 年代,随着基因重组技术的不断完善和小鼠胚胎干细胞(ES)体外培养技术的成熟,基于同源重组的 ES 打靶得以建立。ES 打靶基因敲除技术修饰准确、效果稳定、成功率极高,一直被认为是对模式动物进行特定基因修饰的金标准。但由于嵌合体阳性率低,且必须与工具鼠交配才能获得删除 Neo 的杂合子,使得构建周期长达 12-16 个月。20 世纪初,核酸酶基因编辑技术(TALEN、CRISPR/Cas9)出现,其周期短(6~8 个月)、无物种限制等优势迅速受到广大科研学者的青睐。但由于脱靶
,以该抗体序列作为改造的基础,所以REAfinity抗体亲和力更高、特异性更好;REAfinity抗体本身背景值低、抗体与荧光素结合的优良工艺,二者保证了抗体的高染色指数。 美天旎 REAfinityTM 重组抗体——为流式而生 什么是REAfinity 抗体? REAfinity 抗体是一种重组基因工程改造抗体,是将传统的小鼠或大鼠杂交瘤来源的单克隆抗体的抗原结合区(Fab)与经过突变的人 IgG1 的恒定区(Fc)进行基因重组而成。 将传统的小鼠或大鼠杂交瘤来源的单克隆抗体的抗原结合区序列
比起其它公司的原核表达系列来说Invitrogen有个非常突出的地方就是它的重组克隆技术。像之前Novagen大部分载体都是用传统的酶切、链接方式做重组质粒,但是Invitrogen的表达系统大量运用了它的TOPO技术和Gateway技术。 虽然现在在许多做科研的学生看来,能出实验结果是最重要的,中间的过程不是那么重要。可是只有创新的技术才能推动科学不断的进步,比如:如果我们一直采用手工法测序,那真是不知道要猴年马月才能有人类基因组测序图谱,更难以进行
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