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- 详细信息
- 技术资料
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302
- 英文名:
Multiplex PCR MasterMix(UNG)
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京防污染多重PCR MasterMix(含UNG酶)优惠促销的品牌:百奥莱博,是优质的核酸扩增(PCR)产品,用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多防污染多重PCR MasterMix(含UNG酶)等核酸扩增(PCR)产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:北京防污染多重PCR MasterMix(含UNG酶)优惠促销
产地:国产|进口
英文名:Multiplex PCR MasterMix(UNG)
品牌:百奥莱博
规格:1ml
本品是由BaldStar Taq DNA Polymerase、Mg2+、dNTPs(含dUTP)、UNG酶以及PCR稳定剂等组成的PCR预混体系。使用本产品无需进行繁杂的PCR反应条件的优化过程,只需进行简单的条件摸 索即可轻松进行多重PCR反应。
本产品所含的BaldStar Taq DNA Polymerase是经化学修饰的热启动酶,可以有效 减少PCR反应初期因引物错配而产生的非特异扩增。独特的缓冲体系,使多重PCR反 应所有的引物都能有效延伸,无需额外优化。此MasterMix中还包含GC Enhancer,有 助于实现“困难”模板(比如,高GC含量的模板)的高效扩增。本产品运用dUTP-UNG 防污染系统,可有效去除了PCR产物的残留污染,大大降低了由于扩增产物污染而导 致的假阳性。UNG酶在PCR循环中的预变性步骤即可被灭活,因此不会影响新的含dU 碱基PCR产物的形成。
本品可有效防止PCR产物的残留污染,适用于防污 染多重PCR反应,比如微卫星分析、基因分型和SNP检测等。
北京防污染多重PCR MasterMix(含UNG酶)优惠促销正在火爆热销,除此之外,为您推荐下别热销产品:
·Western中分子量蛋白Marker
编号:WE0292
英文名称:Western MidiWT Protein Marker
规格:20次(100μl)
本品是专门为Western Blot实验设计的分子量标准。由4种不同分子量的蛋白组成(20 kD、35 kD、60 kD、110 kD),这四种蛋白都可与人、小鼠、大鼠、山羊、绵羊、兔的IgG恒定区结合,因此该Marker能与待检抗原在同一张胶片上曝光,阳性信号的分子量大小可以直接通过MidiWT的位置做出准确判断,无需后续图片拼接即可确定目的蛋白。另外该Marker还可以作为Western Blot实验的阳性对照。本产品不经过任何化学修饰,分子量精确,可以准确衡量目的蛋白的分子量大小,推荐上样量为5-10 µl。
注意事项:
1、本产品可直接使用,不需要加热。
2、将产品取出后于室温放置融化,务必使其完全融化,否则影响实验结果。
3、该产品与抗血清或高浓度多克隆抗体一起孵育时可能会出现非特异性条带,此时可降低该Western Blot Marker的上样量至2-5μl。
4、使用新配制的凝胶,及时更换电泳缓冲液和转膜液,以免影响实验结果。
操作步骤:
1、将产品取出后于室温放置融化。
2、温和地充分混匀,取5μl至上样孔中,进行SDS-PAGE电泳。
3、电泳完毕后将凝胶上蛋白转至NC或PVDF膜,依次孵育一抗、二抗。
4、孵育完毕并经充分洗涤后,将印迹膜与ECL工作液反应数分钟,使用X-光胶片曝光或化学发光成像。
实验图例
12%的聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳后转膜,化学发光法曝光结果。
储存条件:-20℃保存,避免反复冻融
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·抗GAPDH多克隆抗体
编号:WE0357
英文名称:Anti GAPDH Rabbit Polyclonal Antibody
规格:100μl
GAPDH(甘油醛-3-磷酸脱*酶)是参与糖酵解的一种关键酶,由4个36kDa的亚基组成。除参与糖酵解外,有证据表明哺乳动物细胞中的GAPDH参与了多种胞内生化过程,包括膜融合(membrane fusion)、微管成束(microtubule bundling)、磷酸转移酶(phosphotransferase)激活、核内RNA出核、DNA复制与DNA修复等。GAPDH蛋白几乎在所有组织中都高水平表达,常用于Western Blot检测中校正系统的内参。
抗体类型:亲和纯化兔多克隆抗体IgG
免疫原:人工合成多肽
应用范围:WB(1:1000-5000)、ELISA(1:1000-20000)
应用种属:人、大鼠
·DNATrans转染试剂
编号:WE0255
英文名称:DNATrans Transfection Reagent
规格:500μl
DNATrans是一种高效的阳离子脂质体转染试剂,适用于多种细胞的DNA转染。对于大多数细胞系包括原代细胞都有较高的转染效率,并且对细胞毒性极低。本转染试剂可应用于瞬时转染、稳定转染、共转染、高通量DNA转染,基因表达和基因功能研究。
实验前准备及重要注意事项
1、DNATrans Transfection Reagent使用前应先震荡摇匀。
2、转染效率与细胞密度有很大关系, 不同实验间应保持一个基本的传代步骤,确保转染时细胞没有长满或处于静止期。一般贴壁细胞转染的最佳细胞密度是80%-90%,悬浮细胞的最佳细胞密度为3-5×105细胞/ml,用于转染的最佳细胞度应根据不同的细胞类型或用途而异。
3、转染时不要在培养基中加入抗生素,否则会导致细胞死亡。
使用方法:
1、对于大部分的细胞系, DNA与DNATrans Transfection Reagent的比例在1:2至1:3时转染效率较高。为了提高转化效率、表达水平并且减少细胞毒性,实验应在细胞密度较大时进行转染。以下操作以24孔板每孔细胞的DNA转染操作为例。
a. 贴壁细胞:转化前一天,在24孔板的每孔中加入500μl无抗生素的生长培养基,并于每孔中接种0.5-2×105个细胞,待细胞长至80%-90%满时进行转染。
b. 悬浮细胞:在细胞转染之前,在24孔板的每孔中加入500μl无抗生素的生长培养基,并于每孔中接种3-5×105个细胞。
2、转染当天,首先准备转染复合物,对于每孔细胞按照以下用量配制:
a. 取适量DNA,加入25μl无血清培养基,并轻轻的混合均匀。
b. 取适量DNATrans Transfection Reagent,加入25μl无血清培养基,轻轻混匀,并于室温孵育5分钟。
c. 孵育5分钟之后,将稀释的DNA和稀释的DNATrans Transfection Reagent混合(使DNA以及DNATrans Transfection Reagent的终总体积为50μl),轻轻混合均匀,并在室温下孵育20分钟(溶液可能会出现絮状,但不会影响转染效率)。
注意:该混合物在室温下可以稳定保存6小时。
3、将步骤1中24孔板中培养的细胞生长培养基更换成450μl无血清培养基,然后将步骤2中50μl转染复合物加入到24孔板内,轻轻前后推动24孔板以混匀。
4、将细胞置于含5% CO2,37℃条件下培养4-6小时后,更换成500μl生长培养基。
5、18-48小时后进行转染基因表达的检测。
6、对于稳定的细胞系:在转染24小时后,细胞按照1:10的比例传代,第二天可加入筛选培养基进行筛选。
注意:
1)该说明为一个24孔的用量,若同时转几个孔,配制转染复合物的量需加倍;若转染其他类型孔板,DNA和DNATrans Transfection Reagent用量见附表,该附表用量以293T细胞为转染细胞时的标准用量。
2)转染4-6小时后也可以不更换生长培养基,但由于DNATrans Transfection Reagent具有一定的细胞毒性,作用时间过长可能使某些细胞出现大量死亡现象,建议更换生长培养基。
3)优化条件:想要得到更高的转染效率,应优化转染条件:培养物、DNA浓度、细胞数和细胞与DNA复合物的孵育时间等条件都应进行优化。
附表:293T细胞转染参考数据
| 培养板 | 每孔表面积 | 铺板用培养基体积 | DNA和稀释体积 | DNATrans Transfection Reagent和稀释体积 |
| 96孔 | 0.3cm2 | 200μl | 0.13μg至10μl | 0.5μl至10μl |
| 24孔 | 2cm2 | 500μl | 0.8μg至25μl | 2μl 至25μl |
| 12孔 | 4cm2 | 1ml | 1.6μg至50μl | 4μl至50μl |
| 35 mm | 10cm2 | 2ml | 4.0μg至100μl | 10μl至100μl |
| 6孔 | 10cm2 | 2ml | 4.0μg至100μl | 10μl至100μl |
| 60 mm | 20cm2 | 5ml | 8.0μg至500μl | 20μl至500μl |
| 10 cm | 60cm2 | 10ml | 24μg至800ml | 60μl至800μl |
储存条件:2~8℃,避光
北京防污染多重PCR MasterMix(含UNG酶)优惠促销关键词:Multiplex PCR MasterMix(UNG),防污染多重PCR MasterMix,含UNG酶,WE0126,防污染多重PCR MasterMix(含UNG酶)
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