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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
773
- 英文名:
MagBeads Gel DNA Extraction Kit
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
室温(15~30℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖北京WE0206型磁珠法琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒厂家在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:磁珠法琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
英文名:MagBeads Gel DNA Extraction Kit
编号:WE0206
本试剂盒提供了一种简单、快速、高效的用于琼脂糖凝胶DNA回收的方法。它可以从用TAE或TBE制成的琼脂糖凝胶中回收100 bp以上的DNA片段,回收效率高达80%。溶胶液将琼脂糖胶溶解后,磁珠选择性的吸附DNA片段。经漂洗后,洗脱得到的DNA纯度良好,可用于测序、酶切、PCR、克隆等下游实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 96次 |
| Buffer MG | 90ml |
| Buffer GW1 | 52ml |
| Buffer GW2 | 50ml |
| Buffer EB | 30ml |
| Magbeads PN | 2×1ml |
自备仪器及试剂:
1、手动单管提取:恒温混匀仪;2/15ml磁力架;异丙醇、无水乙醇
2、手动96孔深孔板提取:恒温混匀仪;废液抽吸系统;手动连续分液器;电动连续分液器;手动连续分液器分液管(25ml);96孔板磁力架;异丙醇;无水乙醇
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、电泳时最好使用新的电泳缓冲液,以免影响电泳和回收效果。
2、切胶时,紫外照射时间应尽量短,以免对DNA造成损伤。
3、Magbeads严禁冰冻、离心。冰冻和离心可能会对Magbeads造成不可逆的损害。
4、Magbeads使用前需涡旋震荡20秒使其充分混匀。
5、如Buffer MG中出现沉淀,请在50℃水浴锅中重新溶解,摇匀后即可使用。
6、首次使用前应按试剂瓶标签在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇并做好标记。
7、实验过程中,磁珠在溶液中的充分混匀对于提取的得率与纯度都有很大的影响。实验过程中务必使磁珠与溶液充分混匀。不同厂家生产的恒温混匀仪震荡混匀效果有一定差异,实验过程中请注意观察磁珠状态。如出现磁珠贴壁等未充分混匀的现象,请用移液器吹吸混匀或调整震荡频率。
操作步骤:
一、手动单管操作:
1、在长波紫外灯照射下将目的条带从琼脂糖凝胶中切下(尽量去除多余的琼脂糖凝胶),称重后将其放入干净的1.5ml离心管中。
2、向离心管中加入3倍胶体积的Buffer MG(如果胶块重0.1 g,其体积为100μl)后,将其放入50℃的水浴锅中孵育10分钟,期间每隔3分钟涡旋震荡5秒钟。
3、将离心管从水浴锅中取出,检测胶块是否完全融化以及溶液是否由黄色变成紫色(如胶块未完全溶解,将离心管放回水浴锅中继续孵育;如溶液颜色由黄色变成紫色,向离心管中加入10μl 3M的醋酸*溶液)。短暂离心后,将离心管室温放置5分钟。
4、向离心管中加入20μl充分混匀的Magbeads,涡旋震荡5秒钟后将其放入25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀5分钟或连续颠倒混匀10分钟。
5、将离心管放于磁力架上静置1分钟,待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后彻底弃去溶液(保持离心管固定于磁力架上)。
6、将离心管从磁力架上取下,加入750μl Buffer GW1后涡旋点震1分钟或涡旋震荡5秒钟后放于25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀2分钟(震荡过程中确保Magbeads处于混匀状态)。之后将离心管放于磁力架上静置2分钟,待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后轻轻颠倒磁力架将离心管盖上的杂质洗落后彻底弃去溶液(保持离心管固定于磁力架上)。
7、将离心管从磁力架上取下,加入750 ul Buffer GW2(使用前请检查是否已加入无水乙醇)后涡旋点震1分钟或涡旋震荡5秒钟后放于25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀2分钟(震荡过程中确保Magbeads处于混匀状态)。之后将离心管放于磁力架上静置2分钟,待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后轻轻颠倒磁力架将离心管盖上的杂质洗落后彻底弃去溶液(保持离心管固定于磁力架上)。
8、重复步骤7。
9、保持离心管固定于磁力架上,用移液器进一步去除离心管管底和管盖上的溶液,之后室温放置5-10分钟,使乙醇挥发干净。
注意:如果离心管侧壁上有液珠,可向离心管中加入750μl无水乙醇。盖盖后颠倒离心管(保持离心管固定于磁力架上),之后彻底弃去无水乙醇。
10、将离心管从磁力架上取下,加入30-100μl Buffer EB。涡旋震荡使磁珠完全悬浮于洗脱液中后将其放于50℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡洗脱10分钟,或将离心管放于50℃水浴锅中孵育10分钟,期间每隔3分钟涡旋震荡10秒钟。
11、将离心管放于磁力架上静置2分钟,待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后用移液器将洗脱液转移至新的离心管中-20℃保存备用。
二、手动96孔板操作:
1、在长波紫外灯照射下将目的条带从琼脂糖凝胶中切下(尽量去除多余的琼脂糖凝胶),称重后将胶块放入2ml 96孔深孔板(简称“深孔板”)中并记录每孔中的样品名称。
2、向深孔板中加入3倍胶块体积的Buffer MG(如果胶块重0.1 g,其体积为100μl),盖盖后将96孔板放入50℃的水浴锅中孵育10分钟,期间将深孔板放于25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀2次,每次10秒钟。
3、将深孔板从水浴锅中取出放于25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀5分钟,用8通道移液器向深孔板中加入20μl充分混匀的Magbeads。之后将深孔板固定于25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀5分钟。
4、将深孔板从恒温混匀仪上取下后放于96孔板磁力架上静置2分钟。用废液抽吸系统或8通道移液器弃去溶液,期间避免枪头接触磁珠。
注意:用废液抽吸系统去除溶液时需将真空泵调节至较小的负压力值,使溶液以一个合适的速度被吸走,速度过快会造成磁珠的丢失。
5.用手动连续分液器或8通道移液器向深孔板中加入500μl Buffer GW1(加入前检查是否已加入无水乙醇),之后将深孔板固定于25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀3分钟。
6、将深孔板从恒温混匀仪上取下后放于96孔板磁力架上静置2分钟。用废液抽吸系统或8通道移液器弃去溶液,期间避免枪头接触磁珠。
7、用手动连续分液器或8通道移液器向深孔板中加入500μl Buffer GW2(加入前检查是否已加入无水乙醇),之后将深孔板固定于25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀3分钟。
8、将深孔板从恒温混匀仪上取下后放于96孔板磁力架上静置2分钟。用废液抽吸系统或8通道移液器弃去溶液,期间避免枪头接触磁珠。
9、重复步骤7-8。
10、用手动连续分液器或8通道移液器向96孔深孔板中加入500μl无水乙醇,之后将深孔板固定于25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀1分钟。
11、将板从恒温混匀仪上取下后放于96孔板磁力架上静置2分钟。用废液抽吸系统或8通道移液器弃去溶液,期间避免枪头接触磁珠。
12、保持深孔板固定于96孔板磁力架上,将深孔板倒置于干净的吸水纸上放置2分钟。之后将深孔板从96孔板磁力架上取下放于100℃、1600 rpm的恒温混匀仪上静置5分钟。
13、用电动连续分液器或8通道移液器向深孔板加入50-100μl Buffer EB,之后将深孔板放于100℃(因该恒温混匀仪为悬空加热,洗脱液实际温度在50-60℃之间)、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀10分钟。
14、将深孔板从恒温混匀仪上取下后放于96孔板磁力架上静置2分钟,用8通道移液器溶液转移至96孔PCR板中盖盖后-20℃保存备用。
储存条件:室温(15~30℃)
关键词:WE0206,磁珠法琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒,MagBeads Gel DNA Extraction Kit
关于北京WE0206型磁珠法琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒厂家的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
| 编号 | 名称 |
| WE0136 | SuperSYBR Mixture(不含ROX校正染料) |
| WE0231 | DNA文库定量试剂盒(Illumina平台) |
| WE0314 | 免疫组化试剂盒(兔源一抗) |
| WE0226 | 人类基因组DNA |
| WE0376 | HRP标记山羊抗人IgM(Fc5μ) |
| WE0132 | cDNA第一链合成试剂盒 |
| WE0361 | 生物素标记驴抗小鼠IgG(H+L) |
| WE0239 | T4 DNA连接酶 |
| WE0223 | RNA酶抑制剂 |
| WE0212 | 蛋白酶K |
| WE0332 | 抗c-Myc标签单克隆抗体 |
| WE0125 | 高保真多重PCR Mix(下一代测序用) |
| WE0224 | RNase A溶液(10mg/ml) |
| WE0185 | 血块基因组DNA提取试剂盒 |
| WE0378 | 罗丹明标记山羊抗小鼠IgG(H+L) |
| WE0169 | 微量凝胶DNA回收试剂盒 |
| WE0265 | 细胞核/浆蛋白抽提试剂盒 |
| WE0237 | T4多聚核苷酸激酶(T4 PNK) |
| WE0277 | SDS-PAGE快速电泳液 |
| WE0157 | miRNA cDNA第一链合成试剂盒 |
| WE0322 | IHC复染试剂(改良型苏木素) |
| WE0387 | HRP标记兔抗山羊IgG(H+L) |
| WE0100 | PCR Mix(含染料)(滴瓶装) |
| WE0274 | 蛋白标准溶液BSA |
| WE0147 | 一步法Real-Time RT-qPCR试剂盒(荧光探针) |
| WE0270 | Protein G琼脂糖凝胶 |
| WE0234 | cfDNA文库定量试剂盒(Illumina平台) |
| WE0200 | 植物RNA提取试剂盒(含DNase I) |
| WE0142 | 快速实时荧光定量PCR预混体系(低含量ROX校正染料) |
| WE0313 | TBS(pH8.0,10×) |
| WE0194 | 病毒RNA提取试剂盒 |
| WE0285 | 0.5 M Tris-HCl缓冲液(pH6.8) |
| WE0324 | BCIP/NBT碱性磷酸酶显色试剂盒(WB IHC) |
| WE0369 | RRX标记驴抗大鼠IgG(H+L) |
| WE0342 | HRP标记抗GST标签多克隆抗体 |
| WE0350 | 抗HA标签多克隆抗体 |
| WE0211 | 6×UltraStain上样缓冲液 |
| WE0153 | 快速实时荧光定量PCR的预混体系(荧光探针)(高含量ROX校正染料) |
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文献和实验背景: 全血中提取DNA是一项古老又基本的分子生物学的工作,根据不同的下游的实验和分析,历史上使用方法种类非常多,传统酚氯仿抽提法,高盐盐析法,硅胶模离心柱吸附法,磁珠法,等等。各种方法都有自己的优点和缺点。不同的方法适合不同的下游实验需求。一直以来血样,尤其是病例血样的采集是一个很繁琐和高成本的问题。随着时代的发展,各种成本更是急剧上升,准确、清晰的采集血样的成本急剧上升的后果是研究工作者非常迫切需要一种试剂盒,可以一次性的尽可能的将采集到的最大血样量(1-10ml)的DNA
从全血中提取DNA是一项古老又基本的分子生物学的工作,根据不同的下游的实验和分析,历史上使用方法种类非常多,传统酚氯仿抽提法,高盐盐析法,硅胶模离心柱吸附法,磁珠法,等等。各种方法都有自己的优点和缺点。随着时代的发展,尤其是近年来,各种高通量的下游应用,比如血库HLA分型,芯片制作,遗传分析,市场需要一种低成本,速度快,操作简单,高通量的全血DNA提取方法。 在这个背景下,硅胶膜离心吸附柱型的产品成了很多客户的首选。 原因分析如下: 1. 随着技术的进步,尤其是PCR
的产物吸附不了即被损失掉。以下是我总结的常见问题,希望对大家有所帮助。Q1:利用凝胶回收试剂盒DNA回收效率较低或者未回收到目的片段?A1: 可能有以下几个原因:1. 胶块未完全溶解,溶解凝胶时应置于55℃水浴,可适当延长水浴时间,并增加上下颠倒次数,确定胶块完全溶解后再进行下一步骤;2. 胶块体积太大,应使用枪头捣碎,还不能充分溶解,则应先将其切为小块,分多次回收或选用大量型回收试剂盒;3.紫外灯下切胶时间过长,导致DNA部分降解,应尽量把切胶时间控制在30s以内;4. 电泳缓冲液pH太高,硅
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