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- 文献和实验
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- 库存:
681
- 英文名:
Taq DNA Polymerase
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖Taq DNA Polymerase厂家在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:Taq DNA Polymerase厂家
规格:500U|2500U|10000U
英文名:Taq DNA Polymerase
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
编号:WE0101
Taq DNA Polymerase是通过大肠杆菌表达纯化的重组酶。其基因来源于Thermus aquaticus polymerase。该蛋白分子量为94 kDa,具有5"→3"DNA聚合酶活性和5"→3"外切核酸酶活性,无3"→5"外切核酸酶活性,扩增得到的PCR产物3"端附有一个“A”碱基,因此可直接用于T/A克隆。本产品具有延伸速度快、扩增效率高的特点,主要适用于PCR法扩增DNA片段、DNA序列测定等实验。
产品组成:
| 组份 | 500 U | 2500 U | 10000 U |
| Taq DNA Polymerase(5 U/μl) | 100μl | 5×100μl | 2×1ml |
| 10×PCR Buffer | 1.8ml | 5×1.8ml | 8×5ml |
活性定义:用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在74℃,30分钟内,将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸性不溶物质所需的酶量定义为1个活性单位(U)。
质量控制:
1、经过多次柱纯化,SDS-PAGE检测其纯度大于99%;
2、经检测无外源核酸酶活性;
3、PCR方法检测无宿主残余DNA;
4、能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因;
5、室温存放一个月,无明显活性改变。
使用方法:
以下举例为以人基因组DNA为模板,扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系:
| 试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
| 10×PCR Buffer | 5μl | 1× |
| dNTP Mix,10 mM each | 1μl | 200μM each |
| Forward Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Reverse Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Template DNA | <0.5μg | <0.5μg/50μl |
| Taq DNA Polymerase | 0.25-0.5μl | 1.25-2.5 U/50μl |
| ddH2O | up to 50μl |
注意:引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。
2、PCR反应条件:
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 94℃ | 2min | |
| 变性 | 94℃ | 30s | 25-35个循环 |
| 退火 | 55-65℃ | 30s | |
| 延伸 | 72℃ | 30s | |
| 终延伸 | 72℃ | 2min |
注意:
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定,本产品Taq DNA Polymerase的扩增效率为2 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
想要了解更多关于Taq DNA Polymerase厂家的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联*(代"系")。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
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Taq DNA Polymerase厂家关键词:WE0101,Taq DNA Polymerase
·TMB底物显色试剂盒(可溶型,20×)
编号:WE0309
英文名称:Soluble TMB Kit(20×)
规格:100ml
TMB(3", 3", 5", 5", -四甲基联*(代"*")*(代"胺"))是辣根过氧化物酶(HRP)显色底物,是目前HRP系统ELISA实验的常用显色试剂。TMB显色底物工作液在HRP的催化下,形成蓝色的阳离子产物,在370 nm和652 nm处有主要吸收峰。加酸终止反应后,蓝色转变为黄色,可以在450 nm波长下测定。本试剂盒使用方便,灵敏度高,效果稳定,颜色产物为可溶性,适用于ELISA,不推荐用于IHC实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 100ml |
| 20×T MB-A | 5ml |
| 1×TMB-B | 2×50ml |
注意事项:
1、显色工作液应即用即配,放置超过10分钟会影响显色效果。
2、TMB颜色底物显色后,随着时间的延长,颜色会逐渐消退,因此显色并终止反应后应尽快读值,否则会影响检测的准确性。
3、以96孔酶标板每孔用量100μl显色工作液计算,5ml 20×TMB Kit 可完成1000孔样品的检测。
4、本产品仅限于科研,不能用于人体实验或人体治疗。
操作步骤:
1、TMB显色工作液配制:
根据实验需用量,将20×TMB-A和1×TMB-B以1:19的比例均匀混合,即配制成为TMB显色工作液。
2、显色:
1)经HRP标记物孵育并充分洗涤后,酶标板每孔中加100μl TMB显色工作液。
2)室温避光孵育25-30分钟,反应产物呈蓝色。
3)每孔加50μl 0.5M H2SO4 终止显色,此时蓝色产物变为亮黄色。
4)将酶标板置于酶标仪中,450 nm波长下读取数据。
储存条件:2~8℃
Taq DNA Polymerase厂家关键词:WE0101,Taq DNA Polymerase
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我公司正在优惠促销核酸扩增(PCR)等系列产品,期待您的咨询选购Taq DNA Polymerase厂家。
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文献和实验out the E.coli strain carrying the Taq polymerase gene on an LB amp plate and innoculate a 5 ml overnight culture with a single colony.• Innoculate a 1 liter culture of LB-amp with the 5 ml of overnight culture and grow to an A600 of 0.2.Add IPTG to a final
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Dideoxy Sequencing Reactions Using Taq Polymerase
Tuq DNA polymerase is a highly stable polymerase isolated from the thermophilic organism Thermus aquaticus . Because of its unique properties this enzyme has been extensively used for amplification of DNA fragments by the polymerase chain
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