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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
377
- 英文名:
Blood Genomic DNA Batch Extraction Kit
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
室温(15~30℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货WE0188型血液基因组DNA批量提取试剂盒(96孔板)哪里买,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京现货WE0188型血液基因组DNA批量提取试剂盒(96孔板)哪里买
编号:WE0188
品牌:百奥莱博
规格:4×96次
本试剂盒适用于从新鲜或冷冻全血(带有抗凝血剂,如柠檬酸盐、EDTA或肝素等)、血浆、血清、血沉棕黄层、骨髓、无细胞体液等样本中的总DNA,包括基因组DNA,线粒体DNA及病毒DNA。本试剂盒广泛的应用于临床样品的检测,可以同时处理96个样品,采用96孔吸附板可以特异性吸附结合DNA,经过纯化的DNA产量高、质量好,最大限度去除蛋白、色素、脂类及其他抑制性杂质污染,可直接用于PCR、Real-Time PCR、酶切和Southern Blot等实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 |
| Buffer RCL | 2×500ml |
| Buffer GR | 2×50ml |
| Buffer GL | 2×50ml |
| Buffer GW1(浓缩液) | 2×52ml |
| Buffer GW2(浓缩液) | 2×50ml |
| Buffer GE | 60ml |
| 蛋白酶K | 90 mg |
| 蛋白酶K 储存液 | 2×5ml |
| 吸附板及收集板 | 4套 |
| 收集板 | 4块 |
| 封板膜 | 16张 |
保存条件:Buffer RCL 2~8℃,其他组分室温(15~30℃)。
自备试剂:无水乙醇。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、向蛋白酶K 中加入9ml 蛋白酶K 储存液使其溶解,-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置,避免反复冻融,以免影响其活性。
2、样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
3、第一次使用前应按试剂瓶标签说明先在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
4、使用前请检查Buffer GL是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请将Buffer GL于56℃水浴重新溶解。
5、实验前配制Buffer GL与蛋白酶K 的混合溶液,每200μl Buffer GL中加入20μl蛋白酶K ,该溶液最好现用现配,在使用前配制时间最多不超过1小时。
6、使用排枪时注意不要打湿96孔板孔口,以防止离心过程中有液体溅出产生交叉污染。
操作步骤:
1、样本处理:
a. 将200μl样本加到收集板中。不足200μl的样本,加Buffer GR补足至200μl。
b. 样本超过200μl,且不超过600μl时,将血液样本加到收集板中,加入样本2倍体积
的Buffer RCL,吹打20次混匀,加盖新的封板膜,3600 rpm(~1200×g)离心10分钟。揭去封板膜,吸弃上清(可留下100μl液体以避免吸到细胞沉淀)。再加入样本2倍体积的Buffer RCL,吹打10-20次混匀,加盖新的封板膜,3600 rpm离心10分钟。揭去封板膜,吸弃上清,剩余约200μl液体。
注意:
1)在收集板上做好标记,以方便后续实验对样品的辨识。
2)如果样品为鸟类的血液,建议样品用量少于10μl。
2、配制Buffer GL与蛋白酶K 的混合溶液:按照200μl Buffer GL中加入20μl的蛋白酶K 的比例配制,混匀。
3、向每孔中加入220μl Buffer GL与蛋白酶K 的混合溶液,吹打20次,混匀。加盖新的封板膜,短暂离心,使管壁和管盖上的液体集中到管底。
4、56℃孵育10分钟。
注意:孵育10分钟DNA的产量已经达到最大,继续延长孵育时间对DNA产量和纯度没有影响。
5、揭去封板膜,加入200μl无水乙醇,吹打20次,混匀。短暂离心,使管壁和管盖上的液体集中到管底。
6、将步骤5所得溶液全部加入到已装入收集板的吸附板中,若一次不能加完溶液,可分多次转入。3600 rpm离心5分钟。倒掉收集板中的废液,将吸附板重新放回收集板中。
7、向吸附板每孔加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否加入无水乙醇),3600 rpm离心5分钟。倒掉收集板中的废液,将吸附板重新放回收集板中。
8、向吸附板每孔加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否加入无水乙醇),3600 rpm离心5分钟。倒掉收集板中的废液,将吸附板重新放回收集板中。
9、3600 rpm离心10分钟,倒掉收集板中废液。将吸附板置于室温数分钟以彻底晾干。
注意:这一步的目的是将吸附板中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
10、将吸附板置于一个新收集板中,向吸附板每孔中间部位悬空加入80-200μl Buffer GE或灭菌水,室温放置2-5分钟,3600 rpm离心10分钟,收集DNA溶液,加盖新的封板膜。-20℃保存DNA。
注意:
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感,可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响,若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围),pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。
3)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响,如需长期保存,推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。
储存条件:室温(15~30℃)。
北京现货WE0188型血液基因组DNA批量提取试剂盒(96孔板)哪里买极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·RRX标记驴抗大鼠IgG(H+L)
编号:WE0369
英文名称:Donkey Anti-Rat IgG, Rhodamine Red-X Conjugated
规格:100μl
本产品为RRX标记的经抗原亲和纯化的驴抗体,特异识别大鼠IgG重链和轻链,检测灵敏度高,本底低。Rhodamine Red-X(RRX)是近年新开发的一种荧光素,被激发后产生较明亮的红色荧光。它比普通的荧光更加明亮,更加不容易淬灭,且背景更低。由于其发射波长介于Cy2(或FITC)和Cy5中间,且重叠较少,RRX可与Cy2和Cy5一起用于同一样本的多重标记检测。
免疫原:大鼠IgG
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂:0.05%叠氮*
荧光团:Rhodamine Red-X,Amax=570; Emax=590
应用范围:对于大多数实验(1:50-200)
·0.5 M Tris-HCl缓冲液(pH6.8)
编号:WE0285
英文名称:0.5 M Tris-HCl(pH6.8)
规格:500ml
本产品为RRX标记的经抗原亲和纯化的驴抗体,特异识别大鼠IgG重链和轻链,检测灵敏度高,本底低。Rhodamine Red-X(RRX)是近年新开发的一种荧光素,被激发后产生较明亮的红色荧光。它比普通的荧光更加明亮,更加不容易淬灭,且背景更低。由于其发射波长介于Cy2(或FITC)和Cy5中间,且重叠较少,RRX可与Cy2和Cy5一起用于同一样本的多重标记检测。
免疫原:大鼠IgG
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂:0.05%叠氮*
荧光团:Rhodamine Red-X,Amax=570; Emax=590
应用范围:对于大多数实验(1:50-200)
·IHC复染试剂(改良型苏木素)
编号:WE0322
英文名称:Improved-Hematoxylin
规格:10ml
苏木精是一种碱性染料,它被氧化后生成氧化苏木精即苏木素后,可将细胞核和细胞内核糖体等嗜碱性结构染成蓝紫色,是常用的细胞核复染试剂。本产品是经改良的Mayer’s苏木素,不含酒精,可用于免疫组化DAB或AEC显色后的细胞核复染。其染色强度适中,一般不需要进行分化处理。复染后核着色鲜亮,背景清晰。
注意事项:
1、操作时应佩戴手套。
2、如核染色过深,可用1%盐*(代"酸")酒精分化适当液分化后,再用PBS或去离子水浸泡切 片3-5分钟,使胞核返蓝。
3、为得到最佳实验结果,请根据实验具体需求,调整试剂用量。
操作步骤:
1、免疫组化常规操作完成后,DAB或AEC显色(HRP系统)。
2、显色强度合适时,用自来水冲洗终止显色。
3、甩去样品上的自来水,滴加适量改良型苏木素以覆盖整个组织,复染30秒至3分钟。
4、用自来水完全冲洗掉复染液,PBS或去离子水浸泡切片3-5分钟,使胞核返蓝。
5、脱水、透明、封片。
实验图例:
乳腺癌 CK19 胞浆阳性使用DAB显示试剂盒(WE0323)显色,改良型苏木素(WE0322)复染,结果图
储存条件:室温
北京现货WE0188型血液基因组DNA批量提取试剂盒(96孔板)哪里买关键词:血液基因组DNA批量提取试剂盒(96孔板),WE0188,Blood Genomic DNA Batch Extraction Kit
·FITC标记兔抗山羊IgG(H+L)
编号:WE0385
英文名称:Rabbit Anti-Goat IgG, FITC Conjugated
规格:100μl
本产品为FITC标记的经亲和纯化的兔抗体,特异识别山羊IgG,检测灵敏度高,本底低,常用于免疫荧光和流式细胞等标记检测。
免疫原:山羊IgG
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂:0.05%叠氮*
荧光团:FITC,Amax=492; Emax=520
应用范围:Immunofluorescence(1:25-100)
·植物基因组DNA提取试剂盒
编号:WE0173
英文名称:Plant Genomic DNA Extraction Kit
规格:50次|200次
本试剂盒适用于从植物组织和植物干粉中提取总DNA,包括基因组DNA,线粒体DNA以及叶绿体DNA。本品可以处理多至100 mg的样本,可纯化获得最大为50 kb的DNA,多数片段在20-30 kb之间。本试剂盒采用先进的硅胶膜技术和简单的离心程序,无需乙醇沉淀,简单快速地分离得到高纯度的DNA,有效去除PCR和其他酶促反应的抑制剂。本品可以在1小时内完成总DNA的提取, 纯化得到的DNA可以直接用于酶切、 PCR、 Real-Time PCR、 文库构建、 Southern Blot、分子标记等下游实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 | 200次 |
| Buffer GP1 | 40ml | 160ml |
| Buffer GP2 | 40ml | 160ml |
| Buffer GW1(浓缩液) | 13ml | 52ml |
| Buffer GW2(浓缩液) | 15ml | 50ml |
| Buffer GE | 15ml | 60ml |
| 吸附柱DM及收集管 | 50套 | 200套 |
自备试剂:β-巯基乙醇、*仿、无水乙醇。
注意事项:
1、样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。
2、Buffer GP1在使用前请加入β-巯基乙醇,1ml Buffer GP1加1μl β-巯基乙醇。加入β-巯基乙醇的Buffer GP1室温可保存1个月。
3、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
4、使用前请检查Buffer GP1和Buffer GP2是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请将Buffer GP1和Buffer GP2于65℃水浴重新溶解。
5、如果下游实验对RNA污染比较敏感,可以在加入Buffer GP1孵育后,加入4μl DNase-Free的RNase A(100 mg/ml),RNase A本试剂盒并未提供,如需要可单独向本公司订购,货号:WE0225S。
操作步骤:
1、取植物新鲜组织约100 mg或干重组织约20 mg,加入液氮充分研磨。
2、将研磨后的粉末收集到离心管(自备)中,加入700μl 65℃预热的Buffer GP1(使用前在预热的Buffer GP1中加入β-巯基乙醇,使其终浓度为0.1%),迅速颠倒混匀后,将离心管置于65℃水浴20分钟,水浴过程中颠倒离心管混匀样品数次。
注意:如需去除RNA,可在上述步骤完成后,加入4μl浓度为100 mg/ml 的RNase A溶液(货号:WE0225S),震荡混匀,室温放置5-10分钟。
3、加入700μl *仿,充分混匀,12000rpm(~~13400×g)离心5分钟。
4、小心将上层水相转入一新的离心管(自备)中,加入700μl Buffer GP2,充分混匀。
5、将步骤4中所得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱DM中。若一次不能加完溶液,可分多次转入。12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
6、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
注意:如需进一步提高DNA纯度,可重复步骤7.
8、12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR 等)。
9、将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中,向吸附柱的中间部位悬空加入50-100μlBuffer GE或灭菌水,室温放置2-5分钟,12000rpm离心1分钟,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。
注意:
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感,可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响,若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围),pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。
3)用另外的50-100μl Buffer GE或灭菌水再次洗脱可以增加产量。
4)如果要提高DNA的终浓度,可以将步骤9所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上,重复步骤9;若洗脱体积小于100μl,可以增加DNA的终浓度,但可能会减少总产量。如果DNA的量小于1μg,推荐用50μl Buffer GE或灭菌水洗脱。
5)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响,如需长期保存,推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。
储存条件:室温(15~30℃)。
北京现货WE0188型血液基因组DNA批量提取试剂盒(96孔板)哪里买关键词:血液基因组DNA批量提取试剂盒(96孔板),WE0188,Blood Genomic DNA Batch Extraction Kit
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