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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
478
- 英文名:
SuperPure RNA Extraction Kit
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
室温(15~30℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括超纯RNA提取试剂盒折扣价在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:超纯RNA提取试剂盒折扣价
英文名:SuperPure RNA Extraction Kit
规格:50次|200次
编号:WE0192
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
本试剂盒是基于TRIzon改进后的柱式总RNA提取试剂盒,裂解液充分裂解并匀质化样本,采用独特的硅基质膜吸附技术,通过离心吸附柱在高盐状态下高效专一的结合溶液中的RNA,同时最大限度的有效除去蛋白质、无机盐离子及有机杂质等;可从动物组织、植物材料、各种微生物及培养细胞等样品中快速提取总RNA,每次可处理 30-50 mg组织或5×106细胞,可同时处理多个不同样品。本试剂盒提取得到的RNA可直接应用于RT-PCR、Northern Blot、Dot Blot、体外翻译等实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 |
| TRIzon Reagent | 60ml |
| Buffer RW1 | 40ml |
| Buffer RW2(浓缩液) | 11ml |
| RNase-Free Water | 10ml |
| 吸附柱RM及收集管 | 50套 |
| RNase-Free离心管(1.5ml) | 50个 |
保存条件:TRIzon Reagent 2~8℃避光保存,其他组分室温(15~30℃)。
自备试剂:*仿(新开封或提取RNA专用)、70%乙醇(无RNase水配制)、无水乙醇。
产品特点:
1、纯度高:最大限度除去蛋白质等杂质,提取的RNA可直接用于下游各种实验。
2、提取量大:独特的裂解液配方,充分裂解细胞或组织,RNA提取量多至100μg。
3、快速:步骤少,操作简单,节省时间。
4、兼容性强:适用于多种动植物组织和细胞RNA的提取。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、预防RNase污染,应注意以下几方面:
1)使用无RNase的塑料制品和枪头,避免交叉污染。
2)玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4小时,塑料器皿可在0.5 M的NaOH中浸泡10分钟,用水彻底冲洗后高压灭菌。
3)配制溶液应使用无RNase的水。
4)操作人员戴一次性口罩和手套,实验过程中要勤换手套。
2、样品应避免反复冻融,否则影响RNA提取得率和质量。
3、使用前若发现TRIzon Reagent有沉淀,可置于56℃水浴几分钟,即可溶解。
4、第一次使用前应按照试剂瓶标签说明在Buffer RW2中加入无水乙醇。
5、所有离心步骤若无特殊说明均在室温下进行,且所有操作步骤动作要迅速。
6、若下游实验对DNA非常敏感,建议用不含RNase的DNase I(货号:WE0213S)对RNA进行处理。
操作步骤:
1、样品处理
①植物组织:取新鲜植物组织在液氮中充分研磨或将植物组织剪碎后直接在TRIzon Reagent中迅速研磨,每30-50 mg组织加入1ml TRIzon Reagent,混匀。
注意:样品体积一般不要超过TRIzon Reagent体积的10%。
②动物组织:取新鲜或-70℃冻存的动物组织尽量剪碎,每30-50 mg组织加入1ml TRIzon Reagent,匀浆仪进行匀浆处理。或在液氮中研磨后加入TRIzon Reagent 1ml混匀。
注意:样品体积一般不要超过TRIzon Reagent体积的10%。
③单层培养细胞:吸去培养液,可直接在培养板中加入适量TRIzon Reagent(每10cm2 面积需要1ml TRIzon Reagent),用取样器反复吹打使细胞裂解。也可用胰蛋白酶处理后,将细胞溶液转移至RNase-Free的离心管中,300×g离心5 min,收集细胞沉淀,仔细吸除所有上清,加入TRIzon Reagent 1ml混匀。
注意:
1)收集细胞数量不要超过1×107。
2)TRIzon Reagent加量根据培养板面积决定,不是由细胞数决定。如果TRIzon Reagent加量不足,可能导致提取的RNA中有DNA污染。
3)收集细胞时一定要将细胞培养液去除干净,否则会导致裂解不完全,造成RNA的产量降低。
④细胞悬液:离心收集细胞。每5×106-1×107动物、植物和酵母细胞或每107细菌细胞加入1ml TRIzon Reagent。
注意:
1)加入TRIzon Reagent前不要洗涤细胞,以免RNA降解。
2)一些酵母和细菌细胞可能需要匀浆仪或液氮研磨处理。
⑤血液处理:直接取新鲜的血液,加入3倍体积的TRIzon Reagent(推荐0.25ml全血加入0.75ml TRIzon Reagent),充分振荡混匀。
⑥可选步骤:对于蛋白、脂肪、多糖或胞外物质含量高的样品,如肌肉组织、脂肪组织或植物的块茎,可以在匀浆处理后4℃,12000rpm(~~13400×g)离心10分钟以除去不溶物质,此时沉淀中含胞外物质、多糖和高分子量的DNA,而RNA存在于上清中。
2、样品中加入TRIzon Reagent后反复吹打几次,使样本充分裂解。室温放置5分钟,使蛋白核酸复合物完全分离。
3、以每1ml TRIzon Reagent加入200μl*仿的比例加入*仿,盖好管盖,剧烈振荡15秒,室温放置2分钟。
4、4℃ 12000rpm(~~13400×g)离心10分钟,此时样品分为三层:红色有机相,中间层和上层无色水相,RNA主要在上层水相中,将上层水相移到一个新的RNase-Free离心管(自备)中。
5、在得到的水相溶液中加入等体积的70%乙醇(无RNase水配制),颠倒混匀。
6、将上步所得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱中。若一次不能加完溶液,可分多次转入。12000rpm离心20秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入700μl Buffer RW1,12000rpm离心20秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
8、向吸附柱中加入500μl Buffer RW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心20秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
9、重复步骤8。
10、12000rpm离心2 分钟,倒掉收集管中废液。将吸附柱置于室温数分钟,彻底晾干。
注意:这一步目的是将吸附柱中残余乙醇去除,乙醇残留会影响后续酶促反应(酶切、PCR等)。
11、将吸附柱置于一个新的无RNase离心管中,向吸附柱的中间部位加入30-50μl RNase-Free Water,室温放置1分钟,12000rpm离心1分钟,收集RNA溶液,-70℃保存RNA,防止降解。
注意:
1)RNase-Free Wate体积不应小于30μl,体积过小影响回收率。
2)如果要提高RNA的产量,可用30-50μl新的RNase-Free Water重复步骤11。
3)如果要提高RNA浓度,可将得到的溶液重新加入到吸附柱中,重复步骤11。
储存条件:室温(15~30℃)。
我公司的超纯RNA提取试剂盒折扣价,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
·无RNA酶水
编号:WE0217
英文名称:RNase-Free Water
规格:100ml
本品为不含RNase的水,常用于RNA的提取纯化、RT-PCR等分子生物学实验。
·结核分枝杆菌基因分型试剂盒(HV-3)
编号:WE0119
英文名称:TB Typing Kit(HV-3)
规格:50次
本试剂盒是以分子流行病学最新研究进展为基础,经工艺优化后形成的人型结核分枝杆菌基因分型产品。本产品利用结核分枝杆菌基因组中可变数目串联重复序列(variable-number tandem repeats, VNTR)多态性进行基因型分型区分临床菌株,是研究结核分枝杆菌分子流行病学和监测结核病传播状况的有力工具。与现有其它基于VNTR原理的结核分枝杆菌VNTR分型系统相比,这一分型系统对中国流行的菌株具有更强的分辨能力 ,因此特别适合于中国用户的需求。
通过对各PCR反应引物序列和预混反应液成份进行精心优化,使得本产品具有很强的抗干扰力。与用户自配试剂相比,本产品显著提升了特异条带信号强度,降低了使用粗制模板(煮沸菌液)时非特异条带的出现率,使实验操作更加简便、快捷的同时,提高了检测成功率。本产品的预混反应液化学稳定性良好,能有效抵抗反复冻融(10次)和较长时间(一周)的室温环境,更好地适应了用户检测工作中的灵活性需求。
本试剂盒是TB基因分型试剂盒VNTR-9(货号WE0118)的配套产品。对VNTR-9试剂盒鉴定为成簇或相同菌株的样本,如有必要,可使用本产品做更精细的进一步分型鉴定。本产品中的3个高分辨率检测位点VNTR3820,VNTR4120和VNTR3232与VNTR-9中的9个检测位点结合使用可将检测的分辨率指数(Hunter-Gaston index,HGI)提升至0.993 。
超纯RNA提取试剂盒折扣价关键词:超纯RNA提取试剂盒,SuperPure RNA Extraction Kit,WE0192
·抗V5标签多克隆抗体
编号:WE0344
英文名称:Anti V5 Rabbit Polyclonal Antibody
规格:20μl|100μl
V5标签是从猿病毒5(SV5)副粘病毒P蛋白和V蛋白中分离得到的由14个*基酸残基组成的多肽(GKPIPNPLLGLDST)。该抗体高度特异识别重组蛋白C末端或N末端的V5标签,不受邻近*基酸组成的影响,可用于检测各种表达载体表达的V5-Tag融合蛋白。
抗体类型:亲和纯化兔多克隆抗体IgG
免疫原:人工合成多肽
应用范围:WB(1:1000-5000)、ELISA(1:1000-10000)
·抗His标签抗体琼脂糖介质
编号:WE0330
英文名称:Anti-His Mouse Monoclonal Antibody Agarose
规格:100μl|500μl
抗His标签免疫亲和介质是将抗His标签的单克隆抗体共价偶联到琼脂糖上,这种琼脂糖能进行免疫沉淀或者免疫共沉淀,能检测包含有His标签的蛋白。
抗体类型:鼠单克隆抗体IgG1
免疫原:人工合成多肽序列
应用范围:IP
·超纯RNA提取试剂盒(DNase I)
编号:WE0193
英文名称:SuperPure RNA Extraction Kit(DNase I)
规格:50次
本试剂盒是基于TRIzon改进后的柱式总RNA提取试剂盒,本制品可以从动物组织、植物材料、各种微生物及培养细胞等样品中提取总RNA。首先裂解液充分裂解并匀质化样本,在特有的高盐状态下,RNA特异性地与硅基质结合,在极大程度减少了蛋白污染的同时有效去除了有机溶剂的污染,得到的RNA纯度更好,质量更高。本产品可从各细胞或组织中快速提取总RNA,每次可处理 30-50 mg组织或 5×106 细胞,可同时处理多个不同样品。如果是对微量DN非常敏感的RNA实验,残留的DNA可利用无RNase的DNase在柱上进行消化去除,提取后的RNA可直接应用于RT-PCR、Northern Blot、Dot Blot、体外翻译等实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 |
| DNase I | 1000 U |
| 10×Reaction Buffer | 1000μl |
| TRIzon Reagent | 60ml |
| Buffer RW1 | 40ml |
| Buffer RW2(浓缩液) | 11ml |
| RNase-Free Water | 10ml |
| 吸附柱RM及收集管 | 50套 |
| RNase-Free离心管(1.5ml) | 50个 |
保存条件:DNase I及10×Reaction Buffer -20℃保存,TRIzon Reagent 2~8℃避光保存,其它组分室温(15~30℃)。
自备试剂:*仿(新开封或提取RNA专用)、70%乙醇(无RNase水配制)、无水乙醇。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、预防RNase污染,应注意以下几方面:
1)使用无RNase的塑料制品和枪头,避免交叉污染。
2)配制溶液应使用无RNase的水。
3)操作人员戴一次性口罩和手套,实验过程中要勤换手套。
2、样品应避免反复冻融,否则影响RNA提取得率和质量。
3、使用前若发现TRIzon Reagent有沉淀,可置于56℃水浴几分钟,即可溶解。
4、第一次使用前应按照试剂瓶标签说明在Buffer RW2中加入无水乙醇。
5、所有离心步骤若无特殊说明均在室温下进行,且所有操作步骤动作要迅速。
操作步骤:
1、样品处理
① 组织:30-50 mg组织在液氮中充分研磨后加入1ml TRIzon Reagent,或在组织样品中加入1ml TRIzon Reagent后匀浆处理。
注意:样品体积不超过TRIzon Reagent体积的10%。
② 单层培养细胞:吸去培养液,加入适量 ,每10cm2加入1ml TRIzon Reagent。
③ 细胞悬液:离心收集细胞。每5×106细胞加入1ml TRIzon Reagent。
2、样品中加入TRIzon Reagent后反复吹打几次,使样本充分裂解。室温放置5分钟,使蛋白核酸复合物完全分离。
3、以每1ml TRIzon Reagent加入200μl*仿的比例加入*仿,盖好管盖,剧烈振荡15秒,室温放置2分钟。
4、4℃ 12000rpm(~~13400×g)离心10分钟,此时样品分为三层:红色有机相,中间层和上层无色水相,RNA主要在上层水相中,将上层水相移到一个新的RNase-Free离心管(自备)中。
5、在得到的水相溶液中加入等体积的70%乙醇(无RNase水配制),颠倒混匀。
6、将上步所得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱中。若一次不能加完溶液,可分多次转入。12000rpm离心20秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入350μl Buffer RW1,12000rpm离心20秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
8、配制DNase I 混合液:取52μl RNase-Free Water,向其中加入8μl 10×Reaction Buffer和20μl DNase I(1 U/μl),混匀, 配制成终体积为80μl的反应液。
9、向吸附柱中直接加入80μl DNase I 混合液,20-30℃孵育15分钟。
10、向吸附柱中加入350μl Buffer RW1,12000rpm离心1分钟,弃废液,将吸附柱重新放回收集管中。
11、向吸附柱中加入500μl Buffer RW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心20秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
12、重复步骤11。
13、12000rpm离心2 分钟,倒掉收集管中废液。将吸附柱置于室温数分钟,彻底晾干。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR 等)。
14、将吸附柱置于一个新的无RNase离心管中,向吸附柱的中间部位加入30-50μl RNase-Free Water,室温放置1分钟,12000rpm离心1分钟,收集RNA溶液,-70℃保存RNA,防止降解。
注意:
1)RNase-Free Wate体积不应小于30μl,体积过小影响回收率。
2)如果要提高RNA的产量,可用30-50μl新的RNase-Free Water重复步骤14。
3)如果要提高RNA浓度,可将得到的溶液重新加入到吸附柱中,重复步骤14。
储存条件:室温(15~30℃)。
超纯RNA提取试剂盒折扣价关键词:超纯RNA提取试剂盒,SuperPure RNA Extraction Kit,WE0192
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