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- 百奥莱博
- WE0163-BTV
- 北京
- 2025年07月09日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
612
- 英文名：
PlaPure Midi Extraction Kit
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
室温(15～30℃
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产供应高纯质粒中提试剂盒哪里卖，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称：高纯质粒中提试剂盒哪里卖
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
英文名：PlaPure Midi Extraction Kit
规格：50次
本试剂盒提供一种简单、快捷、高效的提取质粒的方法，在碱裂解法裂解细胞的基础上，采用独特的硅基质膜吸附技术和试剂配方，通过离心吸附柱在高盐状态下高效专一的结合溶液中的质粒DNA，经过两步洗涤，一步洗脱，最大限度的去除蛋白质、基因组、RNA和其他杂质。得到的质粒DNA可直接用于细胞转染、PCR、酶切、测序、连接等生物学实验。
试剂盒组成：
| 组份 | 50次 |
| Buffer P1 | 30ml |
| Buffer P2 | 30ml |
| Buffer N3 | 40ml |
| Buffer PB | 10ml |
| Buffer PW(浓缩液) | 10ml |
| Buffer EB | 10ml |
| RNase A(10 mg/ml) | 600μl |
| 吸附柱DL及收集管 | 50套 |
自备试剂：无水乙醇。
实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、所有组分可在干燥、室温(15～30℃)环境稳定保存1年，更长时间保存可置于2～8℃，加入RNase A的Buffer P1 置于2～8℃可稳定保存6个月。
2、第一次使用前，将RNase A溶液全部加入到Buffer P1中，混匀，置于2–8℃保存，使用前需在室温中放置一段时间，恢复至室温后使用。
3、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer PW中加入无水乙醇。
4、使用前若发现Buffer P2、Buffer N3、Buffer PB有沉淀，可在37℃水浴几分钟，即可恢复澄清(请勿剧烈晃动Buffer P2)。
5、注意不要直接接触Buffer P2 和Buffer N3，使用后应立即盖紧盖子。
6、提取质粒的量和纯度与细菌培养浓度、菌株种类、质粒大小、质粒拷贝数等因素有关。
7、所有离心步骤均可在室温下进行。
操作步骤：
1、取5-15ml过夜培养的菌液加入离心管(自备)中，13000rpm(~～～16200×g)离心1分钟收集菌体沉淀，尽量吸弃上清。
注意：质粒拷贝数较低或>10 kb时，可以使用更多菌液通过二次离心将菌体沉淀收集到同一个离心管中，同时后续所加试剂Buffer P1、P2及N3的量需加倍。所加试剂的量必须能够充分裂解菌体，菌体过多、裂解不充分都会降低质粒的提取效率。
2、向留有菌体沉淀的离心管中加入500μl Buffer P1(请先检查是否已加入RNase A)，使用移液器或涡旋振荡器充分混匀，悬浮菌体沉淀。
注意：如果菌块未彻底混匀，将会影响裂解效果，导致提取量和纯度偏低。
3、向离心管中加入500μl Buffer P2，温和地上下颠倒混匀6-8次，使菌体充分裂解，室温放置3-5分钟。此时溶液应变得清亮粘稠。。
注意：温和混匀，不要剧烈震荡，以免打断基因组DNA，造成提取的质粒中混有基因组DNA片段。并且此步骤所用时间应不超过5分钟，避免质粒受到破坏。
4、向离心管中加入700μl Buffer N3，立即上下颠倒混匀6-8次，此时出现白色絮状沉淀，室温放置5分钟。13000rpm离心10分钟。
注意：Buffer N3 加入后应立即混匀，避免产生局部沉淀。
5、将步骤4中所得的上清液转移到已装入收集管的吸附柱DL中，13000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
注意：吸附柱的最大容积为750μl，如果样品体积大于750μl可分批加入。
6、向吸附柱中加入150μl Buffer PB，13000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入750μl Buffer PW(请先检查是否已加入无水乙醇)，13000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液。
8、将吸附柱重新放回收集管中，13000rpm离心1分钟。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
9、将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中，向吸附膜中间部位加入100-200μl Buffer EB，室温放置2-5分钟，13000rpm离心2分钟，将质粒溶液收集到离心管中。-20℃保存质粒。
注意：
1)为了增加质粒的回收效率，可将得到的溶液重新加入到吸附柱中，室温放置2-5分钟，13000rpm离心2分钟。将质粒溶液收集到离心管中。
2)洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液，应保证其pH值在7.0-8.5范围内(可以用NaOH将水的pH值调到此范围)，pH值低于7.0会降低洗脱效率。
3)质粒拷贝数较低或>10 kb时，Buffer EB在65-70℃水浴预热，适当延长吸附和洗脱的时间，可以增加提取效率。
储存条件：室温(15～30℃)
除高纯质粒中提试剂盒哪里卖外，我公司正在打折促销以下产品：
·通用型免疫组化试剂盒(鼠兔源一抗)
编号：WE0316
英文名称：Rabbit & Mouse HRP Kit(DAB)
规格：3ml
本试剂盒根据生物素与链霉亲和素具有很强亲和力的原理设计。 在兔源或鼠源的一抗与相应的靶抗原结合后，本试剂盒中的生物素化抗兔/鼠通用型二抗与一抗特异结合；二抗上标记的生物素与标记了过氧化物酶(HRP)的链霉亲和素结合，形成抗原～特异性一抗～生物素化的二抗～HRP标记的链霉亲和素复合物。HRP可以催化底物显色，从而推断待检抗原的存在及分布。该试剂盒使用的生物素化二抗、SA-HRP，均采用优化的标记和纯化技术，使得其染色有更高灵敏度和更低的背景，适合于检测福尔马林固定石蜡包埋组织切片，以及冰冻切片、细胞爬片、新鲜制备的血涂片等。兔/鼠通用型Streptavidin-HRP试剂盒适合与百奥莱博即用型或浓缩型抗体配套使用。
试剂盒组成：
| 组份 | 3ml |
| Solution A(Endogenous Peroxydase Enzymes Blocking Buffer，White Solution) | 3ml |
| Solution B(Normal Goat Serum For Blocking，White Solution) | 3ml |
| Solution C(Goat anti-Rabbit/Mouse IgG，Biotin，Ready to Use，Yellow Solution) | 3ml |
| Solution D(Streptavidin-HRP，Ready to Use，Red Solution) | 3ml |
| DAB-A(20×) | 250μl |
| DAB-B(1×) | 5ml |
注意事项：
1、以每张切片加入1滴(约50μl)计算，3ml可做60张切片， 18ml可做360张切片。
2、对于内源性生物素含量比较丰富的组织，使用本试剂盒时最好用内源性生物素阻断剂进行封闭。
3、DAB工作液现配现用，配制好的工作液2～8℃避光1小时内有效。
4、实验过程中避免组织片干燥，因此各步孵育时工作液用量必需充足，保证完全覆盖组织样本，且尽量在湿盒中进行孵育。
5、为获得最佳实验结果，请务必优化实验条件及试剂用量。
6、DAB为可疑致癌物，使用时请采取必要的防护措施。
7、本产品仅用于科研，不能用于人体反应或人体治疗。
操作步骤：
1、常规处理欲检测的石蜡或冰冻组织切片或细胞爬片等样本。
1)组织切片或细胞爬片染色前处理：
a. 石蜡切片
脱蜡水化：60ºC烤片1小时，二甲*脱蜡二次，每次5分钟；再依次浸入梯度乙醇(无水乙醇－无水乙醇－95%－85%－75%乙醇)和蒸馏水中各5分钟水化。
b. 冰冻切片和细胞爬片
切片(或爬片)浸于0.01 M pH7.4 PBS洗涤3次×5分钟。然后用0.1%Triton X-100覆盖组织(或细胞)浸润15分钟，0.01 M pH7.4 PBS洗涤2次×5分钟。
2)石蜡切片的抗原修复：绝大大多数情况下，石蜡组织切片用柠檬酸缓冲液高压修复都是适合的。
修复工作液配制：1 L去离子水中加入10ml柠檬酸缓冲液(IHC抗原修复液, 100×)(Cat#：WE0318)，混匀即可。
修复过程：修复液加入高压锅内，待修复切片浸于修复液中(必需没过组织)，盖上压力锅盖，加热至均匀喷汽，从喷汽开始计时，1~2分钟后压力锅离开热源，自然冷却至室温，取出切片，蒸馏水淋洗后，再用PBS(0.01 M pH7.4)漂洗2次，每次3分钟。
2、滴加适量Solution A白色溶液，即内源性过氧化物酶封闭液室温孵育10分钟，PBS充分淋洗。
3、滴加适量Solution B白色溶液，即封闭用正常羊血清工作液，室温孵育10分钟，甩干。
4、滴加适量一抗工作液(商品化即用型抗体或适当比例稀释的浓缩抗体)，按实验要求孵育，然后PBS充分淋洗。
5、滴加适量Solution C黄色溶液，即生物素标记羊抗兔/鼠二抗工作液，室温孵育10分钟，PBS充分淋洗。
6、滴加适量Solution D红色溶液，即HRP标记的链霉亲和素，室温孵育10分钟，PBS充分淋洗。
7、DAB显色工作液配制：根据需要量，将DAB-A和DAB-B以1：19的体积比混匀后即为DAB显色工作液。也可选择每毫升试剂B中滴加1滴(约50μl)试剂A，混匀即可。
8、显色：加适量的DAB显色工作液于需要显色的组织切片或细胞爬片上即可显色，显色时间一般为1-5分钟。显微镜下观察控制显色时间，当达到最佳显色效果后，自来水冲洗终止显色。显色后的切片经复染、脱水透明，封片后可长期保存。
储存条件：2～8℃
高纯质粒中提试剂盒哪里卖关键词：PlaPure Midi Extraction Kit ,WE0163,高纯质粒中提试剂盒
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文献和实验【求助】求助！！关于EMSA核蛋白提取过程中用到的100x Protease Inhibitor
要购买，而分别购买这些试剂的钱加起来可以买个核蛋白提取试剂盒了很不划算。有没有做EMSA的人啊，你们提核蛋白的Protease Inhibitor都怎么来的？ 有人用过上海生工的核蛋白提取试剂盒了，那个只要250元，提出来的效果怎么样? xhjggl 效果比较好，他们也有100x Protease Inhibitor卖 ，打折卖100x1ml 525元 月下独见 谢谢LS,这样看直接买核蛋白提取试剂盒还划算
包括柱离心式DNA胶回收及PCR产物快速纯化试剂盒、柱离心式质粒小量快速抽提试剂盒、柱离心式高纯质粒小量快速抽提试剂盒、 柱离心式去内毒素超纯质粒小量快速抽提试剂盒、 质粒抽提、DNA胶回收、PCR产物纯化柱离心式多用途小量纯化试剂盒、柱离心式质粒中量抽提试剂盒 、柱离心式高纯度质粒中量抽提试剂盒、 柱离心式去内毒素超纯质粒中量抽提试剂盒 、核酸纯化小柱（质粒小抽、胶回收）、核酸纯化大柱（质粒中抽、大抽）等10个产品。 现因公司产品结构调整，转让该系列试剂盒的配方、生产工艺、生产设备。包教
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