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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
999
- 细胞类型:
原代细胞/细胞系
- 品系:
详询
- 组织来源:
新鲜组织
- 物种来源:
Mammals
- 免疫类型:
血液科
- 细胞形态:
上皮成肌原粒淋巴成纤维等
- 器官来源:
正常组织源性
- 运输方式:
90%完全培养基+775%DMSO,液氮储存
- 年限:
长久
- 生长状态:
悬浮贴壁
- 规格:
T25
(1)组织来源于正常新鲜组织。
(2)鉴定:Cytokeratin-18, -19和Vimentin免疫荧光染色。
(3)原代细胞培养末期液氮冻存。
(4)每冻存管细胞数:>5×105 cells/1ml。
(5)Cytokeratin-18, -19和Vimentin免疫荧光染色。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
圻明生物原代细胞引种于:ATCC,武大细胞库,上海生化细胞所,中国科学院典型培养物保藏委员会等。 我们为全国广大客户提供优质的产品,完善的技术支持,过硬的质量保证。
操作指南及质量保证:
1. 细胞为三代以内,活体。运输过程中细胞出现污染和状态不好,我们免费重新发货。
2. 实验过程中若确定是客户问题,客户需支付物流和耗材费用,我们可重新发货。其他根据情况灵活处理。
3. 产品使用过程中,华拓生物可提供技术上的指导。
HeLa ,人子宫颈癌细胞细胞培养:细胞请于细胞培养箱中培养,大部分细胞是37℃,5%CO2,湿度100%环境下培养的。有极少部分细胞培养条件不一致,请仔细阅读相应的细胞说明书,使用正确的培养基及培养条件;细胞于培养瓶或培养皿中培养,加入适量说明书上标注的细胞相应完全培养基(一般液面高度2-3㎜即可)。
HeLa ,人子宫颈癌细胞细胞传代:1.细胞培养至密度80%以上时即可传代,先将细胞培养基取出3ml用15ml离心管装好,其他培养基全部吸干舍弃;2.培养皿加入2-3ml无菌PBS,轻轻晃动,使PBS浸洗到皿底所有部位,PBS吸干舍弃;3.加入1ml胰酶,轻轻晃动,使胰酶浸没到皿底所有部分,将皿盖好放入培养箱中消化;4.3分钟后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞不再贴壁,即可加入第一步收集的培养基混匀,若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至不贴壁为止;5.将细胞悬液均匀分成几份,分别加入不同培养皿中,补加新培养基后放回培养箱培养。
如不能在收到细胞后及时操作细胞,T25或者离心管发货的细胞可以消毒后在培养箱过夜,干冰发货的可以在确认干冰未完全升华时将细胞直接放回液氮或者-80°冰箱,若干冰完全升华,需立即复苏细胞。
T25瓶或者离心管在培养箱平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境,同时使部分因运输导致脱落的细胞贴壁,此步骤非常必要不可忽略。T25瓶如果在显微镜下可以看到部分不贴壁的细胞,可以收集上清后离心(1200rpm,5min),将沉淀用新的培养基重悬后接种至新的培养瓶或皿中。
部分细胞在运输过程中,由于不断震荡及环境不适,可能导致细胞破碎死亡,从而使培养基中漂浮很多细胞碎片及颗粒状物质。这种情况下,平衡后,贴壁细胞用PBS洗两遍在加新的培养基或者传代至新瓶中培养即可;悬浮细胞可以离心(1000rpm,3min)收集细胞,用PBS重悬后再离心一次,再用新的培养基重悬并接种细胞。
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文献和实验1951年由 G. O. Gey等从人子宫颈癌组织分离出来的株细胞。 HeLa是原患者姓氏的缩写。这种细胞是现有来自人体的组织培养中最早的分离细胞,在世界各地的研究室继续培养,广泛应用于各种研究。它们在体外容易增殖形成上皮性的细胞排列。染色体数频率分布式为 78— 80,移植于人体皮下则形成肿瘤,在豚鼠的眼前房,大鼠的颊囊以及经 X射线皮质酮处理的小鼠可作异种移植,由此可以认为仍保持着癌的性状。广泛被用作分析细胞营养要求、细胞增殖和各种细胞化学的研究材料。易从细胞群落作无性
在生物学与医学研究中,HeLa细胞是指源自一名美国妇女的子宫颈癌细胞的细胞。这名美国妇女名叫Henrietta Lacks,于1951年死於癌症。本来为了让Lacks保持匿名,此细胞株宣称是依"Helen Lane"命名。HeLa细胞株被George Gey分送给众研究单位(而未通知Lacks本人也未得到她的许可),因用作癌症研究而广为流传。至今已被视为“不死的”,也就是说此细胞株(不同于其他人类细胞)不会老死,而且可以不限次数的分裂下去,而且已被培养出一个不间断的系列。此细胞株即使和其他癌细胞
llemontree:G418 筛选Hela细胞的预试验,想确定筛选浓度,怎么1500μg/ml 仍有细胞存活呢?难道Hela细胞的抗性如此之强?应该怎么办呢?急!丁香园网友qiuying认为:可能细胞已改变了遗传特性,建议重新引入HELA细胞或更换细胞株。我曾用过G418筛选转基因的HELA细胞,浓度为700μg/ml时细胞已死丁香园网友llemontree认为:Hela 细胞不是有好几种吗?会不会不同的细胞抗性不一样呢?丁香园网友爱吃葡萄的猫认为:我用的就是Hela细胞,我的浓度是800
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