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966
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长期
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北京百奥莱博科技有限公司
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冷藏
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博致力于最快速、最有效的检测产品,包括禽传染性法氏囊病病毒荧光PCR检测试剂盒(IBDV)品牌在内的动物疫病PCR检测试剂盒产品是我公司倾力打造的优势产品,欢迎选购。
名称:禽传染性法氏囊病病毒荧光PCR检测试剂盒(IBDV)品牌
品牌:百奥莱博
等级:科研试剂
编号:SYA352
产地:国产|进口
欲了解更多禽传染性法氏囊病病毒荧光PCR检测试剂盒(IBDV)品牌的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:
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禽传染性法氏囊病病毒荧光PCR检测试剂盒(IBDV)品牌关键词:IBDV,禽传染性法氏囊病病毒荧光PCR检测试剂盒,百奥莱博,禽传染性法氏囊病病毒荧光PCR检测试剂盒(IBDV),SYA352
·口蹄疫亚I型(FMDV-I)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA483
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·口蹄疫(FMDV)通用型单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA500
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·人类小DNA病毒(B19)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA246
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·嗜水气单胞菌/类致贺邻单胞菌双重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA098
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·非洲猪瘟病毒(ASFV)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA421
等级:科研实验专用
规格:48次/盒|96次/盒
一、简介:
本试剂盒用一对非洲猪瘟病毒特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对非洲猪瘟的核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染动物的病原学诊断。
二、用途:
本试剂盒适用于动物病料、鼻咽拭子、血液等样本中非洲猪瘟病毒的特异检测。适用于非洲猪瘟病毒感染的辅助诊断、监测及流行病学调查,其检测结果仅供临床参考。最低检测限:500copies/mL,稳定性:批内及批间差异系数≤3% 。
三、试剂盒组成:(48T)
小盒(扩增试剂盒)
| 组份 | 数量 | 规格 |
| 非洲猪瘟病毒荧光qPCR反应液(ASFV-qPCR MIX) | 1管 | 672μL/管 |
| 酶混合物(Enzymes MIX) | 1管 | 48μL/管 |
| 阴性对照(NTC) | 1管 | 50μL/管 |
| 阳性对照(ASFV-PTC) | 1管 | 50μL/管 |
大盒(提取试剂盒)
| 组份 | 规格 | 数量 |
| FD1试剂 | 15mL/瓶 | 1瓶 |
| FD2试剂 | 500μL/管 | 1管 |
| FD3试剂 | 15mL/瓶 | 1瓶 |
| FD4试剂 | 30mL/瓶 | 1瓶 |
| FD5试剂 | 2mL/管 | 2管 |
| 吸附柱及收集管 | 48套/包 | 1包 |
四、储存条件及有效期
小盒于-20℃以下保存,有效期为6个月;大盒室温避光保存,有效期12个月。
五、荧光PCR仪器适用范围
ABI系列,Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。
六、样品的采集与DNA提取
6.1 样品的采集
按照相关标准采集。标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-80℃,但不能超过6个月,标本运送应采用0℃冰壶。
6.1.1 血清:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入无菌的干燥玻璃管,室温(22-25℃)放置30-60min,血标本可自发完成凝集析出血清,或直接使用水平离心机,3000rpm离心5min,吸取上层血清,转移至1.5mL灭菌离心管中备用。
6.1.2 血浆:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入含EDTA2Na(乙二*(代"胺")四乙酸二*)或柠檬酸*抗凝剂的玻璃管,立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次,使抗凝剂与静脉血充分混匀,5-10min后即可分离出血浆,转移至1.5mL灭菌离心管中备用。
6.1.3 拭子、分泌物等样品:在装有拭子或分泌物的离心管中加入500μL PBS或生理盐水,剧烈振荡30s。棉拭子尽量挤出液体转移到无DNA酶污染的离心管中备用。
6.1.4 病灶组织样品:称取组织约0.1g于研磨器或组织匀浆器中研磨(最好置于冰上或加入液氮),再加1mL生理盐水研磨至无块状物,然后将样品转至1.5mL灭菌离心管中备用。
6.2 DNA提取
请查看配套提取试剂盒说明书
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5μL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qPCR反应液(ASFV-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),室温融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
| 试剂 | 每个反应加入的量 | N个反应加入的量 |
| ASFV反应液 | 14µL | N×14µL |
| 酶混合液 | 1µL | N×1µL |
| 总量 | 15µL | N×15µL |
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm 离心10s,向设定的N 个PCR 反应管中分别加入15μL,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(PTC)5μL,10000rpm 瞬时离心10 秒。
向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(ASFV-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件:
| 1循环 | 50℃ for 2 min | |
| 预变性 | 1循环 | 95℃ for 10 min |
| PCR扩增 | 40循环 | 95℃ for 15 sec 60℃ for 60 sec |
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
八、结果分析:
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1)阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2)阳性对照(ASFV-PTC):均产生扩增曲线。
(3)以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(2)在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明ASFV核酸阳性。
(2)Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明ASFV核酸阴性。
(3)如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4)对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行ASFV qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明ASFV核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项
(1)初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2)所有使用的离心管最好高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
(3)PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4)样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5)试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
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DMDC玻片硅化剂(2%) 100ml
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ARB12924 小鼠主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHC-Ⅱ/H-2Ⅱ检测服务 Mouse major Histocomp*(代"a")tibility complex-Ⅱ,mhc-Ⅱ/h-2Ⅱ ELISA KIT
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