猪瘟兔化弱毒疫苗与猪瘟野毒株双重荧光PCR检测试剂盒(HCL

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博致力于最快速、最有效的检测产品，包括猪瘟兔化弱毒疫苗与猪瘟野毒株双重荧光PCR检测试剂盒(HCLV/wCSFV)促销在内的动物疫病PCR检测试剂盒产品是我公司倾力打造的优势产品，欢迎选购。

名称：猪瘟兔化弱毒疫苗与猪瘟野毒株双重荧光PCR检测试剂盒(HCLV/wCSFV)促销
等级：科研试剂
规格：48次/盒
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博

我公司的猪瘟兔化弱毒疫苗与猪瘟野毒株双重荧光PCR检测试剂盒(HCLV/wCSFV)促销，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：

·禽流感病毒(AIV-M)通用型单重荧光PCR检测试剂盒（定性/定量）
编号：SYA320
等级：科研实验专用
规格：48次/盒|96次/盒
一、简介：
禽流感病毒实时荧光qRT-PCR检测试剂是按照美国农业部(USDA)的国际检测标准和我国《禽流感病毒通用荧光RT-PCR检测方法》(GB/T 19438.1-2004)而制备的商业化检测试剂盒。本试剂盒为中的探针报告基团为6-FAM，淬灭基团为MGB。本方法可定性检测所有亚型禽流感病毒。

二、用途：
本试剂盒适用于检测各种禽类喉咽棉拭子、泄殖腔棉拭子、各种组织样品、尿囊液及细胞培养液等。可用于禽流感病毒感染的辅助诊断、监测及流行病学调查，其检测结果仅供参考。

三、试剂盒组成：(48T)
组份 数量 规格
荧光qRT-PCR反应液(AIV-qRT-PCR MIX) 1管 672μL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
无核酸酶水(Nuclease-Free Water) 1管 500μL/管
阴性对照(NTC) 1 管 50μL/管
阳性对照(AIV-PTC) 1 管 50μL/管

四、储存条件及有效期：
本试剂盒于-18℃以下保存，有效期为6个月。

五、荧光PCR仪器适用范围：
ABI系列，Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。

六、样品的采集与RNA提取
6.1 样品的采集
按照国家标准《高致病性禽流感诊断技术》(GB/T 18936-2003 )和《禽流感病毒通用荧光RT-PCR检测方法》(GB/T 19438.1-2004 )进行样品的采集。
6.2 样品RNA提取
可按常规方法提取，也可采用商品化试剂盒提取病毒RNA。
（1） 取灭菌的1.5 mL Eppendorf离心管，做好标识。
（2） 每管加入600 µL裂解液，分别加入被检样本200 µL，再加入200 µL*仿，混匀器上振荡混匀5 s，于4℃ 12000 r 离心15 min。
（3） 取无RNA酶的1.5 mL Eppendorf离心管，加入-20℃预冷400µL异丙醇，吸取步骤(2)各管中的上清液转移至相应的管中，避免吸出中间层，颠倒混匀。
（4） 于4℃ 12000 r离心15 min，弃上清，倒置于吸水纸上，沾干液体；加入600µL 75％预冷乙醇，洗涤。
（5） 于4℃ 12000 r离心10 min，弃上清，倒置于吸水纸上，沾干液体。
（6） 10000 r离心10 s，用微量加样器将其吸干，室温干燥5 min～10 min。
（7） 加入10µL 无核酸降解酶的水，溶解管底的RNA，5000 r离心5 s，冰上保存备用。若需长期保存须放置-70℃ 冰箱。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤：
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qRT-PCR反应液(AIV-qRT-PCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000r离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(AIV-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 real time RT-PCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
反转录(Reverse Transcription) 1循环 45℃ for 5 min
预变性 1循环 94℃ for 30 sec
PCR扩增(PCR amplification ) 40循环 94℃ for 5 sec
60℃ for 30 sec
在60℃延伸时收集荧光信号 。报告基团：设置为FAM。

八、结果分析：
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
（1） 阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
（2） 阳性对照(AIV -PTC)：均产生扩增曲线。
（3） 以上条件应同时满足 ，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
（1） 在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明AIV核酸阳性。
（2） Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明AIV核酸阴性。
（3） 如果35＜Ct值≤40，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
（4） 对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行AIV qRT-PCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明AIV核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
（1） 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
（2） 所有使用的离心管最好高压灭菌，而且必须不含RNA酶。
（3） PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
（4） 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
（5） 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。



猪瘟兔化弱毒疫苗与猪瘟野毒株双重荧光PCR检测试剂盒(HCLV/wCSFV)促销关键词：猪瘟兔化弱毒疫苗与猪瘟野毒株双重荧光PCR检测试剂盒(HCLV/wCSFV),SYA474,百奥莱博

BL0870 羊抗兔IgG免疫血清 0.5ml
ARB12054 大鼠干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)Elisa方法检测 Rat interferon-inducible protein 10,ip-10 ELISA KIT
PY02-454  ToddHewitt肉汤(THB)  250克  
F010113 小鼠抗呕吐毒素抗体 Monoclonal Mouse Anti-deoxynivalenol
BL0286 α-MEM
BTN70905 明胶溶液,2%,PCR级 Gelatin Solution,PCR Grade
普鲁兰糖 1-Thioglycerol 9057-02-7
ARB13652 兔子睾酮(T)ELISA检测服务 Rabbit testoterone,t ELISA KIT
胆酸*(猪) Cholic acid 206986-87-0
BL0887 兔抗豚鼠IgG免疫血清
ARB10538 人主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)ELISA代测服务 Human major Histocomp*(代"a")tibility complex Ⅱ,mhcⅡ/hla-Ⅱ ELISA KIT
ARB12304 大鼠抗胰蛋白酶(AT)elisa检测 Rat anti-trypsin,at ELISA KIT
9007-34-5 胶原蛋白Ⅱ型 Collagen TypeⅡ
ARB12887 小鼠甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)elisa检测操作说明书 Mouse paRathyroid hormone related protein,pthrp ELISA KIT
E0202 抗凝山羊血(无菌 袋装) 500ml/1000ml/2000ml
BL0915 FITC标记BSA抗体
ARB13389 牛溶菌酶Lysozyme 免费代测 
盐*(代"酸")乙醇胺溶液(1mol/L,pH8.0)   500ml
ARB12501 大鼠诱导型NO合酶(INOS)含量分析 Rat inducible nitric oxide synthase ELISA KIT
钨酸 10% Iron chelate 7783-03-1
PY01-150  菠萝蛋白酶(1:800u/mg)  25克  
N-乙酰-L-蛋*酸 N-(r-L-Glutamyl)-1-naphthylamide 65-82-7
猪瘟兔化弱毒疫苗与猪瘟野毒株双重荧光PCR检测试剂盒(HCLV/wCSFV)促销关键词：猪瘟兔化弱毒疫苗与猪瘟野毒株双重荧光PCR检测试剂盒(HCLV/wCSFV),SYA474,百奥莱博

BL0001 槲皮素标准品
ARB13299 小鼠糖蛋白130(gp130)Elisa方法检测 Mouse glucoprotein 130,gp130 ELISA KIT
ARB13546 兔子E选择素(E-SelectIn/CD62E)定量分析 Rabbit e-selectin ELISA KIT
110-26-9 N,N-Methylene Bisacrylamide  甲叉双丙*(代"烯")酰胺
X-gal(20mg/ml)   1ml|5ml
ARB13872 猪白介素1α(IL-1α)血清中含量检测 Porcine interleukin 1α ,IL-1α ELISA KIT
1-*酚酞-甲*(代"酚")红指示剂   100ml
PY02-312  硫化*(代"*")试验琼脂  250克  
芴 Rapamycin 86-73-7
ARB10547 人皮质酮/肾上腺酮(CORT)ELISA代测服务 Human corticosterone,cort ELISA KIT
SJ0689 500bp
53-84-9 NAD 氧化型辅酶Ⅰ
盐*(代"酸")丫啶 Carbol fuchsin 17784-47-3
1,3-二甲基脲 Toluidine bule 96-31-3
BL0822 HRP标记兔抗猪IgG抗体
ARB13593 兔子抗中性粒细胞颗粒抗体(ANGA)Elisa分析 Rabbit anti-neutrophil granules antibody,anga ELISA KIT

我公司正在优惠促销动物疫病PCR检测试剂盒等系列产品，期待您的咨询选购猪瘟兔化弱毒疫苗与猪瘟野毒株双重荧光PCR检测试剂盒(HCLV/wCSFV)促销。