CCK-8试剂盒 细胞凋亡与增殖

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北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应CCK-8试剂盒 细胞凋亡与增殖，产品信息：

类别：细胞凋亡与增殖

英文名：Cell counting KIT-8

产品名	产品编号	包装规格
CCK-8试剂盒	QN1293	100T|500T|500T*10

产地：国产|进口

规格：100T|500T|500T*10

英文名：Cell counting KIT-8

品牌：百奥莱博

本试剂盒为MTT法的替代方法，是一种基于WST(水溶性四唑盐，化学名：2-(2-甲氧基-4-硝*基)-3-(4-硝*基)-5-(2,4-二磺基*)-2H-四唑单*盐)的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。可用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏等试验。

 

使用说明：

一、制作标准曲线(测定细胞具体数量时)

1、先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量，然后接种细胞。

2、按比例依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度，一般要做3-5个细胞浓度梯度，每组3-6个复孔。

3、接种后培养至细胞贴壁，然后加CCK-8试剂培养一定时间后测定OD 值，制作出一条以细胞数量为横坐标(X 轴)，OD 值为纵坐标(Y 轴)的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量(试用此标准曲线的前提是实验的条件要一致，便于确定细胞的接种数量以及加入CCK-8后的培养时间。)

 

二、细胞活性检测

1、在96孔板中接种细胞悬液(100μL/孔)。将培养板放在培养箱中预培养(在37℃,5% CO2的条件下)。

2、向每孔加入10μL CCK-8溶液(注意不要在孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数)。

3、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。

4、用酶标仪测定在450nm处的吸光度。

5、如果暂时不测定OD值，打算以后测定的话，可以向每孔中加入10μL 0.1M的HCl或者1%SDS(W/V)溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。

 

三、细胞增值-毒性检测

1、在96孔板中配置100 μL 的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时(在37℃，5% CO2的条件下)。

2、向培养板加入10μL不同浓度的待测物质。在培养箱孵育一段适当的时间(例如：6、12、24或48小时)。

3、向每孔加入10 μL CCK-8溶液(注意不要在孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数)。如果待测物质有氧化性或还原性的话，可在加CCK-8之前更换新鲜培养基(除去培养基，并用培养基洗涤细胞两次，然后加入新的培养基)，去掉药物影响。

4、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。

5、用酶标仪测定在450 nm处的吸光度。

6、如果暂时不测定OD 值，打算以后测定的话，可以向每孔中加入10μL 0.1M的HCl或者1%SDS(W/V)溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。

 

活力计算：.

细胞活力(％)=[A(加药)－A(空白)]／[ A(0加药)－A(空白)]×100

A(加药)：具有细胞、CCK-8溶液和药物溶液的孔的吸光度

A(空白)：具有培养基和CCK-8溶液而没有细胞的孔的吸光度

A(0 加药)：具有细胞、CCK-8溶液而没有药物溶液的孔的吸光度

细胞活力：细胞增殖活力或细胞毒性活力

 

注意事项：

①建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入CCK-8试剂后的培养时间。

②白细胞可能需要培养较长时间。

③当使用标准96 孔板时，贴壁细胞的最小接种量至少为1 ,000个/孔 (100 μL培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低，因此推荐接种量不低于2,500 个/孔 ( 100 μL培养基)。如果要使用24孔板或6孔板实验，请先计算每孔相应的接种量，并按照每孔培养基总体积的10% 加入CCK-8溶液。

④如果没有450nm的滤光片，可以使用吸光度在430-490 nm 之间的滤光片，但是450nm检测灵敏度最高。

⑤培养基中酚红的吸光度可以在计算时，通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去，因此不会对检测造成影响。

 

储存条件：4℃，有效期一年

CCK-8试剂盒 细胞凋亡与增殖专业优质供应商：北京百奥莱博科技有限公司

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关于CCK-8试剂盒 细胞凋亡与增殖的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

编号	类别	名称
QN0428	酶和辅酶	辅羧酶(TPP)
QN0304	*基酸类	D-天门冬酰胺一水合物
QN0087	抗生素类	丝裂霉素C
QN0713	其他生化试剂	聚乙二醇 PEG 3350
QN1060	克隆与表达	pET-28a(+)载体
QN0779	其他生化试剂	肌酸酐
QN0319	蛋白类	FN纤粘连蛋白(来源人血)
QN0166	碳水化合物类	脂多糖(LPS)
QN0803	其他生化试剂	2,3-二巯基丁二酸
QN0440	抑制剂激活剂	PMSF(100mM)
QN0477	酶和辅酶	胰蛋白酶-EDTA消化液(不含酚红)
QN0566	其他分子生物学试剂	腺苷-5"-二磷酸葡糖二*
QN0149	碳水化合物类	葡聚糖T-500
QN0962	核酸扩增(PCR)	通用引物 T3
QN0830	其他生化试剂	丙*(代"酸")*倍他索
QN0842	其他生化试剂	右旋糖酐5000
QN0929	DNA纯化	DNA产物纯化试剂盒
QN0518	酶和辅酶	α-淀粉酶
QN1166	蛋白质研究	Acr制胶试剂
QN0599	其他生化试剂	醋酸卡泊芬净
QN0833	其他生化试剂	5-甲基胞嘧啶
QN1251	蛋白质研究	8％多聚甲醛
QN0065	抗生素类	博莱霉素
QN0274	蛋白类	血蓝蛋白
QN0591	其他生化试剂	DL-α-硫辛酸
QN0914	RNA纯化	RNA抽提试剂(25:24:1)

 

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