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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
973
- 英文名:
Collagenase II
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
4℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京现货胶原酶II型品牌是高品质的细胞分离液产品,由北京百奥莱博供应,用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多胶原酶II型等细胞分离液产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:北京现货胶原酶II型品牌
规格:100mg
编号:SY0536
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
英文名:Collagenase II
本品为II型胶原酶,≥125 U/mg solid,可用于心、甲状腺、唾液腺、肝、骨、软骨等组织和细胞的解离。本品来源于溶组织梭菌(Clostridium histolyticum),是一种酶粗提物,不仅含有胶原酶(更准确的称法为梭菌蛋白酶A(clostridiopeptidase A)),能够降解天然胶原和网状纤维。还含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等,分别能够有效水解结缔组织和上皮组织细胞外基质内的其他蛋白,多糖和脂质,使得本品非常适用于组织消化。
胶原酶(Collagenase)是一种蛋白酶,一种肽链内切酶,能够特异性的识别Pro-X-Gly-Pro序列(该序列高频率出现在胶原中,很少发现于其他蛋白中)并切割该序列中性*基酸(X)和甘*酸(Gly)之间的肽键。许多蛋白酶都能水解单链且变性的胶原多肽,但胶原酶是唯一一种可以降解具有三股超螺旋结构的天然胶原纤维的蛋白酶,这种胶原纤维广泛存在结缔组织内。
目前商业化提供的细菌胶原酶主要根据胶原酶活性的差异,分为四种类型:胶原酶I型,II型,III型和IV型,在应用上有所偏向:
1)胶原酶I(Type I Collagenase):含有比较均匀的各种酶活力(包括胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶、胰蛋白酶活性)。通常用作上皮细胞、肝、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的制备;
2)胶原酶II(Type II Collagenase):含有更高的梭菌蛋白酶活性,通常用于心脏、骨、肌肉、胸腺和软骨等组织来源细胞的制备;
3)胶原酶III(Type III Collagenase):含有较低的蛋白酶活性,常用于乳腺细胞的制备;
4)胶原酶IV(Type IV Collagenase):含有低胰酶活性,通常用于胰岛细胞的制备,或者需要维持受体完整性的细胞制备实验。
酶活力单位定义
在37℃,pH7.5 的条件下,5h内水解胶原产生相当于1µM L-亮*酸的酶量定义为1个酶活力单位。
储存条件:4℃,有效期两年
北京现货胶原酶II型品牌极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·2×RNA上样缓冲液(含*化乙锭)
编号:SY0253
英文名称:2×RNA Loading Buffer (With Ethidium Bromide)
规格:5×1ml
2×RNA上样缓冲液用于琼脂糖凝胶电泳或聚丙*(代"烯")酰胺琼脂糖凝胶电泳前RNA 样本的处理。缓冲液组分经过优化,其中的染料溶液包括指示剂*酚蓝和二甲*青FF,电泳时可肉眼监控RNA 的迁移,并含有甲酰胺用作一种RNA稳定剂。
1×RNA loading buffer各组分:47.5% Formamide, 0.01%(w/v)SDS, 0.01%(w/v) Bromphenol Blue, 0.005%(w/v) Xylene Cyanol, 0.5mM EDTA, 0.0125%(w/v) Ethidium Bromide.
使用方法
1)将RNA样品与等体积的2×RNA上样缓冲液充分混匀。
2)对于变性PAGE(尿素)/Agarose凝胶电泳,需在65-70℃加热5-10min变性RNA,并在加热的同时用枪头吸取电泳缓冲液小心冲洗点样孔中多余的尿素;对于非变性PAGE/Agarose凝胶电泳则无需此步加热,直接进行下一步。
3)上样即可。
北京现货胶原酶II型品牌关键词:胶原酶II型,SY0536,Collagenase II
甘*酸 Hydroxymethyl resin 56-40-6
F040106 牛血清白蛋白偶联莱克多巴胺 BSA-RAC
BTN130515 *基磁珠 Magnetic beads,Amino
F030234 HRP标记山羊抗人IgG抗体 HRP*Polyclonal Goat Anti-Human IgG
BTN130628 Lambda核酸外切酶 Lambda Exonulease
F030442 胶体金标记小鼠抗鸭IgY(IgG)抗体 Monoclonal Mouse Anti-Duck IgY*GOLD
ARB11451 人缺血修饰白蛋白(IMA)ELISA检测服务 Human ischemia modified albumin,ima ELISA KIT
BTN101112 柱式水样DNAOUT Column Water DNAOUT
F030403 胶体金标记小鼠抗人IgG Fab抗体 Monoclonal Mouse Anti-Human IgG Fab*GOLD
低糖DMEM 500ml
PY01-106 盐*(代"酸")胍 100克
ARB12380 大鼠乳酸脱*酶(LDH)elisa检测 Rat lactate dehydrogenase,ldh ELISA KIT
50-81-7 抗坏血酸 Aseorbie acid(Vitamin C)
BTN130638 核酸内切酶IV Endonuclease IV
缩节胺 Cupric citrate 24307-26-4
北京现货胶原酶II型品牌关键词:胶原酶II型,SY0536,Collagenase II
·pUM19-T Vector TA克隆载体
编号:SY0295
规格:1μg
pUM19-T载体是一种用于PCR产物高效克隆(TA Cloning)的专用载体。它是在线性化pUC19载体的基础上,在两侧的3’端添加碱基T而制成。经特殊工艺改造后,使其具有较高的克隆效率:
1)特殊的纯化方式使得超过99% 的pUM19载体两端都具有3’-T突出端,因此极大的降低了载体自连率。
2)由于大部分耐热聚合酶反应时都会在PCR 产物的3’端添加一个A,可与pUM19载体3’ 端的T互补连接,因此可大大提高PCR 产物的连接和克隆效率。
3)pUM19载体多克隆位点位于β-lactamase基因内,可以通过蓝白斑快速筛选含有插入片断的重组子。
产品组份:
pUM19-T Vector (50 ng/μl)————20 μl
500 bp control insert (50 ng/μl)————20 μl
使用说明
1. 将载体置于冰上融化。建议第一次使用时将载体分装成小份保存,每次取一支使用。
2. 按下表配制连接反应体系:
| ddH2O | To 10 μl |
| 10×Ligase Buffer | 1 μl |
| pUM19-T Vector (50 ng/μl) | 1μl (约0.025 pmol) |
| 插入片段* | 0.075 pmol~0.25 pmol |
| T4 DNA Ligase (400 U/μl) | 1 μl |
注:插入片段与载体的摩尔比应在3:1~10:1之间。请根据琼脂糖凝胶电泳或紫外分光光度计检测确定插入片段的浓度,并根据其大小计算摩尔量。1 pmol 1 kb双链DNA的质量约为660 ng。
3. 对照反应体系(可选):
| ddH2O | 6 μl |
| 10×Ligase Buffer | 1 μl |
| pUM19-T Vector (50 ng/μl) | 1 μl (约0.025 pmol) |
| 500 bp control insert(50 ng/μl) | 1 μl (约0.15 pmol) |
| T4 DNA Ligase (400 U/μl) | 1 μl |
4. 轻轻吹打混匀反应体系,室温22-26℃孵育1-2小时,或16℃过夜。
5. 转化:
1) 将连接产物加入到100 μl感受态细胞中(连接产物的体积不要超过感受态细胞体积的1/6),轻轻弹匀,冰上孵育30分钟。
2) 将离心管置于42℃水浴,不要晃动,准确热激90s后,立刻置于冰水浴中,不要晃动,静置2-3分钟。
3) 向离心管中加入900 μl LB或SOC培养基,150 rpm, 37℃振荡培养45分钟,使菌体复苏,抗性基因表达。
4) 2500 g离心5分钟,去掉900 μl上清。用剩余培养基将菌体重悬混匀,用无菌涂布棒在含有正确抗性的平板上轻轻涂匀,室温正置10min。待菌液被平板吸收后,37℃倒置培养过夜。
【注】:如果使用超级感受态细胞(转化效率>108 cfu/μg),可以直接吸取100-200 μl孵育后的菌液涂板。剩余菌液可在4℃保存,一周之内都可重新涂板。
注意事项
1) 尽量避免反复冻融,可将载体和对照片段分装成小份后保存。
2) 连接使用的PCR 片段3’ 端应带有A 末端;Pfu DNA Polymerase (SY0036)等高保真聚合酶的扩增产物不带A,应先在其末端加A后再进行TA克隆。
3) 为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
附1:pUM19-T 载体结构
储存条件:-20℃。
我公司生产供应销*(代"售")的细胞分离液正全品类优惠促销,十分期待您的咨询选购北京现货胶原酶II型品牌。
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文献和实验化应激或基质降解。 · 它适合与 qPCR、WB、免疫荧光、CCK-8、ROS、凋亡等实验组合使用。 · 它能把动物模型中的病理现象,进一步拆解到细胞功能和分子机制层面。 二、核心原理:先把软骨基质打开,再把细胞温和释放出来 软骨组织的特点是细胞少、基质多。软骨细胞被包埋在富含胶原和蛋白多糖的细胞外基质中,不像普通贴壁细胞那样轻轻一吹就能下来。 因此,小鼠原代软骨细胞提取的关键,是通过胰酶预处理和 II 型胶原酶消化,逐步松解组织结构,让细胞从基质里释放出来,同时尽量保留细胞
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缺血和机械损伤对细胞活性的影响。 3. 心室组织剪碎 将心室组织转移至无菌培养皿中,用眼科剪或无菌剪刀剪成约 1 mm³ 组织块。 组织块大小应尽量均一,以保证后续酶消化充分且批间稳定。 剪碎过程中避免过度碾压组织,以减少心肌细胞机械损伤。 4. 分批酶消化 采用低浓度胰酶、胶原酶 II、胰酶-胶原酶联合体系,或 pancreatin/collagenase 体系进行分步消化。组织块在 37℃ 条件下温和振荡或间断混匀,每轮消化后收集细胞悬液,并立即加入含血清培养基终止酶反应。 消化
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