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911
- 英文名:
E2F GFP Reporter Plasmid
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长期
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北京百奥莱博科技有限公司
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-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产供应北京E2F-GFP报告基因质粒哪里卖,我公司销*(代"售")全品类的细胞生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京E2F-GFP报告基因质粒哪里卖
品牌:百奥莱博
编号:SY0198
产地:国产|进口
英文名:E2F GFP Reporter Plasmid
E2F-GFP报告基因是用于检测E2F转录活性水平为目的的报告基因。E2F转录因子在细胞周期调控中起重要的作用。研究证明,E2F-1对细胞的生长具有双向调节作用,可以调节细胞的增殖和凋亡。因此,E2F与肿瘤发生、细胞凋亡、肿瘤抑制等均有密切关系。
E2F-GFP报告基因主要用于检测细胞中Cell Cycle信号通路、药物研究、基因过表达和RNAi的表型分析等。
pGME2F-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个E2F结合位点,可以高效地检测E2F的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因,更便于后续的检测。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。另外,由于质粒体积减小,使得E2F-GFP报告基因更易于转染。
质粒图谱

pGM E2F -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’
使用说明
pGME2F-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。
注意事项
1)本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2)为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
储存条件:-20℃。
欲了解更多北京E2F-GFP报告基因质粒哪里卖的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:
·STAT5-GFP报告基因质粒
编号:SY0203
英文名称:STAT5 GFP Reporter Plasmid
规格:1μg
STAT5-GFP报告基因是用于检测STAT5转录活性水平为目的的报告基因。Stat5是信号转导和转录活化蛋白(signal transduction and activator of transcription,Stat)家族的重要成员,参与了Jak/Stat信号通路调控。Stat5能够影响细胞的增殖、分化、存活与凋亡,并且在乳腺发育、免疫应答、干细胞自我更新调控、造血作用以及肿瘤的发生发展等中具有重要作用。
STAT5-GFP报告基因主要用于检测Jak/Stat信号通路、药物研究、基因过表达和RNAi的表型分析等。
pGMSTAT5-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个STAT5结合位点,可以高效地检测STAT5的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因,更便于后续的检测。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。另外,由于质粒体积减小,使得STAT5-GFP报告基因更易于转染。
质粒图谱

pGM STAT5 -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’
使用说明
pGMSTAT5-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。
注意事项
1)本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2)为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
储存条件:-20℃。
北京E2F-GFP报告基因质粒哪里卖关键词:E2F-GFP报告基因质粒,SY0198,E2F GFP Reporter Plasmid
·碘化丙啶(PI)
编号:SY0492
英文名称:Propidium iodide
规格:10mg
PI (碘化丙啶, Propidium Iodide)是一种可对DNA染色的细胞核染色试剂,是一种*化乙啶的类似物,在嵌入双链DNA后释放红色荧光。尽管PI不能通过活细胞膜,但却能穿过破损的细胞膜而对核染色。PI经常被用来与Calcein-AM、Hoechst 33258或 Hoechst 33342等荧光探针一起使用,能同时对活细胞和死细胞染色。常用于细胞凋亡(apoptosis)或细胞坏死(necrosis)的检测,常用于流式细胞仪分析。
CAS:25535-16-4
分子式:C27H34I2N4
分子量:668.4
纯度:≥95% by HPLC
储存条件:4℃避光
·腔肠素f
编号:SY0237
英文名称:Coelenterazine f
规格:1×500μg
本品为粉末形式供应的腔肠素f(Coelenterazine f),与天然腔肠素结构上的唯一差别在于将其R-1位酚基上的羟基替换成*(F),是水母发光蛋白(aequorin)的首选底物。当腔肠素f和水母蛋白(Apoaequorin)一起被部分氧化得以活化,生成腔肠素的亚稳态复合物(aequorin)。与天然腔肠素-水母蛋白(Apoaequorin)复合物产生的光子总数相比,此复合物仅产生80%的光子能。但是其优点在于:仅需非常少的时间来生成aequorin复合物(通常来说此步反应很慢,比如60min内仅有40%的天然腔肠素完成反应)。另外,当其与Ca2+接触,即可快速且高产量的发光,产能强度是天然腔肠素的20倍。具有最好的细胞渗透性。当需要极高的Ca2+检测灵敏度来研究水母蛋白再生实验,推荐使用本底物。
腔肠素(Coelenterazine)是自然界中资源最丰富的天然荧光素,是绝大多数海洋发光生物(超过75%)的光能贮存分子。腔肠素可作为许多荧光素酶的底物,比如海肾荧光素酶(Rluc),Gaussia分泌型荧光素酶(Gluc),以及包括水母发光蛋白(aequorin)和薮枝螅发光蛋白(Obelia)在内的光蛋白(Photoproteins)。其发光原理是:以腔肠素为底物的荧光素酶在有分子氧的条件下,氧化腔肠素,产生高能量的中间产物,并在此过程中发射蓝色光,峰值发射波长约为450~480nm。与甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶系统不同,腔肠素/荧光素酶系统不需要三磷酸腺苷(ATP),因此更便于体内生物荧光的研究。因此,腔肠素常用作基于荧光分析的报告基因检测以及活体动物检测的发光底物。
腔肠素还能在酶非依赖性的氧化体系中自发荧光,细胞和组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子能够增强该自发光信号,因此其也可用来检测细胞/组织内活性氧(ROS)水平。
腔肠素具有能量转移的特性— —生物发光共振能量转移(Bioluminescence Resonance Energy Transfer,BRET),利用此特性,当与荧光蛋白如GFP的突变体(增强的黄色荧光蛋白,EYFP)联合使用,在底物腔肠素存在的情况下,荧光素酶(如Rluc)催化底物发生蓝光,能量随之转移到EYFP上,发出绿光(~530nm)。这两个蛋白的相互作用可以通过Rluc融合蛋白和EYFP融合蛋白两者间的相互关系来评估,适用于研究蛋白-蛋白之间的相互关系。另外,由于BRET的信号可通过比较绿光和蓝光的量来进行测定,消减了因细胞数、细胞类型和其他实验变量而引起的数据变量,适用于高通量筛选如药物开发。
更为重要的一个功能,水母发光蛋白复合物(Aequorin)由22kDa的水母蛋白(Apoaequorin protein)、分子氧和底物腔肠素组成。只有当*离子(Ca2+)与该复合物结合后,腔肠素才能被氧化生成高能量产物Coelenteramide,同时释放出CO2和蓝色荧光(~466 nm)。正是此Ca2+依赖性的反应过程(见图1),使得腔肠素非常适用于监测活细胞内*离子水平。与常规的荧光*离子指示剂相比,其主要具有以下几个优点,1)能检测较大范围的*浓度 – 从0.1 μM至 >100μM;2)样品无自体荧光,背景荧光低于使用荧光*离子指示剂;虽然信号比使用荧光*离子指示剂弱,但是通过成像仪器可以得到更高的信噪比,因此具有更高的灵敏度。3)水母发光蛋白复合体能够稳定维持在细胞内,使其能够进行数小时至数天的*离子监测。

图1. 腔肠素作为水母发光蛋白辅助因子的Ca2+依赖反应流程
目前商业化的腔肠素应用最普遍的是天然腔肠素(Coelenterazine native),另外还有很多腔肠素衍生物如Coelenterazine h、Coelenterazine 400a、Coelenterazine cp、Coelenterazine f、Coelenterazine hcp、Coelenterazine n等被一一合成。理论上这些腔肠素可用于相同的实验,但是由于其发光波长,细胞膜渗透性,光量子效率上的差异,使得其在相同应用上表现出不同的实验效果。因此非常有必要根据具体实验目的选择最合适的腔肠素底物(见附录1,腔肠素及其衍生物的特性)。
CAS:123437-16-1
分子式:C26H20FN3O2
分子量:425.46
外观:黄色至褐色粉末
溶解性:溶于甲醇或者乙醇,不可溶于DMSO
纯度:>95%(TLC)
结构:

运输和保存方法:冰袋运输。粉末-20℃避光干燥保存,最好保存在惰性气体下以避免接触空气。
注意事项
1)腔肠素f粉末最好使用惰性气体-氮气或氩气,在密封良好的塑料管中避光保存于-20℃,长期保存于-70℃。管内即使有少量空气进入,也可能造成f氧化失活,使量化分析的结果难以在不同试验间进行比较。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
北京E2F-GFP报告基因质粒哪里卖关键词:E2F-GFP报告基因质粒,SY0198,E2F GFP Reporter Plasmid
嘧啶 Diacetyl monoxime 289-95-2
ARB13749 毒蛇因子(CVF)elisa检测操作说明书 Cobra venom factor,cvf ELISA KIT
SJ0680 Marker Ⅵ
C0801 兔血清(无菌过滤)
二聚对二甲* Brilliant Yellow 1633-22-3
五硼*(代"酸")铵 6-OHDA 12007-89-5
pGM-T重组菌落PCR鉴定试剂盒
BL0703 Trizol
BL0906 FITC标记兔抗猴IgG抗体
E0612 抗凝裂解马血(无菌) 100ml/500ml
改良Bielschowsky神经染色液 5×50ml
114-07-8 Erythromycin 红霉素
F030420 胶体金标记兔抗马IgG抗体 Rabbit Anti-Horse IgG*GOLD
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文献和实验小猪默默 请教高人: 我现在想用GFP做报告基因,在大肠杆菌中表达蛋白,想请教一下大家用GFP做报告基因是就是在含有GFP的质粒中扩GFP的全长吗?有没有人对GFP基因进行过改造?让报告基因的序列最短还能使表达的蛋白发荧光? Fasta921 1、如果你单纯想表达GFP蛋白,那么转化含GFP基因的表达载体即行。 2、如果你想表达GFP融合蛋白,那么在GFP上游或下游插入目的基因即可。只是有些细节要注意
蛋白;③含多个内部起始序列和多个终止转移序列 T多次跨膜的膜蛋白。 2. GFP的特性 绿色荧光蛋白(green fluorescent protein, GFP)是一种能够自身催化形成发色结构,并在蓝光或紫外光的激发下发出荧光的新型报告基因。GFP的发现及其研究迅速发展,使人们能够在正常生活条件下对活细胞内分子水平上进行的各种过程及其分子机理进行观察和研究。目前的研究表明,GFP能在多种生物,如细菌,酵母,植物及哺乳动物中
。整个实验操作流程提供长期稳定及规模可调的蛋白生产。与稳定基因表达相比,瞬时表达(TGE)主要适用于短期内制备重组蛋白,普健生物的瞬时表达使用悬浮细胞,能够完成mL到100L的体积的蛋白表达,一般在10天内即可快速转染,无需质粒DNA的遗传性选择。 08转染效率监测 基因的瞬时表达在24-72小时内就结束了。这种快速的瞬时表达非常适用于验证质粒表达和监测转染步骤的效率。 可以使用报告基因来确定优化条件,其表达蛋白易检测,在目的细胞中不含此蛋白或水平很低。常用的报告基因包括氯霉素乙酰转移酶(CAT
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