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- 库存:
大量
- 英文名:
T4 DNA Ligase
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海联迈生物工程有限公司
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
40,000U
| 产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
| LM7006 | T4 DNA Ligase | 40,000U | 49.00元 |
用途:T4 DNA Ligase常用于DNA片段和载体、linker或adaptor等的连接。也可以用于缺刻修复及Ligase介导的RNA检测。
来源:本T4 DNA Ligase由大肠杆菌表达,表达基因的来源为T4嗜菌体。
活性定义:One unit is defined as the amount of enzyme required to give 50% ligation of HindIII fragments of
lambda DNA in 30 min at 16℃ in 20 μl of the assay mixture containing 50 mM Tris, pH 7.5, 10 mM MgCl2, 10 mM DTT, 1 mM ATP, 25 μg/ml BSA and a 5'-DNA termini concentration of 0.12 μM (300 μg/ml)。200U等于1个Weiss unit,以Weiss unit计,本产品共200单位。
T4 DNA Ligase连接产物转化感受态后涂板LB平板的效果参考图1。
图1. 本T4 DNA Ligase的连接产物转化感受态细菌后涂板获得的LB平板效果图。A. 双酶切后的载体自连过夜;B. 双酶切后的载体与待插入片段过夜连接。
纯度:不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶,不含RNA酶,满足常规连接反应要求。
酶储存溶液:20 mM Tris, pH 7.5, 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA and 50% (v/v) glycerol。
10X Ligation Buffer:400 mM Tris, pH 7.8, 100 mM MgCl2, 100 mM DTT, 5 mM ATP。
失活或抑制:65℃孵育10分钟可以导致T4 DNA Ligase失活;NaCl或KCl浓度大于200mM时强烈抑制T4 DNA Ligase。
包装清单:
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| LM7006-1 | T4 DNA Ligase (1000U/μl) | 40, 000U |
| LM7006-2 | 10X Ligation Buffer | 0.3ml |
| — | 说明书 | 1份 |
-20℃保存。
注意事项:
对于普通的转化大肠杆菌的操作,不必对连接产物进行纯化,连接产物可以直接用于转化。但用电转方法转化大肠杆菌时,通常宜先用DNA纯化试剂盒或酚氯仿抽提方法等纯化DNA,然后再进行电转。
需进行平端连接或快速连接时,推荐使用联迈生物的快速DNA连接试剂盒(LM7002/LM7003)。T4 DNA Ligase可以进行平端连接,但效率较低。
普通连接反应不必进行凝胶电泳观察。如果需要对于连接产物进行凝胶电泳观察,推荐先在65℃孵育10分钟使
T4 DNA Ligase失活,以避免T4 DNA Ligase和DNA结合导致的条带位置迁移(band shift)。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验Ligation of DNA with T4 DNA Ligase
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