DAB法显色试剂盒(山羊IgG)现货价格

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北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应DAB法显色试剂盒(山羊IgG)现货价格，产品信息：

类别：蛋白质研究

英文名：Western Blotting Goat IgG DAB Chromogenic Reagent Kit

产品名	产品编号	包装规格
DAB法显色试剂盒(山羊IgG)	QN1160	1盒

编号：QN1160

品牌：百奥莱博

规格：1盒

英文名：Western Blotting Goat IgG DAB Chromogenic Reagent Kit

本试剂盒主要用于western blotting的DAB显色，含有抗山羊IgG酶标二抗。

 

SDS-PAGE电泳后，蛋白质按照分子量大小分离，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）后，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶标记的第二抗体起反应，经过底物显色以检测电泳分离的特异性的蛋白。

 

试剂盒组分：

封闭试剂————————————30g

10倍浓缩抗体稀释液———————50ml

酶标二抗————————————0.5ml，效价1:500～3000

20倍DAB浓缩显色液-———————5mlA+5mlB。

 

常规电泳转膜后:

1) 清洗转印膜：将膜剥离下后，作好标记，一般在左上角剪一缺口。室温用TBS-T 漂洗3 次每次5min,以尽量洗去转印膜上的SDS，防止影响后面的抗体结合。

2) 按5g 封闭试剂加100ml 双蒸水计，配制膜封闭液，配好的膜封闭液为乳白色悬液，将漂洗过的转印膜，封闭液内，摇床震动，室温封闭30min。用TBS-T ，PH7.6 洗液，室温漂洗3 次每次5min。

3) 将10×抗体稀释液用双蒸水稀释成1×（10ml 10×抗体稀释液加入90ml 双蒸水，混匀，可4℃保存三个月）。此稀释液可作为一抗和二抗的稀释液。

4) 用1×的抗体稀释液稀释抗体。根据用量以及一抗的推荐稀释浓度来稀释一抗。将杂交膜放入杂交袋中，加入一抗工作液，封口，4℃孵育过夜或37℃摇动孵育2h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。注：如果所加一抗不同，可在此步将膜沿电泳方向剪成条，分别作好标记，分开孵育。

5) 用TBS-T ，PH7.6 洗液，室温漂洗3 次每次5min。

6) 用稀释好的抗体稀释液稀释抗体。根据用量，按10ml 抗体稀释液加入10ul HRP 标记二抗的比例，配制二抗工作液。将杂交膜放入杂交袋中，加入二抗工作液，封口， 37℃摇动孵育1h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。

7) 用TBS-T ，PH7.6 洗液，室温漂洗3 次每次10min。

8) 配制DAB 显色：根据用量，取TBS-T 4ml，加入DAB 显色液A、DAB 显色液B 各200ul，混匀，加在膜正面，室温下显色。在目标条带显出后，而且背景未出时，放入水中终止显色。

 

注意事项：

1. 请根据一抗来源选择试剂盒。

2. western blotting DAB显色法操作简单，但其敏感性与ECL发光发有一定的差距，一般只适用于丰度较高的蛋白。

3. 可以根据显色结果来优化实验反应时间。如背景过深，可延长膜封闭时间，加长最终漂洗次数与时间。如果条带过弱，可延长抗体孵育时间。

4. 如果完全没有条带，请检查前期蛋白处理及实验过程， 如果确认无误，反复两次依旧无结果，请换用ECL发光法显色。

5. TBS-T（0.01M）配制方法：称取NaCl 8.5g ，Tris 1.21g ，用800ml 的双蒸水溶解，用盐*(代"酸")调PH 到7.6，再加入0.5ml Tween－20，用双蒸水加至1000ml，混匀即可。（也可按照自己的配制习惯来配制）

 

储存条件：-20℃避光，有效期一年。

DAB法显色试剂盒(山羊IgG)现货价格专业优质供应商：北京百奥莱博科技有限公司

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编号	类别	名称
QN0157	碳水化合物类	1,5-二磷酸-D-核酮糖
QN1275	蛋白质研究	非变性蛋白预制胶(15%)
QN0895	DNA纯化	细菌基因组DNA提取试剂盒
QN0669	其他生化试剂	EDC·HCL
QN0286	蛋白类	Human HDL I125放射性标记高密度脂蛋白
QN0138	碳水化合物类	麦芽三糖
QN0038	抗生素类	盐*(代"酸")克林霉素
QN0785	其他生化试剂	羟基脲
QN1299	细胞凋亡与增殖	Hoechst 33258染色液
QN0491	酶和辅酶	β-葡萄糖苷酶
QN0143	碳水化合物类	L-甘露糖
QN1023	其他分子生物学试剂	EB染色剂
QN1165	蛋白质研究	40%Acr/Bis(37.5:1)制胶液
QN0587	其他生化试剂	α-酮戊二酸
QN0059	抗生素类	环丙沙星
QN0969	核酸扩增(PCR)	2×Pfu PCR MasterMix (含染料)
QN0842	其他生化试剂	右旋糖酐5000
QN0913	DNA纯化	DNA抽提试剂(25:24:1)
QN0114	维生素类	维生素E(生育酚)
QN0960	核酸扩增(PCR)	通用引物 Random
QN0428	酶和辅酶	辅羧酶(TPP)
QN0367	蛋白类	牛血清白蛋白 BSA-Ⅴ
QN1159	蛋白质研究	DAB法显色试剂盒(小鼠/兔IgG)
QN1252	蛋白质研究	4％多聚甲醛

 

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