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猪细小病毒抗体(PPV)检测试剂盒(ELISA)厂家

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  • 艾恩斯
  • 阴性对照的OD值不高于0.12;阳性对照的OD值不低于0.55
  • INS0010010
  • 湖北黄石
  • 2025年07月15日
    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 供应商

      黄石市艾恩斯生物科技有限公公司

    • 样本

      血清

    • 库存

      74

    • 标记物

      HRP

    • 适应物种

    • 应用

      检测猪血清中细小病毒抗体,可用于猪细小病毒抗体疫苗免疫效果评价

    • 检测方法

      酶联免疫吸附试验(ELISA)

    • 检测范围

      阴性对照的OD值不高于0.12;阳性对照的OD值不低于0.55

    • 规格

      48T/96T

    仅供科研使用,不得用于临床检验。

    使用前,请务必仔细阅读说明书,如有不清楚的,请拨打24h技术支持专线:0714-6338558或18171667592/18108699172,咨询清楚再进行实验。



    【产品名称】
    通用名称:猪细小病毒抗体检测试剂盒(ELISA)
    英文名称:Test Kit for Antibodies to Porcine Parvovirus(ELISA)

    【包装规格】
     48T/盒,96T/盒
    【预期用途】
    本试剂用于检测血清中细小病毒抗体,可用于猪细小病毒抗体疫苗免疫效果评价。

    【检验原理】
    本试剂盒采用酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预包被猪细小病毒抗体抗原(固相抗原,货号:INS0010010C)的微孔酶标板中,加入猪细小病毒抗体阴阳性对照(货号:INS0010010J)和待测样本,温育洗涤,再加入另一株HRP标记的酶标抗体(酶标抗体,货号:INS0010010E),经过温育与充分洗涤,去除未结合的组分,在微孔板固相表面形成固相抗原-抗体-酶标抗体的夹心复合物。加底物A和B,底物在HRP催化下,产生蓝色产物,在终止液(2M 硫酸)作用下,最终转化为黄色,在酶标仪上测定吸光度(OD值),吸光度(OD值)与待测样品中猪细小病毒抗体的浓度正相关,通过测定各反应孔中的吸光值,即可知样品是否含有猪细小病毒抗体

    【检验方法】
    试剂准备
    1、使用前,所有的组分都要至少复温2h,确保充分复温到室温。
    2、浓缩洗涤液:从冰箱取出的浓缩洗涤液,会有结晶产生,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解。浓缩洗涤液与蒸馏水,按1:20稀释,即1份的浓缩洗涤液,添加19份的蒸馏水。
    3、底物:底物液A和B,在使用前,按1:1体积充分混合,混合后10分钟内使用。

    操作程序
    1、所有试剂和组分都先恢复到室温,标准品、质控品和样品,建议做复孔。
    2、按前面试剂准备中描述的方法,配制好试剂盒各种组分的工作液。
    3、从铝箔袋中取出所需板条,剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。
    4、设置阴阳性对照孔、样本孔,阴阳性对照孔各加对照品100μL,样本孔加稀释后样本100μL。
    5、用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱温育30min。
    6、揭开封板膜,弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置20s,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复4次(共洗板5次)。若使用自动洗板机,请按洗板机操作程序进行洗板,添加浸泡20s的程序,可以提高检测的精度。洗板结束,加底物前,要在干净不掉屑的纸上,充分拍干反应板。
    7、所有孔加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体100μL。
    8、用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱温育30min。
    8、揭开封板膜,弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置20s,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复4次(共洗板5次)。若使用自动洗板机,请按洗板机操作程序进行洗板,添加浸泡20s的程序,可以提高检测的精度。洗板结束,加底物前,要在干净不掉屑的纸上,充分拍干反应板。
    9、将底物A和B按1:1体积充分混合,所有孔中加入底物混合液100μL。用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱温育10min。
       10、每孔加终止液50μl,混匀,于450nm(可用630nm作参比波长)测定各孔吸光值(A值),无参比波长用空白孔调零(即所有孔吸光值减去空白孔吸光值)。

    【参考值】
    实验正常的情况下,阴性对照≤0.12,阳性对照≥0.58。
    【检验结果的解释】
    1.样品A值≥0.37为阳性;样品A值在0.2到0.37之间为可疑;样品A值<0.2为阴性。
    2.本实验结果为阴性或可疑时表明猪只抗体水平不足,建议补打相应疫苗。
     

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