北京促销ER-GFP报告基因质粒价格

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京促销ER-GFP报告基因质粒价格，我公司供应的细胞生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京促销ER-GFP报告基因质粒价格
英文名：Estrogen Receptor (ER) GFP Reporter Plasmid
规格：1μg
编号：SY0180
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
ER-GFP报告基因是用于检测ER转录活性水平为目的的报告基因。ER(Estrogen Receptor)属于类固醇受体超家族中的一员，雌激素通过与它们的结合发挥生物学功能。ER在激素源性肿瘤、骨骼的形成、脂肪分化、能量代谢等方面有重要的生物学功能。

ER-GFP报告基因主要用于检测细胞中Estrogen Receptor信号通路、药物研究、基因过表达和RNAi的表型分析等。

pGMER-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个ER结合位点，可以高效地检测ER的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因，更便于后续的检测。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得ER-GFP报告基因更易于转染。

质粒图谱



pGM ER -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’

使用说明
pGMER-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。

注意事项
1）本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。

北京促销ER-GFP报告基因质粒价格正在火爆热销，除此之外，为您推荐下别热销产品：

·预活化正钒酸*溶液
编号：SY0322
英文名称：Sodium Orthovanadate (Vanadate) Solution, Pre-activated
规格：5ml (200mM)
正钒酸*英文名称为Sodium orthovanada，是一种常用的竞争性磷酸酶抑制剂，可以抑制碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)，酸性磷酸酶(acid phosphatase)，酪*酸磷酸酶(tyrosine phosphatase, TP)等，也可以抑制Na+/K+ATPase等ATPase。常用于抑制蛋白去磷酸化或促进蛋白的磷酸化激活，在提取细胞或组织蛋白时常用于保持蛋白的磷酸化状态。在加入EDTA或经稀释后，正反酸*的抑制表现可逆性。

正钒酸*使用前需要先被充分活化（去聚合）以获得最大的磷酸酶抑制活性。本产品为预活化正钒酸*溶液，可以直接使用，浓度为200mM，pH10.0。常见使用浓度范围为1-10 mM。

中文别名：原钒酸*
英文别名：Decavanadate; Sodium vanadate
CAS：13721-39-6
分子式：Na3VO4
分子量：183.91 
储存条件：-20℃，有效期1年

注意事项
1）避免反复冻融，可根据单次用量进行分装保存，建议反复冻融次数不得超过3次；
2）产品融化过程中，可通过加热到90-100℃并经过旋涡振荡以使晶体充分溶解；
3）若在产品使用过程中，发现产品颜色变黄，则不可使用。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。



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·Alexa Fluor 594标记驴抗山羊IgG(H+L)
编号：SY0733
英文名称：Alexa Fluor 594 AffiniPure Donkey Anti-Goat IgG (H+L)
规格：100μl
本品是由Alexa Fluor 594标记的驴抗山羊IgG（H+L），使用抗原偶联的琼脂糖微珠从驴抗血清内亲和色谱纯化所得。免疫电泳和/或ELISA法检测显示本品特异性结合完整的山羊IgG分子，也会与其他山羊免疫球蛋白的轻链结合。本品预先与相近物种包括鸡、豚鼠、叙利亚仓鼠、马、人、小鼠、兔、大鼠血清蛋白经过亲和吸附处理，ELISA和/或固相免疫吸附检测证实本品与以上物种几乎无交叉反应。但可能会与其他物种免疫球蛋白发生交叉反应。本品不会识别非免疫球蛋白类的血清蛋白。

Alexa Fluor 594的光谱性质类似于Texas Red，Amax（最大激发波长）为591nm，Emax（最大发射波长）为614nm。本品适合做多标实验，广泛应用于多种免疫学实验如免疫细胞化学（ICC），流式细胞术（FC）以及免疫组化（IHC）等。

浓度：0.75mg/ml
缓冲液：0.005M 磷酸*，0.125M *化*, pH 7.6
稳定剂：7.5mg/ml BSA（无IgG，蛋白酶），50% 甘油
荧光素：Alexa Fluor 594, Amax=591, Emax=614
防腐剂：0.025% 叠氮化*
推荐稀释比例：1:50～400（适合多数实验）
储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期一年。

·热启动高保真酶
编号：SY0038
英文名称：HotStart Pfu DNA Polymerase
规格：100U
HotStart Pfu DNA Polymerase在Pfu DNA Polymerase的基础上添加了在常温下能够抑制5’→3’聚合酶活性和3’→5’外切酶活性的两种单克隆抗体，可进行高特异性的热启动(Hot Start)PCR，扩增产物为平端。Pfu DNA Polymerase是经过基因工程改造的，新一代超保真DNA聚合酶，具有极高的扩增效率和广泛的模板适应性，可用于几乎所有PCR反应。其行进性 (processivity)得到了大幅度提升，即使是非常复杂的模板，也能准确快速的完成反应。其错配率是普通Taq酶的1/52，是Pfu酶的1/6；且扩增速度可以达到15秒/kb。

本产品中附带的5×HS Pfu buffer对于简单或复杂模板、短片段或长片段PCR扩增都具有良好的适应性。缓冲液中已经含有10 mM Mg2+ (1×终浓度为2 mM)，可以使用产品中提供的DMSO/MgSO4对反应体系进行优化。另外，产品中附带的PCR Enhancer可有助于高GC含量片段的扩增。

产品组份：
5×HS Pfu buffer(with 10 mM MgSO4)：1.25 ml
25 mM MgSO4：1 ml
dNTP Mix(10 mM each)：100 μl
HS Pfu DNA Polymerase(1 U/μl)：100 μl
5×PCR Enhancer：500 μl
DMSO：100 μl
10×Loading buffer：1.25 ml

活性定义：用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，74℃ 30分钟内，摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位（U）。
储存条件：-20℃

质量控制：
核酸外切酶残留检测：10 U本品和0.6 μg λ-HindⅢ在74 ºC下孵育1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测：10 U本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在74 ºC下孵育1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
大肠杆菌残留DNA检测: 50 μl体系中，加入2U本品，以ddH2O为模板，扩增E.coil 16s rDNA基因。35个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳，EB染色，无扩增条带。
功能检测1：50 μl PCR体系中加入1U本品，以100 ng人基因组DNA为模板扩增α-1-antitrypsin基因。30个循环后取10% PCR产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳，EB染色，观察到单一的8.2 kb条带。
功能检测2：50 μl PCR体系中加入1U本品，以10 ng λDNA为模板扩增30个循环，取10% PCR产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳，EB染色，观察到单一的15 kb条带。

使用方法：
1. 所有操作请在冰上进行，各组分解冻后请充分摇匀。为了防止HS Pfu DNA Polymerase的校对活性降解引物，请将聚合酶最后加入反应体系中。各组分使用完毕后及时放回-20℃。5×HS Pfu buffer请勿长时间敞口放置。

 

ddH2O	to 50 μl
d5×HS Pfu buffer (with 10 mM MgSO4)	10 μl
d25 mM MgSO4a	optional
ddNTP Mix(10 mM each)b	1 μl
dDMSOc	optional
d5×PCR Enhancerd	optional
d模板DNAe	optional
dForward Primer(10 μM)	2μl
dReverse Primer(10 μM)	2 μl
HS Pfu DNA Polymerase(1 U/μl)f	1 μl

【注】：
a. 对于大多数PCR反应，Mg2+最佳终浓度为1.5-2 mM。体系中已含有终浓度为2 mM Mg2+，如有需要，可用25 mM MgSO4，以0.2-0.5 mM为间隔向上摸索Mg2+最佳使用浓度。
b. 请勿使用dUTP和带有尿嘧啶的引物或模板。
c. 扩增子GC含量>60%时加入终浓度3%的DMSO有可能会有助于扩增。
d. 推荐仅当扩增子GC含量>60%且优化条件也无法正常扩增时使用；可能会降低保真度。
e. 不同模板最佳反应浓度有所不同，下表为50 μl反应体系推荐模板使用量：

模板种类/扩增长度	＜1 kb	1 kb～10 kb	＞10 kb
基因组DNA	50 ng～250 ng	100 ng～300 ng	150 ng～400 ng
质粒或病毒DNA	10 pg～20 ng	10 pg～20 ng	1 ng～30 ng
cDNA	1～5 μl(不超过PCR反应总体积的1/10)

f. 推荐的酶的终浓度为1U/50 μl反应。然而，根据扩增子的长度和复杂程度不同，可将HS Pfu DNA Polymerase在0.5-2U/50 μl反应之间进行优化。但请勿超过2U/50 μl，尤其当扩增子长度大于5 kb时。HS Pfu DNA Polymerase具有较强的校对活性。如扩增产物需要进行TA克隆，加A之前必须进行DNA纯化。

2. 推荐PCR反应条件：

循环步骤	温度	时间	循环数
预变性a	95℃	30 sec～3 min	1
变性b	95℃	5～10 sec	25～35循环
退火c	45℃～72℃	10～30 sec
延伸d	72℃	15～30 sec/kb
彻底延伸	72℃	5～10 min	1

【注】：
a. 推荐大多数模板的预变性温度为95℃，时间为：质粒或病毒DNA，30 sec，基因组2 min，cDNA 3 min；对于高GC含量模板，预变性温度需提升至98℃，变性时间为2～4 min；对于超过10 kb的扩增子，预变性温度需降低至92℃，变性时间不超过2 min。
b. 对于大多数模板在95℃变性时间设为5～10 sec即可。对于高GC含量模板，变性温度需提升至98℃；对于超过10 kb的扩增子，变性温度需降低至92℃，并延长变性时间至15 sec。
c. HS Pfu DNA Polymerase能够促进模板和引物高效退火。一般来说，退火温度设置为引物Tm值±3℃范围内之间即可。如果需要，可以建立一个温度梯度反应去寻找引物模板结合的最适温度。退火时间太长可能导致扩增产物在胶上呈现弥散状。因此，推荐退火时间设置为10 sec即可。对于一些困难模板，退火时间可在10～30sec之间调整。
d. 对于大多数扩增反应，延伸过程可在72℃进行。对于超过10 kb的扩增片段，需降低延伸温度至68℃。延伸时间取决于扩增片段的长度和模板的复杂性。使用质粒等复杂程度较低的DNA做模板时，可使用15 sec/kb的延伸时间；使用基因组
cDNA等复杂程度较高的DNA做模板时，延伸时间应为30 sec/kb。太长的延伸时间会导致非特异性扩增增加，因此延伸时间请勿超过30 sec/kb。

3. 长片段PCR指南：
*使用高质量的模板；
*使用长引物。将引物加长至Tm值68～72℃，把退火/延伸温度合并为68℃。这样可以显著提高扩增特异性；
*适当提高酶量，但50μl反应体系内不要超过2 U；
*添加DMSO，以1%的浓度递增。调整范围为0%～6%；
*推荐反应条件设置：

循环步骤	温度	时间	循环数
预变性	92℃	2 min	1
变性	92℃	5～10 sec	25～35循环
延伸	68℃	15～30 sec/kb
彻底延伸	68℃	5～10 min	1

4. 高GC含量模板PCR指南：
*使用高质量的模板；
*提高变性温度至98℃；
*添加DMSO，以1%的浓度递增。调整范围为0%～8%；
*添加5×PCR Enhancer；
*推荐反应条件设置：

循环步骤	温度	时间	循环数
预变性	98℃	3 min	1
变性	98℃	10 sec	25～35循环
退火	45℃～72℃	10～30sec
延伸	72℃	15～30 sec/kb
彻底延伸	72℃	5～10 min	1

引物设计注意事项:
1）引物3’端最后一个碱基最好为G或者C；
2）引物3’端最后8个碱基应避免出现连续错配；
3）引物3’端尽量避免发夹结构出现；
4）引物的Tm值调整至55℃-65℃之间。
5）引物额外附加序列，即与模板非配对序列，不应参与引物Tm值计算；
6）引物的GC含量控制在40%-60%之间；
7）正向引物和反向引物Tm值以及GC含量尽可能一致。


北京促销ER-GFP报告基因质粒价格关键词：ER-GFP报告基因质粒,SY0180,Estrogen Receptor (ER) GFP Reporter Plasmid

白蛋白检测试剂盒(*甲*(代"酚")紫比色法)   100T
BTN100937 φ29 DNA聚合酶 φ29 DNA Polymerase
ARB13808 豚鼠降*素基因相关肽(CGRP)尿液中含量检测 Guinea pig calcitonin gene related Peptide,cgrp ELISA KIT
BL1141 ANNEXIN V-FITC/PI凋亡检测试剂盒
HC0035 Transwell 聚碳酸酯膜嵌套8.0um
无水乙酸* AIBA 127-09-3
超纯dCTP(100mM) 
ARB10416 人可溶性髓系细胞触发受体-1(sTREM-1)含量测试 Human soluble triggering receptor expresses on myeloid cells-1,strem-1 ELISA KIT
2-甲氧基酚 Sodium bitartrate monohydrate 90-05-1
SJ0747 人粒细胞和白细胞分离液
BTN60912 非酶RNA清除剂2.0 RNA Erasol 2.0
94-75-7 2,4-D   2,4-二**氧乙酸
ARB13728 兔热休克蛋白90(HSP-90)Elisa分析 Rabbit heat shock protein 90,hsp-90 ELISA KIT
偶氮胂Ⅰ D-Phenylglycinol 3547-38-4
BTN100303 玻璃珠法柱式真菌DNAOUT Glassbeads Column Fungal DNAOUT
PY01-109  五号胆盐  25克  
68-26-8 Vitamin A  维生素A(视黄醇)
ARB11070 人轮状病毒抗体(RV-Ab)Elisa方法检测 

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