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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
695
- 英文名:
C/EBP Probe For EMSA(10μM)
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
C/EBP consensus oligo的序列如下:
5"-TGC AGA TTG CGC AAT CTG CA-3"
3"-ACG TCT AAC GCG TTA GAC GT-5"
本EMSA探针可以使用T4 Polynucleotide Kinase在[γ-32P]ATP存在的情况下进行标记,也可以用于生物素标记。
注意事项:
1. 避免加热到40℃以上,温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。
储存条件:-20℃,有效期一年。
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文献和实验有利于RNA的完整性的保持。 doi: 10.1371/journal.pone.0001261. 二、石蜡切片 收到样本以后公司会进行石蜡切片,为了能更好的把切片贴到Visium Spatial玻片的捕获区域,需要先切一些切片来摸索样本在水浴中的展片时间,用Milli-Q水注满水浴,确保温度设定在42°C,并且没有气泡和颗粒物;将切片机设置为5μm(区别于OCT样本切片的10-15μm),开始切片。对于有暴露组织的组织块,丢弃前几个切片,开始收集后续的切片,让切片漂浮在水浴表面
。 (3)探针制备 根据实验要求设计不同的探针并添加标记,可以合成核酸后自行添加,部分已知蛋白有商业化的抗体也可以直接购买。现在大多数实验室已经不再使用放射性标记,生物素使用相对较多。 2、形成蛋白-探针复合物 (1)在0.5ml离心管中按顺序将下列组份混匀: 蛋白样本(2-5μg) Xμl poly d(I-C) 1μl Binding
Shift Assay ) 凝胶迁移实验是一种研究DNA与蛋白质或RNA与蛋白质相互作用的常用技术。这项技术是基于DNA/蛋白质或RNA/蛋白质复合体在聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)中有不同迁移率的原理。当核转录因子与一条人工合成的特异的DNA或RNA结合后,其在PAGE中的迁移率将小于未结合核蛋白转录因子的DNA,从而检测到活化的与DNA或RNA结合的蛋白转录或调节因子。 发展: 从发展史来看,这项实验技术起初是用32P同位素标记人工合成的寡核苷酸形成探针,但是由于同位素的放射
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