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一步法RT-PCR试剂盒厂家现货

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  • ¥190 - 1980
  • 百奥莱博
  • ALH270-TQP
  • 北京
  • 2025年07月12日
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      778

    • 英文名

      One Step RT-PCR Kit

    • 保质期

      半年

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      2~8℃

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    北京百奥莱博供应的一步法RT-PCR试剂盒厂家现货用于生化科研试验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多一步法RT-PCR试剂盒等核酸扩增(PCR)产品请联*(代"系")我司咨询订购。


    名称:一步法RT-PCR试剂盒厂家现货
    英文名:One Step RT-PCR Kit
    规格:50μl×50次|50μl×100次
    编号:ALH270
    品牌:百奥莱博
    本试剂盒是专为一步法RT-PCR实验配制的,使用该试剂盒能够方便快捷的在同一个反应管内完成逆转录反应和PCR扩增反应。反应过程中无需打开管盖添加试剂,避免了污染的同时提高了检测灵敏度和实验效率。本试剂盒包括突变改造M-MuLV逆转录酶、热启动HotMaster Taq DNA聚合酶和RNasin抑制剂mix、同时包含适用于逆转录和PCR扩增的优化独特反应体系。本酶M-MuLV(RNase Hˉ)的RNase H活性缺失,与M-MuLV 相比,具有更强的延伸能力和稳定性,可用于较长的cDNA合成以及高比例的全长cDNA文库的构建等。同时该酶提高了耐热性,可以在42-50℃反转录,提高了复杂二级结构,GC含量丰富模板反转录效率。

    试剂盒组分(50次):
    2×RT-PCR Mix-—————————1.25ml
    OneStep Enzyme Mix———————100μl
    RNase free H2O-—————————1.5ml

    应用范围:适用于高拷贝、低拷贝基因检测;部分高GC 含量或具有复杂二级结构的RNA 模板。

    注意事项:
    1. 避免RNase污染。
    2. 为保证反应成功建议使用高质量的RNA模板
    3. 不同的片段,所需最佳RNA模板用量不同,过多的RNA会抑制反应,建议根据反应调整模板用量。
    4. 不能使用Oligo(dT) 和Random Primer 合成cDNA。

    储存条件:-20℃,有效期半年。

    本品别名:一步法反转录试剂盒|一步法RT-PCR试剂盒

    更多有关一步法RT-PCR试剂盒厂家现货的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:

    ·通用型植物RNA提取试剂盒(Dnase I)
    编号:ALH033
    英文名称:Universal Plant RNA Extraction Kit
    规格:50次
    本试剂盒适用于快速提取植物组织RNA,使用独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,然后用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,DNase直接在柱上消化残留DNA,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除, 最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。

    试剂盒特点:
    1.完全不使用有毒的Beta-巯基乙醇,*酚,*仿等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
    2.简捷,单个样品操作一般可在40分钟内完成,世界上最简单快速的试剂盒。
    3.配套DNase I 柱上消化,得到的RNA不残留DNase消化,可直接用于反转录荧光定量PCR、二代测序、芯片、RACE等实验。
    4.世界领先,是同类产品中适应性最广泛的试剂盒,可以提取包括水稻、玉米、小麦、拟南芥、番茄、烟草和一般多糖多酚如棉花、冬青等植物。
    5.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.2,无DNA残留,可直接用于荧光定量PCR、RT-PCR、芯片、二代测序、Northern-blot等各种实验。

    试剂盒组份:

     
    组份 50次
    裂解液RPA 50ml
    去蛋白液RW1 40ml
    漂洗液RW 10ml
    RNase-freeH2O 10ml
    DNaseBuffer 1.25ml×2/td>
    Rnase free DNaseI 0.25ml
    吸附柱和收集管 50套


    注意事项:
    1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机。
    2. 需要自备乙醇,研钵(可选)。
    3. 裂解液RPA和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。

    提示:第一次使用前请先在漂洗液RW 瓶加入指定量无水乙醇!

    1. 直接研磨法(推荐):
    a. 新鲜植物组织称重后取100mg 迅速剪成小块放入研钵(冰冻保存或者液氮保存样品可直接称重后取100mg 放入研钵), 加入1 ml 裂解液RPA 室温下充分研磨成匀浆,注意应该迅速研磨让组织和裂解液RPA 立刻充分接触以抑制RNA酶活性。
    b. 将裂解物转入离心管,剧烈摇晃振荡15 秒,13,000rpm 离心5-10 分钟,沉淀不能裂解的碎片。
    c. 取480μl 裂解物上清(在不超过RNA 吸附柱能力的情况下可以取更多或者全部上清,这样可以提高产量)转到一个新离心管。加入上清体积一半的无水乙醇(0.5 体积),此时可能出现沉淀,但是不影响提取过程,立即吹打混匀,不要离心。
    d. 立刻接操作步骤的步骤3。

    2. 液氮研磨法:
    a. 取500μl 裂解液RPA,转入1.5ml 离心管中。
    b. 液氮中研磨适量植物组织成细粉后,取50mg 细粉转入上述装有RPA 的离心管, 立即用手剧烈振荡20 秒,充分裂解。
    c. 用吸头吹打混匀帮助裂解或者剧烈涡旋震荡直到得到满意匀浆结果(或者电动匀浆30 秒),可以剪切DNA,降低粘稠度和提高产量。
    d. 将裂解物13000rpm 离心5-10 分钟,沉淀不能裂解的碎片。
    e. 取裂解物上清(在不超过RNA 吸附柱能力的情况下可以取更多的上清,这样可以提高产量)转到一个新离心管。加入上清体积一半的无水乙醇(0.5 体积),此时可能出现沉淀,但是不影响提取过程,立即吹打混匀,不要离心。
    f. 立刻接操作步骤的步骤3。
    注意:以上液氮研磨法用户可以根据需要加倍处理,可以提高产量。也就是使用1ml 的裂解液RPA和100mg的样品。

    3. 将混合物(每次小于720μl,多可以分两次加入)加入一个吸附柱 中,(吸附柱放入收集管中)13000rpm 离心2 分钟,弃掉废液。确保离心后液体全部滤过去,膜上没有残留,如有必要,可以加大离心力和离心时间。

    4. 加350μl 去蛋白液RW1,室温放置1 分钟,13,000rpm 离心30 秒,弃掉废液。

    5. DNase I 工作液配制:取45μl DNase I buffer 和5μl RNase free DNase I 在离心管轻轻吹打混匀成工作液(处理多个离心柱子要按照比例放大制备工作液)。

    6. 向吸附柱 中央加入50μl 的DNase I 工作液,室温(20-30℃)放置15 分钟。
    注意:直接将工作液滴在膜中央上,不要让工作液滴在O 型圈或是离心柱管壁上。

    7. 向吸附柱 中加入350μl 去蛋白液RW1, 12000rpm 离心30 秒,弃废液,将吸附柱放回收集管中。

    8. 加入500μl 漂洗液RW(请先检查是否已加入无水乙醇!),13000rpm 离心30秒,弃掉废液。加入500μl 漂洗液RW,重复一遍。

    9. 将吸附柱 放回空收集管中,13000rpm 离心2 分钟,尽量除去漂洗液, 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。

    10. 取出吸附柱,放入一个RNase free 离心管中,根据预期RNA 产量在吸附膜的中间部位加30-50μl RNase free water(事先在70-90℃水浴中加热可提高产量),室温放置1 分钟,12000rpm 离心1 分钟。

    11. 如果预期RNA 产量>30μg,加30-50μl RNase free water 重复步骤10,合并两次洗液,或者使用第一次的洗脱液加回到吸附柱重复步骤一遍(如果需要RNA 浓度高)。

    洗脱两遍的RNA洗脱液RNA浓度高,分两次洗脱合并洗脱液的RNA产量比前者高15–30%,但是浓度要低,用户根据需要选择。

    注意:如果不需要做荧光定量PCR,仅仅做普通的反转录,克隆基因片段,可以省略DNA 酶柱上消化的步骤,具体就是第4 步骤的“加350μl 去蛋白液RW1”改成“加700μl 去蛋白液RW1”,同时省略步骤5,6,7。

    储存条件:室温,有效期12个月(DNase I及其Buffer需-20℃保存)


    一步法RT-PCR试剂盒厂家现货关键词:一步法RT-PCR试剂盒,一步法反转录试剂盒


    ·两步法耐热RT-qPCR试剂盒
    编号:ALH193
    英文名称:Two steps heat-resistant RT-qPCR Kit
    规格:50μl×25次|50μl×50次
    本系统由两个试剂盒组合而成。一个是反转录第一链耐热合成试剂盒(ALH268),一个是2×SYBR Green qPCR Mix(ALH185)。首先由反转录第一链试剂盒合成cDNA,然后以cDNA做模板用2×SYBR Green qPCR Mix进行荧光定量PCR扩增。

    储存条件:-20℃。

    ·血清miRNA提取试剂盒
    编号:ALH601
    英文名称:Serum microRNA Extraction Kit
    规格:50次
    本试剂盒采用独特的裂解液迅速直接裂解血清血浆RNA酶,强烈有机抽提去除蛋白和DNA,RNA包括微小分子RNA在高浓度乙醇下吸附于离心柱内特殊硅基质膜, 再通过一系列特殊漂洗液快速的漂洗-离心的步骤,漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质进一步去除, 最后低盐的洗脱液将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。

    近年来对RNA干扰和调节性小RNA的广泛研究迫切需要一种能有效提取15~30核苷酸左右大小RNA(包括siRNA和miRNA)的试剂盒。但是传统的RNA提取方法如硅胶膜不能有效吸附回收,酚/胍抽提和异丙醇或者乙醇沉淀并不能有效沉淀回收微小分子RNA,对于血清、血浆样本更是由于其自身特点更难提取。本试剂盒的出现很好的解决了这一问题

    产品组分:
    Lysis buffer————避光50 ml
    Wash Solution 1————12 ml(第一次使用前加入28ml 无水乙醇)
    Wash Solution 2/3————10 ml(第一次使用前加入42ml 无水乙醇)
    RNase-free H2O————10 ml
    吸附柱和收集管————50 套

    产品特点:
    1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
    2.也不需要乙醇沉淀等容易丧失微小分子RNA的步骤。
    3.特殊的裂解液配方,可以处理更多的血清/血浆样品。
    4.多次柱漂洗确保高纯度,可用于RNAi,RT-PCR,Northern-blot和各种实验。

    注意事项
    1. 第一次使用前请先在Wash Solution 1 瓶和Wash Solution 2/3 瓶中加入指定量乙醇,加入后请及时打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!
    2. 除说明外,所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13000rpm 的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
    3. 需要自备乙醇,*仿。
    4. Lysis buffer 和Wash Solution 1 含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
    5. RNA 纯度及浓度检测:
    一般情况下通过测量OD260 值可以知道RNA 产量,测量OD260/OD280 比值可以是衡量蛋白质污染程度的指标之一,但是由于血清/血浆的RNA 含量特别低,已经低于分光光度计测量的下限,无法测量准确,因此一般无法通过测量OD 值或者比值的方法来判断纯度或者浓度,只能通过下游做荧光定量RT-PCR 来判断产量。同时无细胞的血清/血浆中的RNA 主要是小于100 nt 的小RNA,因此传统的电泳检测RNA 完整性并不适用于血清/血浆RNA。

    储存条件:室温,有效期6个月。(lysis buffer需4℃避光保存)


    一步法RT-PCR试剂盒厂家现货关键词:一步法RT-PCR试剂盒,一步法反转录试剂盒

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