长片段Taq PCR MasterMix价格

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北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括长片段Taq PCR MasterMix价格在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：长片段Taq PCR MasterMix价格
编号：ALH253
规格：0.5ml|5ml
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
本品包含Long Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液，浓度为2×。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点，可最大限度的减少人为误差。使用时只需加入DNA模板和引物既可。可用于长片段DNA扩增和GC含量高，二级结构丰富的片段扩增。

本品使用方便快捷，能避免 PCR 操作过程中的污染，使用时只需取适量MasterMix溶液，加入模板和引物，并加入去离子水补足体积，使MasterMix溶液浓度为1×即可进行反应。使用前请保证充分溶解并混匀，操作需在冰上进行。

产品组分：
Long Taq DNA Polymerase—————————0.05units/μl
MgCl2——————————————————4mM
dNTPs(dATP, dCTP, dGTP,dTTP)———————0.4mM

质量控制：
经检测无外源核酸酶活性；PCR 方法检测无宿主残余DNA ；能有效地扩增人基因中的单拷贝基因；室温存放一周，无明显活性改变。

储存条件：-20℃。

本品别名：长片段Taq PCR MasterMix|大片段DNA Taq PCR MasterMix

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·细胞凋亡DNA Ladder抽提试剂盒(分离基因组DNA)
编号：ALH158
英文名称：Cells/Tissue Apoptosis DNA Ladder Extraction Kit
规格：20次|50次
本试剂盒选择性从组织和细胞中分离提取凋亡DNA ladder，通过选择性分离基因组DNA与凋亡DNA ladder，最大限度的减少了基因组DNA对凋亡DNA ladder的观察干扰，因此显著的提高了检测敏感度，反应可在微量离心管进行，2.5小时完成，快速方便；无需有机抽提，检测灵敏度极高，可从约2000个凋亡细胞中检测到DNA ladder。推荐起始细胞量为5～10×10^5 个，但投入的细胞量可在1×10^5～5×10^6之间变化。原则是总细胞中应含有至少约1～2×10^4个凋亡细胞。多于2×10^4个凋亡细胞通常可获得十分清晰的凋亡DNA ladder。本试剂盒也可用于从组织中提取凋亡DNA ladder。但与培养细胞相比，整体动物组织凋亡细胞出现的时间、部位、程度等规律性差往往造成难以准确取材，可能显著影响实验结果。但只要组织确实发生凋亡，有经验的用户也可以使用本试剂盒从组织提取凋亡DNA ladder

试剂盒组份(50次)：
Extraction buffer ———10ml
10%SDS—————————1ml
Enzyme A————————1ml
Enzyme B————————1ml
Precipitant ——————7ml
为保持活性方便运输，Enzyme B 客户收到时为冻干粉，收到后加500μl 灭菌水（25 次）或者1ml 灭菌水（50次）溶解后－20℃保存。Enzyme A 和Enzyme B 为酶溶液，应该避免反复冻融降低活性，如果要分多次使用，最好按照每次使用量分装后－20℃保存。

注意事项
1. *化乙锭染色过度将降低DNA条带检测灵敏度，可用水冲洗凝胶10～30分钟。如冲洗过头可再用*化乙锭复染。可用更灵敏的DNA染色剂SYBR Green。也可进行丙*(代"烯")酰胺DNA凝胶电泳和DNA银染。
2. 对细胞进行干预处理后，凋亡可能仅在某一时间点或某一干预强度下最为明显。需要进行预试验确定最佳干预时间或强度。此时也可用凋亡小体/hoeschst染色试剂盒(ALH160)快速染色凋亡小体观察。
3. 推荐起始细胞量为5～10×10^5 个，但投入的细胞量可在1×10^5～5×10^6之间变化。原则是总细胞中应含有至少约1～2×10^4个凋亡细胞。多于2×10^4个凋亡细胞通常可获得十分清晰的凋亡DNA ladder。六孔板的一个孔相当于一个35 mm培养皿长满后可得到1～10×10^5 个细胞，如果细胞凋亡发生率为10%，经过处理可得到约1～10×10^4个凋亡细胞，应该足以获得清晰的凋亡DNA ladder。反之如果不能从＞3×10^6个细胞获得清晰的凋亡DNA ladder，表明其中凋亡细胞少于1%。此时增加细胞用量也难已奏效。
4. 从组织块提取凋亡DNA ladder。取10～20 mg组织块放入小玻璃匀浆器，加100～200μl Extraction buffer，上下手动匀浆15～20次。取出匀浆液，冰上5～10 min。振荡10秒。4500 rpm 10分钟收集上清液并转移到新1.5ml离心管，执行提取步骤3。另外一种方法是将30～50mg组织剪碎后在PBS里面匀浆，制成细胞悬液，离心收集细胞后接步骤2继续执行提取。
5. 采用高质量琼脂糖，使用宽度较小和厚度较窄的样品梳子，制作较薄的琼脂糖凝胶(厚度约2～4 mm)；用较低的电压进行慢速电泳，将显著增加凋亡DNA条带检测灵敏度。电泳距离不要太长，否则将使小的凋亡DNA条带弥散而降低分辨率。


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·长片段Taq DNA聚合酶
编号：ALH233
英文名称：Long Taq DNA Polymerase
规格：500U|3000U
本试剂盒所用的Long Taq是Taq聚合酶和有校正功能的聚合酶的混合酶，这种混合酶可以染色体和其它细胞器的DNA 为模板高效进行PCR 反应。在人的染色体上可以扩增长度可达27 kb 的DNA 片段，而以λDNA 为模板则可以扩增出高达40 kb 的片段。

产品组分(500U)：
Long Taq DNA Polymerase—————————————500U
10×Long Taq Buffer（2.5mM Mg2+ Plus）——————1ml

储存条件：-20℃。

·RNA酶抑制剂
编号：ALH056
英文名称：RNase Inhibitor
规格：2000U
本品是经过大肠杆菌表达的重组蛋白，与RNase A形成1：1复合体，对RNase 表现高度的非竞争性抑制（Ki=3×10-10 M）。该反应是可逆的，通过尿素及疏基类试剂能够解离复合体，使RNase 复活而抑制剂不可逆失活。本品属蛋白质性质，与其它竞争性抑制剂（核酸类、无机磷酸类）不同，可以很容易地通过*酚处理将其从反应体系中除去。

活性定义：抑制5 ng RNase A活性的50%所需要的酶量定义为1个活性单位（U）

储存条件：-20℃

·RNA保存液(长期保存RNA)
编号：ALH062
英文名称：RNA long-term preservation solution
规格：2ml
本品可以允许RNA在4℃过夜或-20℃保存至少1 年而免于降解。RNA 长期保存液是RNA 样品运输和中长期保存的最佳选择。需要时可用常规乙醇法沉淀回收RNA，或直接吸取储存于RNA 溶解保护液中的高浓度RNA(可达4 mg/ml)进行RNA 电泳、Northern Blot。

用RNA长期保存液溶解RNA沉淀：
1. 对固体RNA 沉淀，每0.4-4μg RNA 沉淀加入1μl RNA 长期保存液，反复吹打混匀或者室温振荡15-30 分钟溶解沉淀。干燥的RNA 沉淀难以溶解，可反复吹打混匀后50℃加热10-15 分钟。最好先用小体积无RNase 的TE 或水溶解RNA沉淀，然后按液态RNA 操作。
2. 对液态RNA 溶液，每0.4-4μg RNA 溶液加入1μl RNA 长期保存液，混匀。注意混合液中RNA 长期保存液的体积百分比不低于80%。
3. 测定OD 值。注意加入相应量的RNA 长期保存液做空白。
4. 将溶解的RNA 样品储存于-20℃或者-70 ºC。

从RNA长期保存液中沉淀RNA：
1. 估计RNA 溶液终体积。加入4 倍体积的无水乙醇，混匀。如果溶液体积过小操作不便，可加入RNase free water 稀释RNA 溶液,如果溶液中RNA 含量低于
0.25μg/μl，可加入5M NaCl(RNase free) 至终浓度0.2M,混匀，然后再加入4 倍体积乙醇。
2. 室温放置5 分钟。
3. 12000rpm，5 min。弃上清。风干，溶解。
4. 重新沉淀的RNA 溶解后可用于RT-PCR 反应。也可用于任何其他实验。

直接使用RNA长期保存液中的RNA：
直接吸取RNA长期保存液中的RNA，进行普通或甲醛变性电泳和Northern Blot。进行甲醛变性电泳时，最后上样的样品中的RNA长期保存液的浓度可高达50%。
附：甲醛变性电泳样品准备： 临用前，混合水（87μl），甲醛（81μl）, 50%甘油/含0.25 mg/ml *芬兰(48μl) 和20X MOPS (24μl). 将上述混合液和RNA 长期保存液中的RNA 样品等体积混合，55℃温育10 分钟，按照标准的甲醛变性电泳过程上样。

注意事项：
1. RNA 长期保存液可能抑制逆转录酶活性，做RT-PCR 反应前应该用乙醇沉淀RNA。
2. 在RNA 长期保存液中的RNA 的终浓度不应该超过4μg/μl。

储存条件：4℃


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·第一链cDNA高效合成试剂盒
编号：ALH262
英文名称：First Strand cDNA Synthesis Kit
规格：20μl×50次
本试剂盒以RNA为模板，用RTase/RNase抑制剂Mix、5×RT Reaction Mix高效合成第一链cDNA，操作简单。制品使用通过基因重组技术克隆表达的点突变型RNase H活性缺失的M-MuLV反转录酶。野生型的M-MuLV 包含的RNase H活性能够催化降解DNA/RNA杂合体中的RNA，因此在cDNA第一条链的合成反应中可能会降解RNA/DNA杂合体中的模板RNA。本酶M-MuLV(RNase Hˉ)的RNase H活性缺失，与M-MuLV 相比，具有更强的延伸能力和稳定性，可用于较长的cDNA合成以及高比例的全长cDNA文库的构建等。本试剂盒适用于第一链cDNA合成。可用于高拷贝、低拷贝基因的检测。合成cDNA片段长度最高可达12kb。

试剂盒组分(50次)：
RTase/RNase Inhibitor Mix-———————50μl
5×RT Reaction Mix———————————200μl
Oligo(dT)18(0.5μgμl)—————————50μl
Random primer (N6)———————————50μl
RNase free H2O—————————————1ml

注意事项：
1. 避免RNase污染。
2. 为保证反转录成功建议使用高质量的RNA样品。
3. 可选步骤（一般不需要）：如果RNA模板GC含量丰富或者有复杂二级结构，可以先只加RNA模板、引物和RNase free H2O混匀，65℃变性5分钟，冰上冷却，短暂离心后加入其它成分继续下面的反转录步骤。
4. RTase/RNase Inhibitor Mix非常粘稠，溶液容易吸附在管壁和吸头外导致损失，用前请点甩离心后使用，并且避免吸头外壁沾附损失。可以每次按照0.8μl使用，也不影响使用效果。

储存条件：-20℃，有效期1年。

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