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924
- 英文名:
RNA long-term preservation solution
- 保质期:
1年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
4℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")防止RNA降解剂北京价格,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:防止RNA降解剂北京价格
英文名:RNA long-term preservation solution
品牌:百奥莱博
规格:2ml
编号:ALH062
本品可以允许RNA在4℃过夜或-20℃保存至少1 年而免于降解。RNA 长期保存液是RNA 样品运输和中长期保存的最佳选择。需要时可用常规乙醇法沉淀回收RNA,或直接吸取储存于RNA 溶解保护液中的高浓度RNA(可达4 mg/ml)进行RNA 电泳、Northern Blot。
用RNA长期保存液溶解RNA沉淀:
1. 对固体RNA 沉淀,每0.4-4μg RNA 沉淀加入1μl RNA 长期保存液,反复吹打混匀或者室温振荡15-30 分钟溶解沉淀。干燥的RNA 沉淀难以溶解,可反复吹打混匀后50℃加热10-15 分钟。最好先用小体积无RNase 的TE 或水溶解RNA沉淀,然后按液态RNA 操作。
2. 对液态RNA 溶液,每0.4-4μg RNA 溶液加入1μl RNA 长期保存液,混匀。注意混合液中RNA 长期保存液的体积百分比不低于80%。
3. 测定OD 值。注意加入相应量的RNA 长期保存液做空白。
4. 将溶解的RNA 样品储存于-20℃或者-70 ºC。
从RNA长期保存液中沉淀RNA:
1. 估计RNA 溶液终体积。加入4 倍体积的无水乙醇,混匀。如果溶液体积过小操作不便,可加入RNase free water 稀释RNA 溶液,如果溶液中RNA 含量低于
0.25μg/μl,可加入5M NaCl(RNase free) 至终浓度0.2M,混匀,然后再加入4 倍体积乙醇。
2. 室温放置5 分钟。
3. 12000rpm,5 min。弃上清。风干,溶解。
4. 重新沉淀的RNA 溶解后可用于RT-PCR 反应。也可用于任何其他实验。
直接使用RNA长期保存液中的RNA:
直接吸取RNA长期保存液中的RNA,进行普通或甲醛变性电泳和Northern Blot。进行甲醛变性电泳时,最后上样的样品中的RNA长期保存液的浓度可高达50%。
附:甲醛变性电泳样品准备: 临用前,混合水(87μl),甲醛(81μl), 50%甘油/含0.25 mg/ml *芬兰(48μl) 和20X MOPS (24μl). 将上述混合液和RNA 长期保存液中的RNA 样品等体积混合,55℃温育10 分钟,按照标准的甲醛变性电泳过程上样。
注意事项:
1. RNA 长期保存液可能抑制逆转录酶活性,做RT-PCR 反应前应该用乙醇沉淀RNA。
2. 在RNA 长期保存液中的RNA 的终浓度不应该超过4μg/μl。
储存条件:4℃
本品别名:RNA保存液(长期保存RNA)|RNA长期保存液|防止RNA降解剂|长期RNA保存液|RNA防降剂
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文献和实验桂花树 已购买了Cell signaling 公司siRNA Kit,试剂盒含有已合成的目标基因siRNA序列,最近要将siRNA通过试剂盒提供的转染试剂转入人的肿瘤细胞,在实验中怎样防止siRNA降解。 zgfwindman 全部的东西都用无酶的就好了 zhongkui 关键是要有钱, 有钱就可以买一次性的无污染试剂和用品。 有钱就可以独占一个操作台或操作间,
裂解必需充分且操作迅速。裂解不完全会降低最后得率,因为一部分 RNA 会残留在未裂解的细胞中。细胞裂解之后要看不见颗粒状物质(结缔组织和骨除外)。在清洗和裂解细胞时最好在低温下操作,防止在操作过程中释放的内源 RNase 降解了 RNA。 4. 酵母和一些细菌由于细胞壁的特别结构,可以加入 Trizol 试剂同时加入无 RNase 的玻璃珠并剧烈振荡,使细胞裂解充分。2-8℃ 避光保存一年。 三、预备工作 RNA酶(Rnase)是导致 RNA 降解最主要的物质。此酶非常稳定,在一些极端
产物、血红蛋白中的乳铁蛋白、肌红蛋白、脂类、黏蛋白、尿素、离子、胆盐、多糖等。 2. 外源性 外部引入的抑制物。如:肝素抗凝剂、纤维素和硝酸纤维素、手套滑石粉、标本容器或采样器材上含有的抑制物 二、PCR 抑制物一般作用机制 PCR 抑制物中大部分的作用机制尚不完全清楚,但基本可以归为三类: 1. 干扰核酸提取过程中的细胞裂解; 2. 降解或包裹核酸; 3. 热稳定 DNA 聚合酶失活。 1. 干扰核酸提取过程中的细胞裂解 细胞裂解,核酸释放使得核酸与酶作用产生扩增。如果细胞裂解不完
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